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抗组织转谷氨酰胺酶IgA抗体滴度和HLA-DQ分型在1型糖尿病合并乳糜泻诊断中作用
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作者 郝慧玲 张改秀 冯梅 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1025-1031,共7页
目的探讨抗组织转谷氨酰胺酶IgA(IgA-抗tTG)抗体滴度以及人类白细胞抗原(HLA)-DQ分型对1型糖尿病(T1DM)合并乳糜泻(CD)发生的预测价值。方法选取2019年11月到2023年11月在内分泌科就诊的所有<18岁的T1DM患儿和同期体检的健康儿童作... 目的探讨抗组织转谷氨酰胺酶IgA(IgA-抗tTG)抗体滴度以及人类白细胞抗原(HLA)-DQ分型对1型糖尿病(T1DM)合并乳糜泻(CD)发生的预测价值。方法选取2019年11月到2023年11月在内分泌科就诊的所有<18岁的T1DM患儿和同期体检的健康儿童作为研究对象,进行相关血清学分析及CD相关的HLA等位基因(DQ 2、DQ 8)检测。IgA-抗tTG抗体阳性患儿均行十二指肠病理活检。分析IgA-抗tTG滴度和Marsh分期之间相关性,采用ROC曲线评价IgA-抗tTG预测CD的诊断价值。结果纳入577例T1DM患儿,其中女性314例(54.4%),中位年龄10.0(5.0~16.0)岁。对照组150例,女性72例(48.0%),中位年龄9.5(6.0~17.0)岁。T1DM患儿中77例(13.3%)IgA-抗tTG抗体反应呈阳性(>18 IU/L),其中60例(77.6%)十二指肠组织病理学检查阳性,Marsh 2期19例,Marsh 3a期4例,Marsh 3 b期18例,Marsh 3 c期19例,均诊断为CD;余17例十二指肠组织病理学检查阴性,经过其他检查最终被确诊为小麦过敏或麸质敏感。46例IgA-抗tTG抗体阴性但仍存在谷胶依赖症状的T1DM组患儿也进行十二指肠病理活检,其中21例病理结果符合Marsh 2期或3期,同样诊断为CD。总计81例T1DM患儿确诊为合并CD。Spearman相关性分析显示81例T1DM合并CD患儿的IgA-抗tTG抗体水平与其Marsh分期之间呈显著正相关(r_(s)=0.76,P<0.001)。IgA-抗tTG抗体滴度预测CD阳性的ROC曲线下面积(AUC)为0.83(95%CI:0.72~0.93);IgA-抗tTG抗体滴度最佳截断值为87.65 IU/L,其预测CD的灵敏度为83.19%,特异度为92.20%。对照组血清IgA-抗tTG抗体反应均阴性。有CD与无CD的T1DM组之间HLA-DQ分型分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论IgA-抗tTG抗体滴度在T1DM患儿合并CD诊断中具有一定价值,HLA基因分型可能作为血清抗体检测结果的辅助筛查手段。 展开更多
关键词 1型糖尿病 抗组织转谷氨酰胺酶iga 乳糜泻 十二指肠活检 人类白细胞
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转谷氨酰胺酶4在前列腺癌组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 李磊 曹智 +5 位作者 许传亮 韦荣超 张振声 余永伟 王洋 孙颖浩 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期734-738,共5页
目的探讨转谷氨酰胺酶4(transglutaminase 4,TGM4)在前列腺癌诊断及预后评价中的可能价值。方法对159例前列腺癌患者的存档石蜡标本行TGM4免疫组织化学染色;根据染色情况将TGM4表达水平分为4级:不表达,弱表达,中表达和高表达。通过查阅... 目的探讨转谷氨酰胺酶4(transglutaminase 4,TGM4)在前列腺癌诊断及预后评价中的可能价值。方法对159例前列腺癌患者的存档石蜡标本行TGM4免疫组织化学染色;根据染色情况将TGM4表达水平分为4级:不表达,弱表达,中表达和高表达。通过查阅病历、调用我院前列腺癌随访数据库和电话随访等方式获得患者临床病理资料及随访信息;进而对TGM4表达水平与前列腺癌临床病理特征及预后信息的关系进行统计学分析。结果与癌旁组织相比,TGM4在前列腺癌组织中高表达(P<0.001),且表达水平在不同Gleason分级(P<0.001)和前列腺特异抗原(PSA)水平(P=0.005)间差异有统计学意义。单因素Cox回归分析提示TGM4高表达是前列腺癌生化复发的高危因素(P=0.020),但多因素Cox回归分析并不支持TGM4高表达是前列腺癌生化复发的高危因素(P=0.139)。结论 TGM4在前列腺癌中高表达,且在高Gleason分级和高PSA水平的前列腺癌中表达更高,值得进一步研究。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 免疫组织化学染色 谷氨酰胺4 生化复发
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组织型转谷氨酰胺酶与肾脏纤维化 被引量:3
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作者 刘森炎 黄海长 李晓玫 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期314-318,共5页
