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金沙鲈鲤全长转录组测序分析与抗菌肽基因的鉴定
1
作者 朱思艺 邓龙君 +4 位作者 李天才 张扬 郭勇垚 罗伟 杜宗君 《湖北农业科学》 2025年第3期167-175,共9页
为进一步丰富金沙鲈鲤(Percocypris pingi)基因信息数据库,采用PacBio测序平台对金沙鲈鲤进行全长转录组测序。共获得499 007个全长非嵌合序列(Full-length non-chimeric read,FLNC),通过聚类和去冗余获得70 321个isoforms,isoforms的... 为进一步丰富金沙鲈鲤(Percocypris pingi)基因信息数据库,采用PacBio测序平台对金沙鲈鲤进行全长转录组测序。共获得499 007个全长非嵌合序列(Full-length non-chimeric read,FLNC),通过聚类和去冗余获得70 321个isoforms,isoforms的平均长度和N50分别为1 882 bp、2 243 bp。将isoforms与NR、GO、KEGG、KOG和Swiss-Prot 5个公共数据库进行比对,成功注释了57 521个isoforms,并鉴定到2 310个TF、16 225个LncRNA和35 314条CDS。鉴定到5个抗菌肽基因,包括2个hepcidin基因和3个hemoglobin基因。金沙鲈鲤的hepcidin-1、hepcidin-2与多鳞白甲鱼(Onychostoma macrolepis)的hepcidin亲缘关系较近;金沙鲈鲤的hemoglobin-1α与斑马鱼(Danio rerio)的hemoglobin α亲缘关系较近;金沙鲈鲤的hemoglobin-1β与斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)的hemoglobin 1β、hemoglobin 2β亲缘关系较近;hemoglobin-2β与多鳞白甲鱼的hemoglobin 2β亲缘关系较近。通过对金沙鲈鲤全长转录组的注释分析,阐明了金沙鲈鲤基因参与的生物过程、所在的代谢途径或信号通路等,可以更有效地探究抗菌肽在鱼类免疫中的作用。 展开更多
关键词 金沙鲈鲤(Percocypris pingi) 全长转录组 测序 抗菌肽基因 鉴定
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抗菌肽基因导入桑树获得抗病转基因植株 被引量：25
2
作者 王勇 贾士荣 +3 位作者 陈爱玉 唐益雄 夏志松 王晓峰 《蚕业科学》 CAS CSCD 1998年第3期136-140,共5页
用携带抗菌肽基因的农杆菌处理桑子叶，在含有羧苄青霉素（Cb）400～500mg／L和卡那霉素（Km）20mg／L的MS培养基上，有32.4％的子叶产生了不定芽；66.5％的不定芽在含有Cb300mg／L和Km30～40mg／L的培养基中,正常生长成2～3cm高的新稍... 用携带抗菌肽基因的农杆菌处理桑子叶，在含有羧苄青霉素（Cb）400～500mg／L和卡那霉素（Km）20mg／L的MS培养基上，有32.4％的子叶产生了不定芽；66.5％的不定芽在含有Cb300mg／L和Km30～40mg／L的培养基中,正常生长成2～3cm高的新稍；新梢在含Cb50mg／L和Km10mg／L的生根培养基中有72．6％形成完整根系。3次转化共获得12个株系55株KmR植株。不同株系桑苗叶片DNA点杂交分析显示，7个株系有阳性杂交信号。KmR株系桑苗的抗病性测定显示，5个株系共14株桑苗对青枯病具有较强抗性. 展开更多
关键词 桑树 抗菌肽基因 转基因植株 抗病性
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家蚕抗菌肽基因研究进展 被引量：13
3
作者 孙伟 沈以红 +1 位作者 向仲怀 张泽 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期196-203,共8页
抗菌肽是昆虫先天性免疫系统中十分重要的效应因子,近年来一直是昆虫免疫学研究的热点。家蚕作为鳞翅目昆虫的代表,其抗菌肽研究取得了长足进展。根据已经研究获得的抗菌肽基因序列在家蚕基因组中进行同源搜寻,共获得了40个家蚕抗菌肽... 抗菌肽是昆虫先天性免疫系统中十分重要的效应因子,近年来一直是昆虫免疫学研究的热点。家蚕作为鳞翅目昆虫的代表,其抗菌肽研究取得了长足进展。根据已经研究获得的抗菌肽基因序列在家蚕基因组中进行同源搜寻,共获得了40个家蚕抗菌肽基因。这些基因编码的多肽在大小、氨基酸组成和性质上差异很大,但基于结构性质可以分成3类:(1)具有α-螺旋结构并且缺乏半胱氨酸(cysteine,Cys)的线性抗菌肽;(2)富含脯氨酸或甘氨酸的组成性抗菌肽;(3)富含半胱氨酸的环形抗菌肽。以这3类结构作为主线,综述了家蚕抗菌肽近年来的研究进展。 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽基因 结构 线性抗菌肽 组成性抗菌肽 环形抗菌肽
