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一种基于荧光图像的体外抗肿瘤药物快速筛选方法 被引量:1
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作者 聂晓静 赵筱萍 王毅 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期617-621,646,共6页
目的:建立一种基于荧光成像的抗肿瘤药物体外快速筛选系统。方法:①采用二乙酸荧光素(FDA)标记测定活细胞数法,评价26个乌药组分对的体外抗肿瘤活性,并对本方法的线性范围和精密度进行了考察;②在活性筛选结果的指导下,应用LC/MS对样品... 目的:建立一种基于荧光成像的抗肿瘤药物体外快速筛选系统。方法:①采用二乙酸荧光素(FDA)标记测定活细胞数法,评价26个乌药组分对的体外抗肿瘤活性,并对本方法的线性范围和精密度进行了考察;②在活性筛选结果的指导下,应用LC/MS对样品进行分析,初步推断药效活性物质。结果:①该方法在细胞密度为0~10 000/孔的范围内荧光强度与细胞个数线性相关(r2=0.9858),板内的精密度为9.41%;②在26个乌药组分中,筛选得到两个抗肿瘤活性较强的组分C13和C15,抑制率均达到90%以上。结论:本方法快速、稳定、简便、线性范围宽,可用于从复杂中药组分中快速筛选抗肿瘤活性物质。此外,根据LC/MS分析结果并结合文献报道,推断乌药中具有抗肿瘤活性的化合物为异波尔定碱。 展开更多
关键词 荧光素类 药物筛选试验 肿瘤 FDA 肿瘤 乌药 筛选
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循环肿瘤细胞药物敏感性指导的化学治疗在晚期胆系肿瘤中的临床疗效 被引量:3
2
作者 寇晓霞 郭玲玲 仇金荣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1098-1106,共9页
目的观察循环肿瘤细胞(CTC)药物敏感性指导的化学治疗在晚期胆系肿瘤中的临床疗效和安全性。方法收集2018年7月至2020年4月海军军医大学(第二军医大学)东方肝胆外科医院肿瘤生物治疗科收治的26例晚期胆系肿瘤患者,抽取患者外周血分离和... 目的观察循环肿瘤细胞(CTC)药物敏感性指导的化学治疗在晚期胆系肿瘤中的临床疗效和安全性。方法收集2018年7月至2020年4月海军军医大学(第二军医大学)东方肝胆外科医院肿瘤生物治疗科收治的26例晚期胆系肿瘤患者,抽取患者外周血分离和富集CTC,用胆系肿瘤中常用的固定化学治疗方案进行药物敏感性检测,选取最佳方案对患者进行化学治疗(CTC组)。选择同期19例行GEMOX方案(吉西他滨+奥沙利铂)化学治疗的晚期胆系肿瘤患者作为对照(GEMOX组)。观察两组患者化学治疗后的客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)及安全性。结果所有患者均可评价疗效与安全性,CTC组完全缓解1例,部分缓解4例,疾病稳定12例,疾病进展9例;GEMOX组部分缓解1例,疾病稳定10例,疾病进展8例。CTC组和GEMOX组患者的ORR分别为19.2%(5/26)和5.3%(1/19),DCR分别为65.4%(17/26)和57.9%(11/19)。CTC组患者的中位PFS为5.8个月(95% CI 4.5~7.2个月),GEMOX组为5.1个月(95% CI 4.6~6.4个月),差异无统计学意义(P=0.313)。CTC组患者的中位OS为13.6个月(95% CI 10.8~16.3个月),GEMOX组为7.9个月(95% CI 5.5~10.3个月),差异有统计学意义(P=0.003)。所有患者中,主要不良反应有贫血、中性粒细胞减少、血小板减少、乏力及厌食,均可耐受,且无治疗相关性死亡。结论 CTC药物敏感性指导的化学治疗提高了晚期胆系肿瘤反应率,延长了患者总生存期,且不良反应可耐受。CTC药物敏感性检测可操作性强,对临床准确选择个体化化学治疗方案有一定的指导价值,值得进一步推广。 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 抗肿瘤药物筛选试验 胆道肿瘤 化学治疗
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肝胆肿瘤模型与精准药物筛选新技术 被引量:1
3
作者 刘壮 高栋 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期515-520,共6页
