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抗膀胱癌单抗Fab段基因的克隆及表达 被引量:3
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作者 周丽君 王琰 +2 位作者 白银 张海荣 余莉章 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第2期117-121,共5页
目的:克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆k链和Fd段基因,克隆到Fab表达载体中,在大肠杆菌表达噬菌体抗体和可溶Fab;运用PCR介导... 目的:克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆k链和Fd段基因,克隆到Fab表达载体中,在大肠杆菌表达噬菌体抗体和可溶Fab;运用PCR介导的定位点突变改造V_H氨基端序列;用ELISA、免疫组化法等进行特异性鉴定。结果:从分泌抗膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆了重链Fd段和k链基因,在大肠杆菌中获得有抗原结合活性的噬菌体抗体和可溶性Fab的表达,但活性很弱,将V_H氨基端序列矫正为亲本单抗原始序列后,明显改善了其活性,通过ELISA、免疫组化及模拟抗体库筛选证实了所获抗体片段的特异性结合及在抗体库技术中的可用性。结论:获得了功能性抗膀胱癌小分子抗体,并再次提示抗体氨基端序列对抗体活性的影响的重要性。 展开更多
关键词 克隆 表达 抗膀胱癌 免疫球蛋白可变区基因 FAB 膀胱癌
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CDR3导向抗体库法人源化抗膀胱癌Fab的鉴定
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作者 周丽君 王欲晓 王琰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期384-386,共3页
目的:对通过CDR3导向抗体库法筛选到的3株人源化膀胱癌噬菌体抗体进行进一步分析鉴定。方法:用ELISA方法对筛选特异性克隆进行特异性鉴定、抗原表位的核实;采用硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力;选用活性较高的克隆进行膀胱癌组织的免... 目的:对通过CDR3导向抗体库法筛选到的3株人源化膀胱癌噬菌体抗体进行进一步分析鉴定。方法:用ELISA方法对筛选特异性克隆进行特异性鉴定、抗原表位的核实;采用硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力;选用活性较高的克隆进行膀胱癌组织的免疫组化实验。结果:3株阳性克隆可溶性表达后能够与膀胱癌EJ细胞特异性结合;与鼠源噬菌体抗体(BDI)相比,2株克隆的亲和指数比较低,均为0.25mol/L,1株克隆的亲和指数为0.7mol/L,略低于鼠源的亲和指数(0.9mol/L)的水平。选择活性较高的克隆进行膀胱癌组织的免疫组化实验,显示该克隆能够与癌组织特异性结合。结论:用CDR3导向库法获得的人源抗体片段基本保持了原鼠源单克隆抗体(mAb)BDI的特性。 展开更多
关键词 抗膀胱癌单克隆 噬菌体体库 鼠单克隆体人源化
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鸡新城疫病毒抗膀胱癌作用的体内、体外实验分析 被引量:1
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作者 马洪琴 《今日畜牧兽医》 2017年第7期11-11,共1页
目的是研究和分析鸡新城疫病毒(NDV)抗膀胱癌作用的体内、体外实验。方法是采用小鼠膀胱肿瘤模型方法进行研究。结果是体内实验表明:对于膀胱癌细胞,BCG、MMC、NDV均具有一定杀伤作用,而NDV注射至瘤对侧以及瘤内能抑制其生长,且注射至... 目的是研究和分析鸡新城疫病毒(NDV)抗膀胱癌作用的体内、体外实验。方法是采用小鼠膀胱肿瘤模型方法进行研究。结果是体内实验表明:对于膀胱癌细胞,BCG、MMC、NDV均具有一定杀伤作用,而NDV注射至瘤对侧以及瘤内能抑制其生长,且注射至瘤内的效果显著好于瘤对侧。体外实验表明:对于膀胱癌细胞,BCG、MMC、NDV均具有显著杀伤作用。结论:鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞的体内、体外均具有良好的杀伤作用。 展开更多
关键词 鸡新城疫病毒 抗膀胱癌作用 体内、体外实验
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抗人膀胱癌抗VEGF双功能基因抗体制备及体外效应研究 被引量:6
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作者 刘禄成 郭航 +3 位作者 范海涛 朱德淳 李然伟 李香云 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期605-606,共2页
目的 :研究制备抗人膀胱癌和抗血管内皮生长因子的双功能抗体 ,用以导向抑制肿瘤新生血管的形成。方法 :在制备抗人膀胱癌和抗血管内皮细胞生长因子单克隆抗体的基础上制备双功能抗体。结果 :双功能抗体的IC5 0为 10 - 9 5,抗血管内皮... 目的 :研究制备抗人膀胱癌和抗血管内皮生长因子的双功能抗体 ,用以导向抑制肿瘤新生血管的形成。方法 :在制备抗人膀胱癌和抗血管内皮细胞生长因子单克隆抗体的基础上制备双功能抗体。结果 :双功能抗体的IC5 0为 10 - 9 5,抗血管内皮生长因子抗体的IC5 0为 10 - 8 9,抗人膀胱移行细胞癌单克隆抗体的IC5 0为 10 - 8 3。结论 :双功能抗体的有效率明显高于单克隆抗体。 展开更多
关键词 膀胱癌/VEGF双功能基因 制备 体外效应 研究
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抗人膀胱癌双功能抗体的制备与鉴定 被引量:1
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作者 范海涛 刘禄成 +2 位作者 李平 李志 任明 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期341-343,共3页
目的 :制备抗人膀胱癌双功能抗体 ( Bf Ab)并进行体外实验与鉴定。方法 :提取膀胱癌抗原 ,应用膀胱癌抗原通过杂交瘤技术制备抗人膀胱癌单克隆抗体 ,后者经胃蛋白酶水解后制备抗人膀胱癌单克隆抗体的 F( ab′) 2 片段。然后将该片段通... 目的 :制备抗人膀胱癌双功能抗体 ( Bf Ab)并进行体外实验与鉴定。方法 :提取膀胱癌抗原 ,应用膀胱癌抗原通过杂交瘤技术制备抗人膀胱癌单克隆抗体 ,后者经胃蛋白酶水解后制备抗人膀胱癌单克隆抗体的 F( ab′) 2 片段。然后将该片段通过二次杂交制备杂交瘤 ,用其免疫新西兰白兔 ,血清经凝胶纯化后获抗人膀胱癌 Bf Ab,应用 ELISA和免疫组化方法进行鉴别。结果 :抗人膀胱癌 Bf Ab与抗人膀胱癌单克隆抗体呈阳性反应 ,与 BALB/C小鼠 γ球蛋白呈阴性反应 ;Bf Ab可以同时结合靶细胞的肿瘤抗原和效应细胞表面的触发分子 ,引发正常细胞对肿瘤细胞的防御机制。结论 :Bf Ab既能竞争性地与膀胱移行细胞癌抗原结合 ,又具有激活淋巴细胞的功能 。 展开更多
关键词 膀胱癌双功能 膀胱肿瘤 体制备 体鉴定 杂交瘤技术
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