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液相色谱-质谱联用鉴定抗菌肽Cbf-14凝胶的有关物质 被引量:1
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作者 霍怡彤 徐柯卉 +4 位作者 陆宇婷 马菱蔓 周长林 杭太俊 宋敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期591-598,共8页
多肽Cbf-14是由14个氨基酸组成的新型抗菌肽。采用优化的反相高效液相色谱-电喷雾正离子化-四极杆飞行时间串联质谱(LC-ESI-QTOF/MS)检测方法,Agilent ZORBAX SB-Phenyl(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-20 mmol/L甲酸铵水溶液... 多肽Cbf-14是由14个氨基酸组成的新型抗菌肽。采用优化的反相高效液相色谱-电喷雾正离子化-四极杆飞行时间串联质谱(LC-ESI-QTOF/MS)检测方法,Agilent ZORBAX SB-Phenyl(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-20 mmol/L甲酸铵水溶液(甲酸调节pH为3.0)为流动相进行梯度洗脱,对Cbf-14凝胶中的有关物质进行了分离鉴定。在所建立的分析条件下,Cbf-14及其有关物质分离良好,检测并鉴定出Cbf-14凝胶及其强制降解试验样品中24个主要有关物质,其中5个为制剂生产工艺杂质,19个为降解产物,分析了有关物质的来源和多肽制剂的稳定性,为其生产工艺优化、贮存条件制定和质量控制提供了参考依据。 展开更多
关键词 抗菌肽cbf-14凝胶 有关物质 结构鉴定 液相色谱-质谱联用
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多肽突变体Cbf-14-2抗青霉素耐药细菌的活性研究 被引量:1
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作者 汪梦筱 马菱蔓 +3 位作者 刘含含 蒋美玲 窦洁 周长林 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期496-502,共7页
本研究主要探讨了新型多肽突变体Cbf-14-2对携带NDM-1基因重组菌(E.coli BL21(DE3)-NDM-1)的抗菌活性及机制。实验采用肉汤倍比稀释活菌计数法测定多肽对E.coli BL21(DE3)-NDM-1重组菌的MIC/MBC和杀菌曲线,评价多肽的体外抗菌活性;采用... 本研究主要探讨了新型多肽突变体Cbf-14-2对携带NDM-1基因重组菌(E.coli BL21(DE3)-NDM-1)的抗菌活性及机制。实验采用肉汤倍比稀释活菌计数法测定多肽对E.coli BL21(DE3)-NDM-1重组菌的MIC/MBC和杀菌曲线,评价多肽的体外抗菌活性;采用重组菌腹腔感染法建立小鼠败血症模型,评价多肽的体内抗菌活性;通过Zeta电位分析和流式细胞术探讨Cbf-14-2抗耐药细菌感染的作用机制。结果表明,多肽Cbf-14-2对携带NDM-1基因的耐药细菌具有良好的抗菌活性(MIC=16μg/m L),能在2 h内快速杀灭细菌;同时,多肽能显著降低感染小鼠肝、脾、肺和肾脏等组织的细菌负载量,对细菌显示出强效清除能力,将小鼠存活率由10%提高至70%。这主要由于Cbf-14-2能与细菌细胞膜表面负电荷发生静电结合,增加对膜的穿透能力。因此,Cbf-14-2有望成为治疗NDM-1耐药细菌诱发感染的潜在抗菌剂。 展开更多
关键词 cbf-14-2 活性 NDM-1
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共聚物P(NIPAM-co-AAEA)的合成及其抗菌凝胶涂层的性能 被引量:5
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作者 朱凯 朱保宁 李莉莉 《功能高分子学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期640-646,共7页
首先,通过调控N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)与N-羟乙基丙烯酰胺(HEAA)单体的投料比,采用可逆加成断裂链转移聚合(RAFT)反应得到共聚物P(NIPAM-co-HEAA);然后,该共聚物与丙烯酰氯反应得到HEAA侧链双键功能化的共聚物P(NIPAM-co-AAEA);最后,P(... 首先,通过调控N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)与N-羟乙基丙烯酰胺(HEAA)单体的投料比,采用可逆加成断裂链转移聚合(RAFT)反应得到共聚物P(NIPAM-co-HEAA);然后,该共聚物与丙烯酰氯反应得到HEAA侧链双键功能化的共聚物P(NIPAM-co-AAEA);最后,P(NIPAM-co-AAEA)与双键功能化抗菌肽通过一步光交联反应在聚二甲基硅氧烷(PDMS)基底上形成温敏凝胶涂层。采用飞行时间质谱、核磁共振氢谱、红外光谱、扫描电镜、水接触角、荧光成像等手段对共聚物和凝胶涂层的结构和性能进行了表征。结果表明:当n(NIPAM)∶n(HEAA)=87∶13时,P(NIPAM-co-AAEA)的低临界溶解温度(LCST)为36.6℃,接近人体体温37℃,有望实现体温条件下的温敏响应;同时制备的温敏凝胶涂层具有较好的抗细菌黏附能力和良好的抗菌性能。 展开更多
关键词 温敏聚合物 涂层 活性 黏附