肝胆肿瘤是包括原发性肝癌、胆管癌和胆囊癌在内的恶性肿瘤。目前,肝胆肿瘤已成为世界范围内癌症相关死亡的第二大病因,而对于肝胆肿瘤的治疗手段仍无法有效应对临床需求。因此,探索开发肝胆肿瘤精准药物筛选的实验技术,寻找临床治疗新... 肝胆肿瘤是包括原发性肝癌、胆管癌和胆囊癌在内的恶性肿瘤。目前,肝胆肿瘤已成为世界范围内癌症相关死亡的第二大病因,而对于肝胆肿瘤的治疗手段仍无法有效应对临床需求。因此,探索开发肝胆肿瘤精准药物筛选的实验技术,寻找临床治疗新策略新方法,为早期诊断和综合治疗提供新思路,是当前领域内的关键问题。本文主要围绕肝胆肿瘤个性化病理模型的构建及药物筛选方案,特异靶点药物的设计与筛选策略,基于人工智能和大数据分析的药物筛选策略等方面介绍肝胆肿瘤精准药物筛选新技术的最新研究进展,探讨其应用潜力,并展望未来发展方向。 展开更多
关键词 肿瘤 胆道肿瘤 人工智能 药物筛选试验 肿瘤
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化疗药物敏感试验在肝细胞癌患者化疗中的应用 被引量:4
4
作者 聂磊 吴东德 +1 位作者 张峰 夏晓勤 《临床肝胆病杂志》 CAS 2013年第8期616-619,共4页
目的采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同化疗药物对肝细胞癌(HCC)的敏感性来指导肝动脉和门静脉区域化疗的个体化化疗方案。方法选取我院2008年12月至2011年12月收治的不能手术切除的42例HCC患者肝癌样本,采用原代肝癌细胞培养联合MTT... 目的采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同化疗药物对肝细胞癌(HCC)的敏感性来指导肝动脉和门静脉区域化疗的个体化化疗方案。方法选取我院2008年12月至2011年12月收治的不能手术切除的42例HCC患者肝癌样本,采用原代肝癌细胞培养联合MTT法检测5-氟尿嘧啶、顺铂、丝裂霉素、阿霉素、羟基喜树碱、吉西他滨、奥沙利铂7种常用化疗药物的敏感性,并根据药敏实验选择个体化化疗方案,指导其中24例患者接受肝动脉和门静脉区域化疗,与传统肝动脉灌注化疗(TAI)治疗的20例患者对比观察疗效。敏感率的比较采用卡方检验,至疾病进展时间(TTP)的比较采用秩和检验。结果肝癌对药物敏感率依次为奥沙利铂64.3%、羟基喜树碱45.2%、顺铂40.5%、吉西他滨38.1%、阿霉素33.3%、5-氟尿嘧啶21.4%、丝裂霉素16.7%。根据药敏实验选择个体化化疗方案的药敏组出现治疗敏感的符合率为70.8%,并与对照组相比在客观缓解率(50.0%vs 20.0%,P=0.039)、疾病控制率(70.8%vs 35.0%,P=0.017)及TTP[(4.7±2.9)m vs(2.6±1.3)m,P=0.032]方面有明显优势。结论体外MTT法药敏实验可作为肝癌个体化化疗药物的筛选手段,用于指导肝癌肝动脉和门静脉区域化疗从而提高化疗疗效。 展开更多
关键词 肝细胞 药物筛选试验 肿瘤 化学疗法 肿瘤 局部灌注
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原代胶质瘤细胞化疗药物敏感性研究 被引量:2
5
作者 王宁 王伟 +4 位作者 杨日晓 王茂德 王拓 陈伟 李奇 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2010年第5期540-543,共4页
目的观察不同抗肿瘤药物在体外对原代人胶质瘤细胞的敏感性,为临床筛选化疗药物、制订个体化方案提供指导。方法 46例经手术后病理证实的胶质瘤新鲜组织标本进行体外原代培养,流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测替尼泊苷、尼莫司汀... 目的观察不同抗肿瘤药物在体外对原代人胶质瘤细胞的敏感性,为临床筛选化疗药物、制订个体化方案提供指导。方法 46例经手术后病理证实的胶质瘤新鲜组织标本进行体外原代培养,流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测替尼泊苷、尼莫司汀、甲氨蝶呤和替莫唑胺在体外对原代胶质瘤细胞的敏感性;分析不同化疗药物敏感性与患者性别、年龄和肿瘤病理分级之间的关系。结果人胶质瘤细胞对4种化疗药物敏感性的强弱程度依次为替尼泊苷(39.13%)、替莫唑胺(34.78%)、尼莫司汀(26.09%)和甲氨蝶呤(6.52%),组间差异具有统计学意义(x^2=14.770,P=0.002);甲氨蝶呤组患者对化疗药物敏感性最低,与其他各组比较差异有统计学意义(x^2=13.883,11.210,6.452;均P<0.05)。亚组分析提示,性别和年龄对化疗药物敏感性无显著影响(均P>0.05),但不同WHO病理分级对替莫唑胺化疗敏感性存在差异并具有统计学意义(x^2=4.305,P=0.038)。结论不同胶质瘤个体对化疗药物的敏感性不同,以替尼泊苷抗胶质瘤作用较强,替莫唑胺对高级别胶质瘤药物化疗效果更佳。流式细胞术可作为快速化疗药物敏感性检测方法,为胶质瘤筛选化疗药物并制订个体化方案。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 肿瘤联合化疗方案 药物筛选试验 肿瘤 流式细胞术