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抗菌肽基因转化厚皮甜瓜的研究 被引量：7
4
作者 高宁宁 张显 +3 位作者 郭蔼光 田花丽 张勇 马建祥 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2158-2164,共7页
以厚皮甜瓜FY1的子叶为试材,研究不同激素组合和配比对甜瓜植株再生的影响,并用农杆菌介导法将银杏抗菌肽基因Gnk2-1转化甜瓜。结果表明:(1)甜瓜子叶的最佳愈伤组织及不定芽诱导培养基为MS+2.0mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1 IAA,出愈率和出芽... 以厚皮甜瓜FY1的子叶为试材,研究不同激素组合和配比对甜瓜植株再生的影响,并用农杆菌介导法将银杏抗菌肽基因Gnk2-1转化甜瓜。结果表明:(1)甜瓜子叶的最佳愈伤组织及不定芽诱导培养基为MS+2.0mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1 IAA,出愈率和出芽率均达95%以上;最佳芽伸长培养基为MS+0.2mg.L-1 KT;最佳生根培养基为1/2MS+0.1mg.L-1 IAA。(2)卡那霉素对甜瓜外植体的生长和分化有明显的抑制作用,适宜的筛选压力为100mg.L-1。(3)将子叶预培养2d,在农杆菌菌液浓度OD600值为0.5左右时,侵染外植体10min左右,共培养3d,转化效率最高。(4)经PCR鉴定获得了抗性植株,抗病性鉴定显示,转基因植株对枯萎病的抗性有所增强,发病迟缓。 展开更多
关键词 甜瓜 子叶 抗菌肽基因 农杆菌介导法 抗病性
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喂食家蚕核型多角体病毒诱导家蚕抗菌肽基因表达 被引量：6
5
作者 唐芬芬 杨伟克 +3 位作者 张永红 朱峰 邵榆岚 白兴荣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2191-2195,共5页
【目的】阐明家蚕抗菌肽基因对病毒感染的中肠免疫应答模式,为揭示昆虫抗病毒机制提供参考。【方法】采用喂食家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)给家蚕的方式进行诱导,以实时荧光定量PCR检测诱导后家蚕抗菌... 【目的】阐明家蚕抗菌肽基因对病毒感染的中肠免疫应答模式,为揭示昆虫抗病毒机制提供参考。【方法】采用喂食家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)给家蚕的方式进行诱导,以实时荧光定量PCR检测诱导后家蚕抗菌肽基因的表达情况,并比较Bm NPV诱导下8类已知家蚕抗菌肽主基因(cecropin D、moricin、gloverin2、defension B、attacin1、enbocin2、lysozyme和lebocin3)在肠道组织中表达水平的差异。【结果】在喂食Bm NPV处理3 h时,家蚕中肠组织中呈上调表达的抗菌肽基因仅有moricin基因;处理6 h时,cecropin D、gloverin2、moricin基因转录水平均呈明显的上调趋势,尤其以gloverin2基因的诱导活性相对最高,是对照组gloverin2基因的9.22倍;而在处理12和24 h时检测,发现8类已知家蚕抗菌肽基因表达量均小于1.0,呈下调趋势。【结论】Bm NPV侵染家蚕后gloverin2基因表达量明显上调,可能是gloverin2基因作为主要功能基因在病毒侵染早期过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒(BmNPV) 抗菌肽基因 诱导 表达
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马铃薯转萝卜抗菌肽基因植株的获得及其抗晚疫病的初步鉴定 被引量：5
6
作者 任玉霞 陈凌娜 +7 位作者 刘桂珍 王晴 杨生牛 石春鸿 李婷婷 侯路珍 陈继峰 陈正华 《中国蔬菜》 北大核心 2012年第03X期68-73,109,共7页