组织型转谷氨酰胺酶(tTG)是一个Ca2+依赖的具有转酰胺基作用的酶,它分布广泛,在许多生理和病理条件下发挥重要作用。近年来它参与组织纤维化的作用逐渐引起重视。tTG分泌到细胞外能够使很多细胞外基质蛋白成分之间发生交联,形成牢固结构... 组织型转谷氨酰胺酶(tTG)是一个Ca2+依赖的具有转酰胺基作用的酶,它分布广泛,在许多生理和病理条件下发挥重要作用。近年来它参与组织纤维化的作用逐渐引起重视。tTG分泌到细胞外能够使很多细胞外基质蛋白成分之间发生交联,形成牢固结构,抵抗降解,从而促使细胞外基质沉积,促进组织纤维化发展。本文简要叙述tTG的分子特征和生理及病理学意义,并着重介绍tTG和肾脏纤维化的联系。 展开更多
关键词 组织谷氨酰胺 肾脏纤维化 细胞外基质
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组织型转谷氨酰胺酶抑制剂对TGF-β_2诱导人LECs表达纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原的影响 被引量:3
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作者 邢星 胡义珍 陈博 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期58-61,共4页
目的观察组织型转谷氨酰胺酶(tTG)特异性抑制剂(MDC)对TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞(LECs)表达纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的影响。方法将含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养的LECs株HLE-B3传代后分为5组:无血清培养基培养的HLE-B... 目的观察组织型转谷氨酰胺酶(tTG)特异性抑制剂(MDC)对TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞(LECs)表达纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的影响。方法将含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养的LECs株HLE-B3传代后分为5组:无血清培养基培养的HLE-B3为正常对照组;加入10μg/L TGF-β2处理的HLE-B3为TGF-β2组;10μg/L TGF-β2与100、200、400μmol/L MDC共同处理的HLE-B3为不同浓度MDC组。用半定量RT-PCR检测tTG、FN、Col-Ⅳ在HLE-B3中的表达,计算A(tTG/β-actin)、A(FN/β-actin)、A(Col-Ⅳ/β-actin)值。结果正常体外培养的HLE-B3中可表达一定量的tTG、FN及Col-Ⅳ。与正常对照组相比,10μg/L TGF-β2组中tTG、FN、Col-Ⅳ的表达明显增加(t=33.95,P<0.01;t=38.24,P<0.01;t=13.48,P<0.01);与TGF-β2组相比,100、200、400μmol/L MDC组中FN和Col-Ⅳ的表达明显减少(P<0.01)。100、200、400μmol/L MDC组各组间FN和Col-Ⅳ的表达差异均有统计学意义(P<0.01)。结论MDC可剂量依赖性地抑制TGF-β2诱导的LECs中FN、Col-Ⅳ表达的增加。tTG可促进人LECs表达FN、Col-Ⅳ,并参与后囊膜混浊(PCO)的形成。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 组织谷氨酰胺 细胞外基质 后囊膜混浊
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肾间质纤维化组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子共表达 被引量:5
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作者 陈东 黄海长 喻陆 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期143-146,共4页
目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和结缔组织生长因子 (CTGF)在肾间质纤维化组织中的表达及二者的关系。方法: 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组 (5只 )、模型组(6只)、依那普利治疗组(6只)。术... 目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和结缔组织生长因子 (CTGF)在肾间质纤维化组织中的表达及二者的关系。方法: 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组 (5只 )、模型组(6只)、依那普利治疗组(6只)。术后 9天处死各组大鼠,肾组织标本用过碘酸-席夫染色(PAS)确证肾间质纤维化病变。以免疫组织化学染色方法观察肾组织内tTG和CTGF的表达部位,以及细胞外基质成份纤维连接蛋白(FN)的表达变化。用Western蛋白印迹方法分析肾组织内tTG和CTGF蛋白表达水平。结果: 假手术组大鼠tTG,CTGF和FN分别在肾小管、肾间质区仅有微量表达,肾小球内无阳性表达;模型组大鼠tTG、CTGF和FN在肾小管、肾间质区的表达信号比假手术组强;依那普利治疗后三者表达减少。双重染色结果显示,在模型组肾间质tTG阳性表达部位同时表达CTGF,并且强度相似。Westernblot结果显示,模型组tTG和CTGF蛋白水平明显高于假手术组;依那普利治疗组tTG和CTGF蛋白水平明显低于模型组。各组大鼠肾内tTG蛋白水平与CTGF蛋白水平之间(r=0. 683,P<0. 05)以及tTG蛋白水平与肾间质内FN半定量水平之间 (r=0. 737,P<0. 05)均有显著相关关系。结论: tTG和CTGF可能共同参与肾间质纤维化。 展开更多