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蚯蚓中3~30 kD抗菌肽的分离及抗菌效果研究 被引量:9
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作者 王庄 李曾夏子 +1 位作者 李文平 赵琴 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期50-53,共4页
从蚯蚓体内分离纯化30 kD以下的抗菌肽,并研究其抑菌效果.通过电击诱导蚯蚓产生抗菌肽、超滤浓缩脱盐以及截取3~30 kD的抗菌肽、用阳离子交换分离除去较多杂蛋白、凝胶过滤层析进一步精确分离提纯得到3~30 kD的蚯蚓抗菌肽,有H1和H2两... 从蚯蚓体内分离纯化30 kD以下的抗菌肽,并研究其抑菌效果.通过电击诱导蚯蚓产生抗菌肽、超滤浓缩脱盐以及截取3~30 kD的抗菌肽、用阳离子交换分离除去较多杂蛋白、凝胶过滤层析进一步精确分离提纯得到3~30 kD的蚯蚓抗菌肽,有H1和H2两个蛋白浓度较高的峰值.测得其蛋白质量浓度分别为6.82、7.46 mg/μL,其相对分子质量分别在5 856~7 823 kD和14 40~20 00.抑菌活性测定结果表明,H1和H2都有较好的抑菌效果,其中H1对草枯杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌有明显的抑菌效果,H2对巴氏杆菌、大肠杆菌和草枯杆菌也有明显的抑菌效果,H1的抑菌活性比H2高. 展开更多
关键词 蚯蚓 过柱层析 蛋白电泳 效果
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牦牛血胰蛋白酶水解液中抗菌肽的筛选研究 被引量:5
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作者 郝刚 唐善虎 李思宁 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期121-125,131,共6页
以牦牛血的胰蛋白酶水解液为原料,用Sephadex G-15凝胶柱,在以10 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H7.0)为洗脱液,流速为0.4 m L/min的洗脱条件下,利用抗菌肽与细菌细胞膜的吸附结合特性,分离出两个含抗菌肽组分的洗脱峰。研究显示抑菌活性大的洗... 以牦牛血的胰蛋白酶水解液为原料,用Sephadex G-15凝胶柱,在以10 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H7.0)为洗脱液,流速为0.4 m L/min的洗脱条件下,利用抗菌肽与细菌细胞膜的吸附结合特性,分离出两个含抗菌肽组分的洗脱峰。研究显示抑菌活性大的洗脱峰再经过RP-HPLC反复纯化,收集组分并检测抑菌活性,得到两个色谱纯的抗菌肽Yak B-1和Yak B-2。抑菌实验表明,抗菌肽Yak B-1/2对细菌和真菌都具有广谱抗菌活性;抗菌肽Yak B-2无论对G-菌还是G+菌的抗菌活性都比Yak B-1强,但Yak B-1对真菌的抑菌活性更强。研究结果可为牦牛血资源开发与利用提供参考依据。 展开更多
关键词 牦牛血 膜结合 色谱 活性
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乳铁蛋白胃蛋白酶水解物分离纯化抗菌肽的研究
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作者 张晨玥 郝刚 +2 位作者 蔡寅川 唐善虎 李思宁 《中国调味品》 CAS 北大核心 2022年第10期47-51,72,共6页
文章以乳铁蛋白胃蛋白酶水解液为原料,依次用DA201型大孔吸附树脂、Sephadex G-25、Sephadex G-15凝胶树脂对乳铁蛋白抗菌肽进行分离纯化。结果表明,乳铁蛋白酶解原液抗菌活性为MIC _(E.coli)=0.5 mg/mL和MIC_( S.aureus)=0.5 mg/mL;通... 文章以乳铁蛋白胃蛋白酶水解液为原料,依次用DA201型大孔吸附树脂、Sephadex G-25、Sephadex G-15凝胶树脂对乳铁蛋白抗菌肽进行分离纯化。结果表明,乳铁蛋白酶解原液抗菌活性为MIC _(E.coli)=0.5 mg/mL和MIC_( S.aureus)=0.5 mg/mL;通过大孔吸附树脂的静态吸附、解吸实验,确定分离条件:以85%乙醇溶液为洗脱剂,上样浓度为30 mg/mL,上样流速为2 mL/min,洗脱流速为1 mL/min,分离组分的抑菌活性为MIC _(E.coli)=0.25 mg/mL和MIC _(S.aureus)=0.25 mg/mL。Sephadex G-25凝胶柱分离条件:以去离子水为洗脱剂,洗脱速度为0.25 mL/min,上样浓度为20 mg/mL,上样体积为1 mL,纯化后得到3个主峰,其中组分b的抑菌活性相对较强,MIC _(E.coli)=0.125 mg/mL,MIC _(S.aureus)=0.125 mg/mL。组分b再经Sephadex G-15凝胶过滤色谱分离出2个峰,其中组分b-1具有较强抑菌活性,MIC _(E.coli)=0.125 mg/mL,MIC _(S.aureus)=0.0625 mg/mL。经分离纯化后的乳铁蛋白抗菌肽对E.coli的抗菌活性提高4倍,对S.aureus的抗菌活性提高8倍。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 分离纯化 大孔吸附树脂 葡聚糖
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