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抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达
1
作者
夏汝山
王刚
+2 位作者
樊建勇
李巍
刘玉峰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期693-695,707,共4页
目的 :构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体 ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。方法 :从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中 ,扩增VH 及VL 基因。以回收的PCR产物为模板 ,用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL 基因。经XbaI/BamHI和XhoI/Hi...
目的 :构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体 ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。方法 :从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中 ,扩增VH 及VL 基因。以回收的PCR产物为模板 ,用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL 基因。经XbaI/BamHI和XhoI/HindIII酶切后 ,分别插入真核表达载体pWD中 ,构建重组载体pWDκH。经PCR和测序鉴定正确后 ,用lipofectAMINE 2 0 0 0转染CHO(dhfr-)细胞。取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达。结果 :构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDκH ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。结论 :在CHO(dhfr-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG 。
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关键词
基因工程
抗角蛋白全抗体
CHO(dhfr^-)
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题名
抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达
1
作者
夏汝山
王刚
樊建勇
李巍
刘玉峰
机构
第四军医大学西京医院皮肤科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期693-695,707,共4页
基金
国家高技术研究发展计划 (863)资助 (No .2 0 0 1AA2 1 5361 )
文摘
目的 :构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体 ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。方法 :从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中 ,扩增VH 及VL 基因。以回收的PCR产物为模板 ,用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL 基因。经XbaI/BamHI和XhoI/HindIII酶切后 ,分别插入真核表达载体pWD中 ,构建重组载体pWDκH。经PCR和测序鉴定正确后 ,用lipofectAMINE 2 0 0 0转染CHO(dhfr-)细胞。取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达。结果 :构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDκH ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。结论 :在CHO(dhfr-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG 。
关键词
基因工程
抗角蛋白全抗体
CHO(dhfr^-)
Keywords
gene engineering
anti-keratin intact antibody
CHO(dhfr^-)
分类号
R446.62 [医药卫生—诊断学]
R758.2 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达
夏汝山
王刚
樊建勇
李巍
刘玉峰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
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