关键词 组织谷氨酰胺 结缔组织生长因子 肾间质纤维化 WESTERNBLOT 免疫组织化学染色方法 纤维连接蛋白(FN) 共表达 CTGF 单侧输尿管结扎 间质纤维化病变 依那普利 蛋白水平 蛋白表达水平 tTG 阳性表达 大鼠模型 组织标本
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尾加压素Ⅱ和组织型转谷氨酰胺酶在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 曲萌 王丹 +3 位作者 李才 李相军 苗春生 李蕴潜 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期207-210,I0001,共5页
目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据。方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤... 目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据。方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。术后第2周末处死各组大鼠。采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平。结果:HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生。免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系(r=0.724,P<0.05)。模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系(r=0.647,P<0.05;r=0.787,P<0.01)。结论:UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的。 展开更多
关键词 尾加压素Ⅱ 组织谷氨酰胺 单侧输尿管结扎 肾纤维化
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组织型转谷氨酰胺酶在皮肤增生性瘢痕中的作用 被引量:2
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作者 章伏生 陆树良 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期524-526,共3页
目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tissue tansglutaminase,tTG)在皮肤增生性瘢痕中的作用。方法:免疫荧光检测来自整形患者的增生性瘢痕和正常皮肤tTG的底物纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的含量,免疫组化检测增生性瘢痕皮肤和正常皮肤tTG... 目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tissue tansglutaminase,tTG)在皮肤增生性瘢痕中的作用。方法:免疫荧光检测来自整形患者的增生性瘢痕和正常皮肤tTG的底物纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的含量,免疫组化检测增生性瘢痕皮肤和正常皮肤tTG的含量,免疫印迹检测增生性瘢痕皮肤和正常皮肤tTG的含量,SDS电泳DNSC荧光显色测定tTG的活力。结果:(1)免疫荧光显示,增生性瘢痕皮肤tTG的底物FN的含量较正常皮肤显著增高(P<0.01);(2)免疫组化显示,增生性瘢痕真皮组织tTG含量较正常皮肤显著增多(P<0.01);(3)免疫印迹显示,增生性瘢痕组织tTG含量较正常皮肤明显增多(P<0.01);(4)增生性瘢痕组织tTG活性高于正常皮肤组织(P<0.05)。结论:增生性瘢痕形成过程与底物(胶原、FN)增加、tTG含量增多、活性增强、交联过度有关。 展开更多
关键词 瘢痕 组织谷氨酰胺 纤维连接蛋白 皮肤增生性瘢痕
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组织型转谷氨酰胺酶与玻璃体视网膜疾病 被引量:2
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作者 王辉 徐丽 刘哲丽 《眼科新进展》 CAS 2006年第2期156-157,共2页
组织型转谷氨酰胺酶在稳定细胞外基质、细胞凋亡、细胞粘附、细胞信号转导等多种生理病理过程中扮演重要角色,并参与了一些玻璃体视网膜疾病的病理过程。我们对此进行综述,以期对揭示这些疾病的发病机制和制定治疗方案有所帮助。