为获得抗晚疫病的转基因马铃薯植株,采用根癌农杆菌介导法,以微型薯薯片为外植体,将萝卜抗菌肽基因(AFP)导入马铃薯栽培品种夏波蒂(Shepody)中,通过草甘膦抗性筛选和PCR检测获得了4株转基因试管苗,并经黑暗诱导获得了微型薯。采用离体... 为获得抗晚疫病的转基因马铃薯植株,采用根癌农杆菌介导法,以微型薯薯片为外植体,将萝卜抗菌肽基因(AFP)导入马铃薯栽培品种夏波蒂(Shepody)中,通过草甘膦抗性筛选和PCR检测获得了4株转基因试管苗,并经黑暗诱导获得了微型薯。采用离体叶片接种法,对微型薯长出的叶片进行抗晚疫病鉴定,结果表明这4个株系的抗病性均有一定程度的提高。 展开更多
关键词 马铃薯 抗菌肽基因(AFP) 基因转化 晚疫病
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萝卜抗菌肽基因AFP的克隆及其在大肠杆菌中的诱导表达 被引量：6
7
作者 侯路珍 刘发央 谢小冬 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期245-248,共4页
试验采用RT-PCR方法,从萝卜叶子中克隆得到抗菌肽基因AFP(antifungal protein)。该基因全长240个碱基,79个氨基酸。经测序证明克隆所得基因与GeneBank中发表的原序列一致。将此抗菌肽基因克隆到E. coli表达载体pET28a,在IPTG的诱导下表... 试验采用RT-PCR方法,从萝卜叶子中克隆得到抗菌肽基因AFP(antifungal protein)。该基因全长240个碱基,79个氨基酸。经测序证明克隆所得基因与GeneBank中发表的原序列一致。将此抗菌肽基因克隆到E. coli表达载体pET28a,在IPTG的诱导下表达出含有AFP的11.99 ODD,证明该AFP基因在原核表达系统中可以正常表达。 展开更多
关键词 萝卜 克隆 抗菌肽基因 诱导表达
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根癌农杆菌介导抗菌肽基因转化大豆的研究 被引量：2
8
作者 李春风 张兴政 +2 位作者 张洁莉 韩阳 宋书宏 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期348-352,共5页
为利用抗菌肽基因培育转基因大豆抗病材料,采用根癌农杆菌介导法将抗菌肽基因和绿色荧光蛋白融合基因转入大豆胚尖外植体。结果表明,60mg/L的卡那霉素可以对转化植株进行有效的筛选;在共培养时添加200μmol/L乙酰丁香酮有利于抗菌肽基... 为利用抗菌肽基因培育转基因大豆抗病材料,采用根癌农杆菌介导法将抗菌肽基因和绿色荧光蛋白融合基因转入大豆胚尖外植体。结果表明,60mg/L的卡那霉素可以对转化植株进行有效的筛选;在共培养时添加200μmol/L乙酰丁香酮有利于抗菌肽基因的转化;在生根培养基中不添加卡那霉素更有利于转化苗的成活。目的基因特异的PCR检测和绿色荧光蛋白表达分析,发现抗菌肽基因已转入大豆,并得到表达。 展开更多
关键词 大豆 遗传转化 胚尖外植体 抗菌肽基因 根癌农杆菌介导
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抗菌肽和抗菌肽基因 被引量：6
9
作者 梁世德 张士璀 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期30-31,共2页
关键词 抗菌肽 抗菌肽基因 哺乳动物纲
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眠期家蚕抗菌肽基因的转录表达分析 被引量：1
10
作者 杨伟克 唐芬芬 +1 位作者 刘增虎 董占鹏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期2474-2478,共5页
【目的】探究家蚕眠期抗菌肽基因的表达变化规律,为深入拓展理解眠期家蚕免疫防御机制提供新线索。【方法】以四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的家蚕幼虫为实验材料,利用抑菌曲线法测定血淋巴的抑菌活性,采用实时荧光定量PCR检测脂肪体抗... 【目的】探究家蚕眠期抗菌肽基因的表达变化规律,为深入拓展理解眠期家蚕免疫防御机制提供新线索。【方法】以四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的家蚕幼虫为实验材料,利用抑菌曲线法测定血淋巴的抑菌活性,采用实时荧光定量PCR检测脂肪体抗菌肽基因的表达情况。【结果】四龄眠0、12、24 h和五龄起蚕的血淋巴对金黄色葡萄球菌均无抑菌作用,而四龄眠12和24 h的血淋巴对大肠杆菌均有明显的抑菌作用。这表明眠期家蚕血淋巴出现了选择性抑菌活性。在四龄眠至五龄起蚕不同发育时间,抗菌肽基因Lebocin3和Moricin的表达量无显著变化;Attacin1基因仅在四龄眠24 h出现上调表达;CecropinB6和Gloverinv2基因的表达量逐渐减弱,呈现下调表达的趋势,而Enbocin2和DefensinB的表达量逐渐升高,呈现上调表达趋势。【结论】眠期家蚕抗菌肽基因表达规律并不一致,Attacin1、Enbocin2和DefensinB可能在家蚕眠期发挥一定的免疫防御功能。 展开更多
