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重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究
1
作者
肖真真
汤明元
+2 位作者
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018年第10期16-19,24,共5页
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切...
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL; TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0. 47μg/mL和1. 88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。
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关键词
重组P128蛋白
融合表达
纯化
抗葡萄球菌活性
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题名
重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究
1
作者
肖真真
汤明元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
机构
扬州大学兽医学院江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018年第10期16-19,24,共5页
基金
江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目
文摘
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL; TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0. 47μg/mL和1. 88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。
关键词
重组P128蛋白
融合表达
纯化
抗葡萄球菌活性
Keywords
P128 protein
fusion expression
purification
anti-staphylococcal activity
分类号
S853.72 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究
肖真真
汤明元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018
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