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维拉帕米对外照射导致的小细胞肺癌细胞系耐药性的逆转作用 被引量:2
6
作者 宋鹏 段蕴铀 +2 位作者 杨建军 黄友章 雷军慧 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期365-367,共3页
目的观察维拉帕米对分次外照射引发的小细胞肺癌细胞系NCI-H446耐药性的逆转作用。方法采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI-H446细胞进行分次外照射,总照射剂量为50Gy。用不同浓度的丝裂霉素(MMC)干扰,观察外照射前后NC... 目的观察维拉帕米对分次外照射引发的小细胞肺癌细胞系NCI-H446耐药性的逆转作用。方法采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI-H446细胞进行分次外照射,总照射剂量为50Gy。用不同浓度的丝裂霉素(MMC)干扰,观察外照射前后NCI-H446细胞存活率的变化;同时观察在上述干扰条件不变的前提下,加入逆转剂维拉帕米后其存活率的变化。结果在相同浓度MMC干扰下,照射组细胞的存活率均明显高于未照射组(P<0.01);加入逆转剂维拉帕米后,两组细胞的存活率差别不大(P>0.05)或者照射组细胞的存活率反而明显低于未照射组(P<0.01)。结论经逆转剂维拉帕米作用后,照射组细胞的耐药性几乎完全被逆转甚至对MMC更敏感。 展开更多
关键词 细胞系 小细胞肺癌 辐射 维拉帕米 药物筛选试验 肿瘤 丝裂霉素
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Gefitinib对人结直肠癌细胞的生长抑制作用与表皮生长因子受体表达关系的研究 被引量:4
7
作者 杨黎 陈玉英 +1 位作者 潘凤 梁后杰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期400-402,共3页
目的观察表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib对人结直肠癌细胞的生长抑制作用,探讨这种作用与结直肠癌细胞EGFR表达的关系。方法应用MTT法检测Gefitinib对6种结直肠癌细胞系的生长抑制效应,求出50%生长抑制剂量IC50;应... 目的观察表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib对人结直肠癌细胞的生长抑制作用,探讨这种作用与结直肠癌细胞EGFR表达的关系。方法应用MTT法检测Gefitinib对6种结直肠癌细胞系的生长抑制效应,求出50%生长抑制剂量IC50;应用反转录半定量PCR(RT-PCR)检测不同结直肠癌细胞中EGFR的mRNA水平;应用Western blotting检测结直肠癌细胞中EGFR及其磷酸化蛋白(p-EGFR)的表达水平。结果Gefitinib在体外抑制结直肠癌细胞生长的IC50值为6.5-172.7μmol/L,以Lovo细胞最为敏感,HT29和SW480为中度敏感,HCT116、LS174和SW620表现为耐药。除SW620细胞以外,其他细胞系均不同程度地表达EGFR mRNA,以Lovo细胞表达最强,与其他细胞系比较差异有统计学意义(P〈0.05);EGFR蛋白水平检测结果与mRNA相符,Lovo细胞的表达显著高于其他细胞系(P〈0.05),HT29、SW480、HCT116和LS174T表达差异不明显,SW620几乎不表达;p-EGFR蛋白在Lovo细胞中的表达亦显著高于其他细胞系(P〈0.05)。结论EGFR和p-EGFR的表达与Gefitinib对结直肠癌细胞的生长抑制作用可能存在相关性,EGFR和p-EGFR表达高则细胞对药物的敏感性好,但是EGFR不是决定结直肠癌细胞对Gefitinib敏感性的惟一因素。 展开更多
关键词 GEFITINIB 结直肠肿瘤 细胞系 肿瘤 受体 表皮生长因子 药物筛选试验 肿瘤
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短发夹RNA干扰黏着斑激酶对结肠癌多细胞球氟尿嘧啶敏感性的影响 被引量:2
8
作者 陈玉英 潘凤 +4 位作者 杨黎 向浏欣 蒋金妍 陈克力 梁后杰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期286-289,共4页
