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抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选
被引量:
4
1
作者
庄振宏
李兰
+4 位作者
孙宪连
张新艳
单超
汪世华
王宗华
《热带作物学报》
CSCD
2009年第1期64-69,共6页
从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感...
从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库。将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体。进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争ELISA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、3B3和4A2。
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关键词
黄曲霉
毒素
b
1
单链
抗
体
抗
体库
抗黄曲霉毒素b1
scFv菌株
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职称材料
题名
抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选
被引量:
4
1
作者
庄振宏
李兰
孙宪连
张新艳
单超
汪世华
王宗华
机构
福建农林大学生命学院
出处
《热带作物学报》
CSCD
2009年第1期64-69,共6页
基金
福建省自然科学基金项目(No.B0410010)
福建省教育厅计划项目(No.2005K030)
国家"863"计划项目(No.2007AA10Z430)资助
文摘
从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库。将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体。进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争ELISA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、3B3和4A2。
关键词
黄曲霉
毒素
b
1
单链
抗
体
抗
体库
抗黄曲霉毒素b1
scFv菌株
Keywords
aflatoxin
b
1
scFv
anti
b
ody li
b
rary
anti
b
ody against AF
b
1
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选
庄振宏
李兰
孙宪连
张新艳
单超
汪世华
王宗华
《热带作物学报》
CSCD
2009
4
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