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草鱼CD8α和CD207的表达及抗细菌免疫的功能研究
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作者 田丁 蒋飞 +4 位作者 陈春秀 李珂珂 卞柄杰 吴志新 陈孝煊 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期609-616,共8页
为探讨树突状细胞(Dendritic cells,DCs)表面重要的表型分子CD8α和CD207在草鱼(Ctenopharyngodon idella)DCs抗细菌免疫应答中的作用,实验从草鱼DCs的cDNA中扩增CD8α和CD207胞外区,构建重组表达质粒pET-32a-CD8α/CD207,并转化到感受... 为探讨树突状细胞(Dendritic cells,DCs)表面重要的表型分子CD8α和CD207在草鱼(Ctenopharyngodon idella)DCs抗细菌免疫应答中的作用,实验从草鱼DCs的cDNA中扩增CD8α和CD207胞外区,构建重组表达质粒pET-32a-CD8α/CD207,并转化到感受态细胞Transetta(DE3),表达纯化后制备CD8α和CD207多克隆抗体。利用qPCR、Western Blot及流式细胞术揭示草鱼CD8α和CD207在抗细菌免疫过程中发挥的功能。结果显示,制备的草鱼CD8α和CD207多克隆抗体既可以识别原核表达的重组蛋白,也能识别鱼体内和培养细胞的内源性蛋白。从功能上看,灭活嗜水气单胞菌处理草鱼DCs后,在24h内,CD8α和CD207的表达量均有显著上调(P<0.05);且CD8α和CD207分子在草鱼DCs呈递抗原刺激混合淋巴细胞增殖这一过程中发挥重要作用。因此,草鱼DCs表现出与哺乳动物相似的保守免疫表型和功能,研究结果为阐明草鱼DCs介导的适应性免疫调节机制奠定基础。 展开更多
关键词 树突状细胞 CD8Α CD207 原呈递 抗细菌免疫 草鱼
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cd36基因在斑马鱼抗鳗弧菌免疫调控中的作用
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作者 李梦 王敏 +2 位作者 钟慎杰 邢泽宇 刘振辉 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期166-173,共8页
为了研究清道夫受体CD36在鱼类抗细菌免疫调控中的作用,本文将鳗弧菌(Vibrio anguillarum)腹腔注射到cd36基因敲除的斑马鱼(cd36^(-/-))和野生型斑马鱼(WT)中,发现突变体斑马鱼的活跃度和存活率均低于野生斑马鱼。分别取鳗弧菌(V.anguil... 为了研究清道夫受体CD36在鱼类抗细菌免疫调控中的作用,本文将鳗弧菌(Vibrio anguillarum)腹腔注射到cd36基因敲除的斑马鱼(cd36^(-/-))和野生型斑马鱼(WT)中,发现突变体斑马鱼的活跃度和存活率均低于野生斑马鱼。分别取鳗弧菌(V.anguillarum)感染的cd36^(-/-)和WT斑马鱼头肾组织进行转录组学测序分析,发现二者差异表达的基因主要富集在补体系统(Complement system)、系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus)、细胞因子之间的相互作用(Interaction between cytokines)和病毒致癌机理(Viral carcinogenesis)等与免疫相关的信号途径中。运用实时荧光定量PCR技术进一步证实,与野生型斑马鱼相比,cd36-/-斑马鱼中参与抗原呈递的mhc1和cd8基因、穿孔素基因、补体系统关键基因c3以及细胞因子基因il-4的表达都显著下调。综上,本研究证实CD36在斑马鱼抗鳗弧菌免疫调控中发挥重要作用。 展开更多
关键词 斑马鱼 CD36蛋白 抗细菌免疫 MHC1蛋白 C3蛋白
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