关键词 组织谷氨酰胺 细胞外基质 凋亡 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜色素变性
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组织型转谷氨酰胺酶与青光眼 被引量:1
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作者 靳睿 王大博 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第10期795-797,共3页
组织型转谷氨酰胺酶(tTG)是转谷氨酰胺酶家族中的一个重要成员,它广泛存在于体内各种组织和细胞中,是一种多功能钙依赖性蛋白酶。tTG可以催化蛋白质谷氨酰胺残基与赖氨酸残基发生交联反应,参与体内多种生理和病理过程,如细胞生长与分化... 组织型转谷氨酰胺酶(tTG)是转谷氨酰胺酶家族中的一个重要成员,它广泛存在于体内各种组织和细胞中,是一种多功能钙依赖性蛋白酶。tTG可以催化蛋白质谷氨酰胺残基与赖氨酸残基发生交联反应,参与体内多种生理和病理过程,如细胞生长与分化、细胞黏附、细胞凋亡以及信号传递等。近几年的研究发现,tTG在原发性开角型青光眼的发生发展和青光眼滤过术后滤过泡的瘢痕化过程中也发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 组织谷氨酰胺 青光眼 细胞外基质
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组织型转谷氨酰胺酶与人非小细胞肺癌细胞侵袭力的关系及其机制
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作者 朱郇悯 汤娟娟 +6 位作者 黎银燕 刘嘉熙 韦雪梅 王飞 陈晓湘 张雪雁 李孜 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3472-3474,共3页
目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;R... 目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;RT-PCR法、Real-Time PCR法及Western blot检测A549和PAα细胞株中tTG、EGFR和MMP-2的转录和表达水平,观察使用tTG或EGFR抑制剂后PAα细胞中tTG、EGFR、p-EGFR和MMP-2的表达水平变化。结果:PAα细胞株的侵袭能力为A549的165.3倍(P<0.05)。PAα细胞株的tTG、EGFR转录水平为A549细胞株的650.68(P<0.05)和34.4(P<0.001)倍。PAα细胞株的tTG、p-EGFR表达水平高于A549细胞株,MMP-2的转录水平在A549和PAα细胞株之间的差异没有统计学意义(P>0.1),但PAα的MMP-2表达水平高于A549。结论:PAα相对于A549具有高的侵袭力;其机制可能与EGFR的高表达和磷酸化、tTG和MMP-2的高表达有关;tTG可调控MMP-2的水平但它本身不受EGFR信号通路的调控。 展开更多
关键词 非小细胞肺 组织谷氨酰胺 侵袭力 表皮生长因子受体 基质金属蛋白 -2
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转谷氨酰胺酶改善大豆组织蛋白肉丸品质
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作者 迟玉杰 景言 李冰 《肉类研究》 2013年第4期5-9,共5页
为了获得高品质的肉丸制品,以添加大豆组织蛋白的肉丸为研究对象,采用转谷氨酰胺酶对其进行酶解改性。通过单因素试验和响应面优化试验,研究不同酶解条件对大豆组织蛋白肉丸品质的影响。结果表明:三因素对肉丸品质的影响主次顺序依次为... 为了获得高品质的肉丸制品,以添加大豆组织蛋白的肉丸为研究对象,采用转谷氨酰胺酶对其进行酶解改性。通过单因素试验和响应面优化试验,研究不同酶解条件对大豆组织蛋白肉丸品质的影响。结果表明:三因素对肉丸品质的影响主次顺序依次为酶添加量>反应温度>反应时间,最佳工艺条件为酶添加量0.3%、反应温度53℃、反应时间122min,在此条件下,产品的感官评分为22.5,比未改性产品的感官评分提高了0.8。综上所述,转谷氨酰胺酶能显著改善大豆组织蛋白肉丸的品质,具有较高的开发利用价值。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 大豆组织蛋白 肉丸 品质
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水稻红莲型细胞质雄性不育幼穗发育过程中组织型转谷氨酰胺酶活性比较 被引量:1
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作者 常逊 张再君 +1 位作者 李阳生 朱英国 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期183-188,共6页