关键词 家蚕 眠期 抗菌肽基因 转录表达
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双价抗菌肽基因表达载体的构建 被引量：1
11
作者 张银东 金小平 +2 位作者 曾宪松 彭存智 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1994年第S1期61-66,共6页
将人工合成的抗菌肽Ｄ基因和抗菌肽Ｂ基因克隆到同一植物表达载体ｐＢⅠ１２１，且各自具有其３５ｓ启动子和Ｎｏｓ终止子。先将抗菌肽Ｄ基因及其启动子和终止子克隆到ｐＢ１２１ＨｉｎｄⅢ位点获得ｐＥＣＶⅠ重组子。然后将抗菌肽Ｂ基... 将人工合成的抗菌肽Ｄ基因和抗菌肽Ｂ基因克隆到同一植物表达载体ｐＢⅠ１２１，且各自具有其３５ｓ启动子和Ｎｏｓ终止子。先将抗菌肽Ｄ基因及其启动子和终止子克隆到ｐＢ１２１ＨｉｎｄⅢ位点获得ｐＥＣＶⅠ重组子。然后将抗菌肽Ｂ基因克隆到ｐＥＣＶⅠ的ＢａｍＨⅠ位点，经Ａｇａｒｏｓｅｇｅｌ检测和酶切鉴定获得具有抗菌肽Ｄ，抗菌肽Ｂ基因的双价基因表达载体ｐＥＣＶⅡ。 展开更多
关键词 抗菌肽D基因 抗菌肽B基因 双价抗菌肽基因植物表达载体
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昆虫抗菌肽基因表达调控机理 被引量：10
12
作者 程廷才 王根洪 +1 位作者 李娟 夏庆友 《蚕学通讯》 2004年第3期20-26,共7页
昆虫先天免疫应答主要通过模式识别受体识别入侵微生物 ,激活Toll和Imd信号途径 ,通过NF -κB样转录因子调控抗微生物肽基因的表达 ,合成高效广谱的抗微生物多肽 ,杀灭外源微生物。本文以果蝇的两个信号途径为例 ,通过与哺乳动物的TLR (... 昆虫先天免疫应答主要通过模式识别受体识别入侵微生物 ,激活Toll和Imd信号途径 ,通过NF -κB样转录因子调控抗微生物肽基因的表达 ,合成高效广谱的抗微生物多肽 ,杀灭外源微生物。本文以果蝇的两个信号途径为例 ,通过与哺乳动物的TLR (Toll-likereceptor)和TNFR (tu mour-necrosisfactorreceptor)信号途径的比较 ,我们综述了昆虫免疫应答的激活机理的新近研究成果 ,并讨论了Toll和Imd信号途径的进化关系和昆虫模式识别受体的功能分类。 展开更多
关键词 昆虫 抗菌肽基因 基因表达 调控机理
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抗菌肽基因转化辣椒的研究 被引量：15
13
作者 张银东 唐跃东 曾宪松 《华南热带农业大学学报》 2000年第1期1-4,共4页
以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3～ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1～ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5～ 1m... 以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3～ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1～ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5～ 1mg/L。利用农杆菌介导的三亲交配法将抗菌肽基因CecropinB ,CecropinD导入辣椒 ,获得了再生植株 ,经PCR和Southern杂交检测 ,表明目的基因已整合到辣椒核基因组中 。 展开更多
关键词 细菌病 辣椒 抗菌肽基因 转基因育种 抗病育种
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凡纳对虾penaeidin 3抗菌肽基因的克隆及特性分析 被引量：1
14
作者 杜志强 王建英 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期152-153,158,共3页
