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题名二斑叶螨抗螺螨酯品系GST基因的克隆与表达分析
被引量：7
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作者
吕娟娟
王进军
张寿芳
沈慧敏
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机构
甘肃农业大学草业学院
西南大学植物保护学院
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出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期438-445,共8页
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基金
公益性行业(农业)科研专项(201103020)
国家自然科学基金项目(31260442)
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文摘
【目的】揭示二斑叶螨Tetranychus urticae对螺螨酯的分子抗性机理。【方法】利用RT-PCR克隆了二斑叶螨的谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因cDNA全长序列,采用生物信息学软件分析了克隆基因的编码蛋白特性;利用实时荧光定量PCR方法分析GST基因在二斑叶螨的螺螨酯抗性与敏感品系中的表达差异。【结果】克隆获得的谷胱甘肽-S-转移酶2个基因分别被命名为TuGSTd1和TuGSTd2(GenBank登录号分别为:KC445659和KC445660)。序列分析发现,TuGSTd1的开放阅读框长度为648bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.47kDa,理论等电点为5.49;TuGSTd2的开放阅读框为648bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.57kDa,理论等电点为6.33。系统发育分析表明这两个基因与桔全爪螨Panonychus citri Delta家族的GST基因的氨基酸序列一致性为93%。实时荧光定量PCR结果表明,TuGSTd1和TuGSTd2在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量分别为敏感品系的5.60和3.75倍。【结论】GST基因在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量均显著高于敏感品系,据此推测GST基因的过量表达可能与其对螺螨酯的抗性形成有关。
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关键词
二斑叶螨
抗螺螨酯品系
GST
基因克隆
表达量
荧光定量PCR
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Keywords
Tetranychus urticae spirodeclofen-resistant strain glutathione S-transferase （GST） gene cloning expression level real-time fluorescent quantitative PCR
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分类号
Q966
[生物学—昆虫学]
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