以水稻红莲型细胞质雄性不育系粤泰A和保持系粤泰B的叶片和不同发育时期幼穗为材料,比较分析了水稻红莲型细胞质雄性不育幼穗发育过程中组织型转谷氨酰胺(tTG)酶活性变化,建立了适合水稻tTG酶活性分析的酶联免疫法(ELISA)测定反应体系... 以水稻红莲型细胞质雄性不育系粤泰A和保持系粤泰B的叶片和不同发育时期幼穗为材料,比较分析了水稻红莲型细胞质雄性不育幼穗发育过程中组织型转谷氨酰胺(tTG)酶活性变化,建立了适合水稻tTG酶活性分析的酶联免疫法(ELISA)测定反应体系。研究发现tTG酶活性受钙离子正调控,并且无论是粤泰A还是粤泰B,衰老叶片中tTG酶活性都高于新叶片,但粤泰A与粤泰B之间的差异不明显;不育系粤泰A自四分体到二核期的幼穗不同发育阶段,tTG酶活性随着花粉发育而增强,在二核期达到最高,而在保持系粤泰B中,tTG酶活性没有随发育进程发生显著变化。推断tTG酶与花粉败育过程中的细胞程序性死亡有关。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育 幼穗发育 组织谷氨酰胺 细胞程序性死亡
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基因沉默组织型转谷氨酰胺酶抑制SaOS-2细胞成骨分化
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作者 余慧镭 殷晓雪 +3 位作者 陈仲强 冷慧杰 宋纯理 刘忠军 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期448-453,共6页
目的研究组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,TG2)是否参与人SaOS-2细胞系成骨分化过程。方法使用携带短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒转染SaOS-2细胞以敲减TG2表达,以SaOS-2细胞及转染了含阴性对照shRNA病毒的SaO... 目的研究组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,TG2)是否参与人SaOS-2细胞系成骨分化过程。方法使用携带短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒转染SaOS-2细胞以敲减TG2表达,以SaOS-2细胞及转染了含阴性对照shRNA病毒的SaOS-2作为对照组,分别进行体外成骨诱导培养,并进行以下检测:诱导14 d后各组矿化情况(茜素红染色);诱导4、7 d后碱性磷酸酶活性及I型胶原、骨钙素、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的mRNA表达,并与诱导前的表达水平相比较。结果 SaOS-2细胞组及转染阴性对照shRNA组在体外成骨诱导过程中I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达和ALP活性逐渐增加,14 d时形成明显矿化结节,而TG2敲减后的SaOS-2细胞在诱导14 d时矿化水平显著低于对照组,诱导7 d时ALP活性及I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达水平显著低于对照组。结论组织型转谷氨酰胺酶参与SaOS-2细胞体外成骨分化及矿化。 展开更多
关键词 组织谷氨酰胺 SAOS-2细胞 成骨分化
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转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶构建三维角膜基质 被引量:2
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作者 李燕 陈建苏 +1 位作者 李晓霞 王伟 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期839-843,共5页
目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显... 目的检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径。方法胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组。倒置显微镜下每日观察细胞生长情况、Alamar-Blue试剂检测细胞增生、免疫荧光法检测凝胶内细胞波形蛋白、检测透光度、酶消化法检测胶原凝胶抗消化能力。结果实验组细胞胶原凝胶内附着和生长优于对照组,细胞在凝胶内呈树枝状生长。2组细胞均随培养时间延长明显增生(P=0.000)。共焦显微镜下见2组细胞胞浆波形蛋白均阳性表达,实验组细胞伪足更丰富。实验组透光度稍差于对照组。实验组抵抗胶原酶消化的能力显著增强。结论酶交联的胶原凝胶对角膜基质细胞无毒性作用,重构的基质层结构更加稳定,有利于组织工程角膜基质层的构建。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 交联 胶原凝胶 组织工程角膜
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MTG酶催化羊毛固定化溶菌酶的酶学性质及抗菌性能 被引量:2
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作者 黄栋 范雪荣 +2 位作者 崔莉 王强 王平 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1231-1236,共6页