目的探讨抑制黏着斑激酶(FAK)在结肠癌HT29细胞中的表达能否提高HT29多细胞球对氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性。方法构建带有短发夹RNA(shRNA)靶向干扰FAK的重组体pGenesil-l-FAK,抑制FAK在HT29中的表达,采用实时定量PCR和Western blotting检... 目的探讨抑制黏着斑激酶(FAK)在结肠癌HT29细胞中的表达能否提高HT29多细胞球对氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性。方法构建带有短发夹RNA(shRNA)靶向干扰FAK的重组体pGenesil-l-FAK,抑制FAK在HT29中的表达,采用实时定量PCR和Western blotting检测其在单层细胞和多细胞球中的干扰效率。采用血球计数板计数法检测多细胞球在各时间点的增殖速度,流式细胞术检测干扰对5-FU诱导的多细胞球凋亡的影响,CCK-8法检测单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性的变化。结果用重组体pGenesil-l-FAK靶向干扰FAK能显著抑制单层细胞FAKmRNA,并能抑制单层细胞和多细胞球FAK蛋白的表达。多细胞球的增殖速度并不受FAKshRNA干扰的影响,各组间在各时间点均无显著性差异(P>0·05)。流式细胞术结果显示,FAKshR-NA干扰能够使多细胞球的自发凋亡率(16·48%±1·18%)和5-FU诱导的凋亡率(21·50%±2·62%)显著增加(P=0·000、P=0·001),且两者之间差异显著(P=0·003)。CCK-8法检测结果显示,FAKshRNA干扰提高了单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性,且两者无显著差异(P>0·05),从而逆转了因三维球体结构产生的多细胞耐药性。结论FAK靶向RNA干扰虽不影响多细胞球的增殖,但能促进多细胞球凋亡,并增加多细胞球对5-FU的敏感性;FAK可能介导了结肠癌的多细胞耐药。 展开更多
关键词 球形体 细胞 黏着斑激酶 RNA干扰 结肠肿瘤 基因表达 药物筛选试验 肿瘤
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索拉非尼和沙利度胺单独及联合用药对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响 被引量:1
9
作者 郭振亚 叶军锋 +1 位作者 谢乾坤 王广义 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第5期908-910,共3页
目的探讨索拉非尼和沙利度胺单独用药及联合用药对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响。方法采用孵化7 d的白皮种蛋做成CAM模型,随机分为空白对照组、索拉非尼组、沙利度胺组和联合用药组。加药处理后继续孵育2 d,剪取CAM并固定标本,镜... 目的探讨索拉非尼和沙利度胺单独用药及联合用药对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响。方法采用孵化7 d的白皮种蛋做成CAM模型,随机分为空白对照组、索拉非尼组、沙利度胺组和联合用药组。加药处理后继续孵育2 d,剪取CAM并固定标本,镜下拍照,计算CAM血管覆盖率。多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果沙利度胺和索拉非尼组血管覆盖率相对于空白对照组有明显差异[(30.2±2.9)%vs(38.3±2.7)%;(26.5±2.1)%vs(38.3±2.7)%,P值均<0.05],联合用药组与沙利度胺组、索拉非尼组对比差异均有统计学意义[(12.6±1.5)%vs(30.2±2.9)%;(12.6±1.5)%vs(26.5±2.1)%,P值均<0.05]。结论索拉非尼、沙利度胺均有良好的抗血管生成作用,而联合用药可使抗血管效果更加显著。 展开更多
关键词 血管生成抑制剂 药物筛选试验 肿瘤 鸡胚
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肝细胞癌多组学分子分型及其在精准诊疗中的应用 被引量:4
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作者 董良庆 高强 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期510-514,共5页
肝细胞癌是我国第三大癌症死因。近年来,靶向和免疫治疗的应用使得肝癌患者生存率得到提高。但受限于肿瘤异质性及疗效预测生物标志物的缺乏,肝细胞癌患者对治疗应答存在显著差异,而以蛋白基因组为核心的多组学研究以及高通量药物筛选... 肝细胞癌是我国第三大癌症死因。近年来,靶向和免疫治疗的应用使得肝癌患者生存率得到提高。但受限于肿瘤异质性及疗效预测生物标志物的缺乏,肝细胞癌患者对治疗应答存在显著差异,而以蛋白基因组为核心的多组学研究以及高通量药物筛选平台的发展,将有助于开发肝细胞癌新型临床治疗策略和精准用药疗效预测,从而逐步实现个体化的精准诊疗。 展开更多
关键词 肝细胞 遗传异质性 药物筛选试验 肿瘤 治疗学
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