以凡纳对虾的penaeidin 3抗菌肽基因作为研究对象,对其进行基因克隆、氨基酸序列比对、系统进化树分析以及分子结构的初步预测等。研究结果表明:凡纳对虾penaeidin 3分子具有典型的对虾素分子结构特征,与其他已知的对虾素分子相似性较高。
关键词 凡纳对虾 penaeidin 3抗菌肽基因 基因克隆
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凡纳对虾penaeidin2抗菌肽基因的克隆与性质研究 被引量：1
15
作者 杜志强 王建英 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期135-137,共3页
抗菌肽分子是无脊椎动物先天免疫系统中,直接发挥免疫效应的分子;它在对抗病原细菌侵染的过程中发挥着重要的功能.本文以凡纳对虾对虾素抗菌肽基因penaeidin2作为研究对象,系统地进行了基因克隆、氨基酸序列比对、分子进化关系以及分子... 抗菌肽分子是无脊椎动物先天免疫系统中,直接发挥免疫效应的分子;它在对抗病原细菌侵染的过程中发挥着重要的功能.本文以凡纳对虾对虾素抗菌肽基因penaeidin2作为研究对象,系统地进行了基因克隆、氨基酸序列比对、分子进化关系以及分子结构的初步预测等研究.研究结果显示:Lva-pen 2基因是一个免疫反应相关基因,它在凡纳对虾的先天免疫系统中发挥着重要功能. 展开更多
关键词 凡纳对虾 penaeidin2抗菌肽基因 基因克隆 性质研究
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转抗菌肽基因的柑桔遗传转化研究 被引量：1
16
作者 陈善春 张进仁 +2 位作者 高峰 黄自然 陈凤珍 《广东蚕业》 1994年第2期62-62,共1页
柑桔是我国最重要的果树树种之一,绝大部分产区流行的柑桔溃疡病给柑桔业带来巨大的损失。柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌能力,我们的预备试验表明,它对柑桔溃疡病病原菌Xanthomonas campestris pv.Citri有很强的抑菌效应,本文报道以柞蚕抗菌... 柑桔是我国最重要的果树树种之一,绝大部分产区流行的柑桔溃疡病给柑桔业带来巨大的损失。柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌能力,我们的预备试验表明,它对柑桔溃疡病病原菌Xanthomonas campestris pv.Citri有很强的抑菌效应,本文报道以柞蚕抗菌肽基因转化柑桔的一些结果。 展开更多
关键词 柑桔溃疡病 柞蚕抗菌肽 基因转化 培养基 抑菌效应 下胚轴 病原菌 抗菌肽基因 杀菌能力 预备试验
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转抗菌肽基因酵母安全评价及在饲料中应用 被引量：3
17
作者 黄自然 廖富蘋 黄国庆 《广东蚕业》 2003年第1期34-37,共4页
1945年弗莱明(Fleming)发现青霉素,1952年瓦克斯曼(Waksman)发现链霉素,先后获得诺贝尔奖.抗生素的发现造福人类作出很大贡献.近来,由于滥用抗生素而诱发耐药性病原菌的产生,造成医疗上的困难,又由于抗生素的毒副作用及残留问题,日益引... 1945年弗莱明(Fleming)发现青霉素,1952年瓦克斯曼(Waksman)发现链霉素,先后获得诺贝尔奖.抗生素的发现造福人类作出很大贡献.近来,由于滥用抗生素而诱发耐药性病原菌的产生,造成医疗上的困难,又由于抗生素的毒副作用及残留问题,日益引起社会的重视.1998年欧共体禁止抗生素用作畜禽饲料添加剂,尔后,美国及日本均禁止抗生素超标的动物产品进口.2002年上半年我国发生的对虾中氯霉素事件,造成6亿美元的损失.抗生素在畜禽的肉奶蛋中残留影响人们的健康,同时又成为国际贸易的绿色壁垒.因此寻找新型抗生素成为当前急待解决的课题. 展开更多
关键词 转抗菌肽基因酵母 安全性评价 饲料添加剂 抗生素替代物
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天蚕抗菌肽基因的克隆及重组病毒的纯化
18
作者 鲁茂龙 黄君霆 +3 位作者 蔡幼民 甘人宝 吴祥甫 蒋海燕 《蚕业科学》 CAS CSCD 1992年第4期261-263,共3页