利用新型的生物催化剂微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)催化溶菌酶在羊毛织物上的固定化。采用SDS-PAGE法探讨了溶菌酶作为MTG催化底物的可行性以及固定化溶菌酶的酶学性质及抗菌性能。研究结果表明,羊毛织物经过高锰酸钾预处理后可以实现溶... 利用新型的生物催化剂微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)催化溶菌酶在羊毛织物上的固定化。采用SDS-PAGE法探讨了溶菌酶作为MTG催化底物的可行性以及固定化溶菌酶的酶学性质及抗菌性能。研究结果表明,羊毛织物经过高锰酸钾预处理后可以实现溶菌酶的固定化。固定化酶的pH值稳定性和温度稳定性优于游离酶;与物理吸附法相比,MTG催化法可赋予固定化溶菌酶的羊毛织物更好的耐水洗性和操作稳定性;此外,固定化酶的低温(4℃)干储藏稳定性良好,30天内酶活仍维持在80%以上。抗菌测试结果表明,MTG催化法固定化溶菌酶的羊毛织物对金黄色葡萄球菌的抑菌率达73.23%,抗菌效果良好。 展开更多
关键词 微生物谷氨酰胺 羊毛 固定化 溶菌 学性质 菌性能
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超滤膜分级玉米糖肽的抗氧化和乙醇脱氢酶激活活性 被引量:1
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作者 丛万锁 王晓杰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第18期29-35,共7页
以玉米醇溶蛋白源玉米肽为研究对象,采用D-氨基葡萄糖和转谷氨酰胺酶对其进行酶法糖基化修饰制备玉米糖肽,然后利用截断分子质量为5、3和1 ku的超滤膜对玉米糖肽进行顺次分级分离,获得分子量>5、3~5、1~3和<1 ku四个组分。通过测... 以玉米醇溶蛋白源玉米肽为研究对象,采用D-氨基葡萄糖和转谷氨酰胺酶对其进行酶法糖基化修饰制备玉米糖肽,然后利用截断分子质量为5、3和1 ku的超滤膜对玉米糖肽进行顺次分级分离,获得分子量>5、3~5、1~3和<1 ku四个组分。通过测定各组分的抗氧化和乙醇脱氢酶激活活性,表征分子量对玉米糖肽体外生物活性的影响。结果表明:清除DPPH自由基的玉米糖肽组分的分子量分布在1~5 ku范围内;螯合亚铁离子、清除超氧阴离子自由基、还原力和激活乙醇脱氢酶的玉米糖肽组分的分子量集中在1~3 ku范围内,在浓度为2 mg/mL时,相应的活力分别为83.22%、59.39%、2.248和37.92%;而分子量<5 ku的玉米糖肽组分均具有清除羟基自由基的活性,说明超滤膜分级对玉米糖肽的生物活性影响较大,可以依据玉米糖肽的生物活性选择超滤组分。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 玉米糖肽 超滤 分子量 氧化活性 乙醇脱氢
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基于MTG酶催化的乳铁蛋白对羊毛织物抗菌整理
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《针织工业》 2010年第3期71-71,共1页
针对羊毛抗菌整理问题.利用新型生物交联剂MTG酶(微生物谷氨酰胺转胺酶).将具有抗菌作用的乳铁蛋白通过生物催化交联的方式固定到羊毛织物上.对羊毛织物进行抗菌整理研究。采用紫外分光光度法测定乳铁蛋白的固定效率.探讨了影响... 针对羊毛抗菌整理问题.利用新型生物交联剂MTG酶(微生物谷氨酰胺转胺酶).将具有抗菌作用的乳铁蛋白通过生物催化交联的方式固定到羊毛织物上.对羊毛织物进行抗菌整理研究。采用紫外分光光度法测定乳铁蛋白的固定效率.探讨了影响乳铁蛋白固定化的主要工艺参数.优化得出最佳工艺条件: 展开更多
关键词 羊毛织物 乳铁蛋白 菌整理 MTG 微生物谷氨酰胺 催化 分光光度法测定 最佳工艺条件
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壳聚糖-明胶共聚物的酶促合成及抑菌性质 被引量:4
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作者 周小华 骆辉 周桢 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期334-339,共6页
以纯化微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)催化壳聚糖和明胶合成壳聚糖-明胶共聚物。经红外光谱测试表明,共聚物在MTGase催化下形成了席夫共价键。经DTA分析结果表明,共聚物是通过席夫键连接的。质量分数为1%的纯化共聚物溶液用溶菌酶于p... 以纯化微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)催化壳聚糖和明胶合成壳聚糖-明胶共聚物。经红外光谱测试表明,共聚物在MTGase催化下形成了席夫共价键。经DTA分析结果表明,共聚物是通过席夫键连接的。质量分数为1%的纯化共聚物溶液用溶菌酶于pH=5.0、50℃水解60min,水解液中还原糖浓度比水解前增加72.4%;用胰蛋白酶于pH=8.50、37℃水解60min,水解液中游离氨基浓度比水解前增加35.8%;由原子力显微镜观察到共聚物呈分枝状,分析结果表明,共聚物由壳聚糖和明胶组成。壳聚糖-明胶共聚物的均分子量为36.38KDa,等电点为8.43,在pH=5.0的稀HCl中的溶解度为8.7g/L;壳聚糖-明胶收率随明胶/壳聚糖的质量比增加而升高,但是其抑制金黄色葡萄糖球菌的效果随着二者的比例增加而降低。MTGase催化合成壳聚糖-明胶共聚物的最佳条件为:明胶/壳聚糖的质量比为0.6,pH=6.0、t=50℃、搅拌反应时间40min。平衡时共聚物的收率达到64.5%,其抑制金黄色葡萄糖球菌的效果仍保留70%。 展开更多
关键词 壳聚糖 明胶 共聚物 微生物谷氨酰胺
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tTG小干扰RNA对人晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质沉积的抑制作用 被引量:1
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作者 邢星 胡义珍 +1 位作者 李世洋 马红利 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第1期11-14,19,共5页
目的探讨RNA干扰抑制组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)的表达对人转化生长因子β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)转分化和细胞外基质沉积的抑制作用。方... 目的探讨RNA干扰抑制组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)的表达对人转化生长因子β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)转分化和细胞外基质沉积的抑制作用。方法设计并合成针对tTG的3对小干扰RNA(siRNA):tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-3,用Real-time PCR和Western blot检测转染了siR-NA后HLE-B3细胞表达tTG mRNA和tTG蛋白的变化。然后将体外培养的HLE-B3细胞分为正常对照组、TGF-β2组和TGF-β2+siRNA组。48h后,用Western blot检测各组tTG、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronec-tin,FN)和Ⅳ型胶原(collagenⅣ,Col-Ⅳ)的表达。结果转染tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-348h后,tTG mRNA的表达分别下降为空白对照组的46.60%、12.84%、66.75%(均为P<0.05);tTG蛋白的表达量分别下降为空白对照组的60.49%、27.87%、55.91%(均为P<0.01)。Real-time PCR与Western blot检测结果一致显示了tTG-siRNA-2对tTG基因的抑制效果最佳。与正常对照组相比,TGF-β2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显增加(均为P<0.01);与TGF-β2组相比,TGF-β2+tTG-siRNA-2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显减少(均为P<0.01)。结论靶向tTG的siRNA可以显著降低tTG的表达水平,同时可以明显抑制TGF-β2诱导的HLE-B3细胞合成α-SMA、FN、Col-Ⅳ。提示tTG是介导TGF-β2诱导人LEC转分化和细胞外基质沉积的重要分子。 展开更多
关键词 RNA干扰 组织谷氨酰胺 细胞外基质 平滑肌肌动蛋白 晶状体上皮细胞 后囊膜混浊
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壳寡糖酶法糖基化修饰对玉米醇溶蛋白功能性质的影响 被引量:16
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作者 王晓杰 刘晓兰 +3 位作者 丛万锁 郑喜群 许英一 石彦国 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第8期13-20,共8页
为了提高玉米醇溶蛋白的生物利用率,以微生物转谷氨酰胺酶为催化剂,壳寡糖(分子质量为1 500 Da)作为酰基受体,通过糖基化反应修饰玉米醇溶蛋白,分析糖基化修饰对玉米醇溶蛋白物化性质和抗氧化活性的影响。红外光谱和游离氨基含量的测定... 为了提高玉米醇溶蛋白的生物利用率,以微生物转谷氨酰胺酶为催化剂,壳寡糖(分子质量为1 500 Da)作为酰基受体,通过糖基化反应修饰玉米醇溶蛋白,分析糖基化修饰对玉米醇溶蛋白物化性质和抗氧化活性的影响。红外光谱和游离氨基含量的测定结果表明,在转谷氨酰胺酶的催化下,玉米醇溶蛋白与壳寡糖发生了共价结合。与玉米醇溶蛋白和交联玉米醇溶蛋白相比,糖基化玉米醇溶蛋白的表面疏水性显著降低,表明其水溶性显著改善;糖基化玉米醇溶蛋白的抗氧化活性(包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除活性,还原力和亚铁离子螯合能力)显著提高,尤其是DPPH自由基清除活性,其EC50值为0.945 mg/m L;糖基化玉米醇溶蛋白的持水性、吸油性、乳化性和Zeta电位的绝对值均显著降低。实验结果可为糖基化玉米醇溶蛋白在食品工业的应用提供参考。 展开更多
关键词 玉米醇溶蛋白 壳寡糖 谷氨酰胺 氧化活性 物化性质
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