最近十多年来,以Chadwick、Boman和Natori为主的许多家实验室,对不同来源抗菌肽的结构、抗菌谱及其作用原理作了大量的和系统的研究。Cecropin类多肽不仅可杀死对烧伤病人来说是致命的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌,还能杀死病毒、寄生虫和... 最近十多年来,以Chadwick、Boman和Natori为主的许多家实验室,对不同来源抗菌肽的结构、抗菌谱及其作用原理作了大量的和系统的研究。Cecropin类多肽不仅可杀死对烧伤病人来说是致命的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌,还能杀死病毒、寄生虫和某些动物和植物的致病菌,并证明对某些类型癌症、疱疹、感冒、痢疾、锥虫病以及布鲁氏菌均有疗效。有的实验室还计划用抗菌肽治疗AIDS和将其基因引入植物中以提高抗菌能力。目前,国内外一些实验室利用大肠杆菌、酵母等表达载体来表达cecropin类基因,但在这两种系统内表达有一定的困难。我们企图以昆虫NPV表达质粒来高效表达cecropin基因。 展开更多
关键词 天蚕 抗菌肽基因 克隆 重组病毒
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抗菌肽基因导入马铃薯“甘农薯1号”的初步研究 被引量：6
19
作者 邢小萍 《甘肃农业科技》 2004年第11期12-15,共4页
利用已构建载体 p TB M2 0 ,转化马铃薯普通栽培种“甘农薯 1号”试管苗的研究结果表明 ,以 Kan 5 0mg/ L 和 1 0 0 mg/ L 作为筛选转基因细胞和植株的剂量 ,外植体预培养的时间为 4 8h,有利于 T- DNA向受体细胞的转移和整合 ,其转化率... 利用已构建载体 p TB M2 0 ,转化马铃薯普通栽培种“甘农薯 1号”试管苗的研究结果表明 ,以 Kan 5 0mg/ L 和 1 0 0 mg/ L 作为筛选转基因细胞和植株的剂量 ,外植体预培养的时间为 4 8h,有利于 T- DNA向受体细胞的转移和整合 ,其转化率最高达 1 7.86 % ;外植体经侵染后与病菌共培养 96 h其转化率最高为 1 6 .6 7% ;NAA浓度对外植体材料的成愈率有影响 ,以 1 .0 mg/ L和 2 .0 mg/ L较好 ,成愈率分别为 4 8.6 5 %和 4 8.5 7% ;分化培养基中不同激素配比以 MS+ 6 - BA 3 .0 0 m g/ L + GA3 1 0 .0 0 m g/ L和 MS+ 6 - BA 3 .0 0 mg/ L + IAA 0 .1 0 mg/ L为最佳 ,分化成苗率分别为 1 5 .79%、1 5 .0 0 % ;冠瘿碱分析表明 ,分化苗整合了抗菌肽 Shiva A基因 ; 展开更多
关键词 马铃薯 农杆菌介导 抗菌肽基因 马铃薯环腐病菌
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乌金猪、青峪猪和成华猪免疫器官与组织Toll样受体和抗菌肽基因表达比较研究 被引量：4
20
作者 张敬梅 顾以韧 +4 位作者 李江淩 陈晓晖 曾凯 吕学斌 高荣 《四川动物》 北大核心 2018年第5期525-532,共8页
Toll样受体(TLRs)和抗菌肽是机体天然免疫系统的重要组成部分,是抵御外界有害微生物或病毒入侵的重要屏障。乌金猪、青峪猪、成华猪是中国优良地方猪种,具有繁殖力高、抗病耐逆性强等优点。本实验比较了8月龄乌金猪、青峪猪、成华猪与... Toll样受体(TLRs)和抗菌肽是机体天然免疫系统的重要组成部分,是抵御外界有害微生物或病毒入侵的重要屏障。乌金猪、青峪猪、成华猪是中国优良地方猪种,具有繁殖力高、抗病耐逆性强等优点。本实验比较了8月龄乌金猪、青峪猪、成华猪与约克夏猪的消化道、呼吸道局部免疫组织和全身免疫器官的先天免疫特点,采用实时荧光定量PCR技术检测TLRs(TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR9)和抗菌肽(p BD-1、PR-39)基因在4种猪的胸腺、脾脏、扁桃体、肠系膜淋巴结和肺门淋巴结中的表达差异。结果显示,成华猪胸腺中TLR7、PR-39,脾脏中TLR4、TLR7,肠系膜淋巴结中TLR4、TLR9,肺门淋巴结中TLR1、TLR4、TLR7、TLR9 mRNA表达水平显著高于其他猪种(P <0. 05);乌金猪胸腺中TLR1、TLR9,扁桃体中TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR9、p BD-1,肠系膜淋巴结中TLR7 mRNA表达水平显著高于其他猪种(P <0. 05);青峪猪扁桃体和肠系膜淋巴结中PR-39 mRNA表达水平显著高于其他猪种(P <0. 05)。这些结果为进一步利用优良地方猪种杂交育种和筛选抗病分子标记提供了新的线索。 展开更多
关键词 猪 Toll样受体基因 抗菌肽基因 基因表达 免疫器官和组织
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