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抗白细胞介素6单克隆抗体抑制小鼠心脏移植急性排斥反应及其机制 被引量：2
1
作者 雷钧 陈知水 +4 位作者 方路 刘天德 袁荣发 王军 邵江华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期275-280,共6页
目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模... 目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模型组、移植对照组(注射rat-IgG)和移植治疗组(注射anti-IL-17mAb或anti-IL-6mAb)。观察各组移植心脏存活时间并检测病理组织学改变;Real-time PCR检测各组移植心脏中细胞因子IL-17、干扰素-γ(IFN-γ)及Th17细胞特异性转录因子RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测各组受鼠脾脏CD4+、CD8+T细胞中IL-17、IFN-γ的表达水平。结果①anti-IL-6mAb、anti-IL-17mAb输注均可显著抑制小鼠急性排斥反应的发生,移植心脏存活时间分别延长至(22.0±2.3)d、(13.0±1.8)d,anti-IL-6mAb组抑制排斥反应发生的效果更加显著。组织病理学结果显示anti-IL-6mAb组排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);②anti-IL-6mAb组移植心脏中IL-17、IFN-γ和RORγt mRNA的转录水平较rat-IgG对照组及移植模型组显著下降,anti-IL-17mAb输注可部分下调IFN-γmRNA的转录水平;③anti-IL-6mAb组受鼠脾脏CD4+及CD8+T细胞中IFN-γ+的比例均有不同程度的下降,且CD4+IFN-γ+T细胞较CD8+IFN-γ+T细胞下降更为明显,同时CD4+IL-17+T(Th17)细胞的比例在anti-IL-6mAb组中亦明显下降。结论 anti-IL-6mAb可有效抑制急性排斥反应小鼠体内Th17和Th1细胞的活化,并延长同种异体心脏移植物的存活时间。 展开更多
关键词 急性排斥反应 心脏移植 抗白细胞介素6单克隆抗体 白细胞介素-17 RORyt 干扰素-γ
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抗白细胞介素6单克隆抗体治疗延长小鼠同种心脏移植物存活时间的实验研究 被引量：1
2
作者 雷钧 何凡 +3 位作者 吴敏 郑翔 李舒媛 陈知水 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期197-201,共5页
目的观察应用抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6 monoclonal antibody,anti-IL-6 mAb)对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移... 目的观察应用抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6 monoclonal antibody,anti-IL-6 mAb)对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植治疗组(每日注射3 g/L anti-IL-6 mAb 0.1 mL)和移植模型组(注射等量生理盐水)。ELISA法检测受鼠移植术后第3、6天外周血IL-6的表达水平,观察各组移植心脏存活时间,病理分析检测排斥反应程度,流式细胞术(FCM)检测各组受鼠脾脏及移植心脏中CD4+CD25+调节性T细胞比例变化,RT-PCR检测移植心脏IL-6I、FN-γI、L-17、RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。结果①治疗组外周血IL-6表达水平较模型组明显降低(P<0.01);②治疗组移植心脏存活时间较模型组明显延长[(22.0±2.3)d vs(7.7±0.8)d,P<0.01],排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);③治疗组移植心脏中IFN-γI、L-6I、L-17和RORγt mRNA表达水平较模型组显著下降(均P<0.05),脾脏及移植心脏中浸润的CD4+CD25+调节性T细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论anti-IL-6 mAb治疗可抑制Th1、Th17型细胞因子的分泌,促进CD4+CD25+Foxp3+T细胞产生,抑制单个核细胞浸润并有效延长小鼠同种移植心脏的存活时间。 展开更多
关键词 心脏移植 急性排斥反应 白细胞介素6 单克隆抗体
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牛白细胞介素-8单克隆抗体制备及应用
3
作者 杨蕊 靳家鑫 +4 位作者 张泽 时文健 张广智 丁家波 鑫婷 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3830-3837,共8页
【目的】白细胞介素-8(IL-8)是重要的趋化因子,参与机体免疫反应,其水平升高与多种感染性疾病、自身免疫疾病等密切相关,也被鉴定为活动性肺结核病、结核性脑膜炎、牛结核病的检测靶标。本研究旨在制备针对牛IL-8的单克隆抗体,开发牛IL-... 【目的】白细胞介素-8(IL-8)是重要的趋化因子,参与机体免疫反应,其水平升高与多种感染性疾病、自身免疫疾病等密切相关,也被鉴定为活动性肺结核病、结核性脑膜炎、牛结核病的检测靶标。本研究旨在制备针对牛IL-8的单克隆抗体,开发牛IL-8夹心ELISA检测试剂盒,用于牛血清或血浆中IL-8的定量检测,为牛结核(bovine tuberculosis,b TB)及其他炎症相关疾病的诊断及免疫学指标检测提供工具。【方法】将牛IL-8基因分别连接至p GEX-6P-1和pc DNA3.1载体,并利用大肠杆菌与293F细胞进行表达,以GST亲和柱和镍柱纯化重组蛋白;采用真核表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备并筛选针对牛IL-8的单克隆抗体;通过棋盘法筛选最佳抗体对并建立夹心ELISA检测方法;定量检测排菌期结核病牛、非排菌期结核病牛和健康牛血浆中IL-8水平,评价单克隆抗体对天然牛IL-8的识别能力及其对结核病牛的检测效果。【结果】SDS-PAGE结果显示,原核和真核表达系统制备的IL-8均以可溶形式表达,且纯化的蛋白纯度高于90%;经3轮亚克隆筛选共获得2B8、2F5等5株稳定分泌牛IL-8抗体的单克隆细胞株,亚型鉴定均为Ig G1型;棋盘法筛选结果显示,4G10和3D5-HRP为最佳配对抗体;以4G10和3D5-HRP建立的ELISA方法对不同感染状态的结核病牛血浆进行定量检测,结果显示,结核病牛血浆中IL-8含量极显著高于健康牛(P<0.01)。【结论】成功制备抗牛IL-8的单克隆抗体并建立牛IL-8夹心ELISA检测方法,可实现对天然牛IL-8的定量检测,有潜力用于结核病牛的筛查和牛免疫学指标检测。 展开更多
关键词 牛 白细胞介素-8 单克隆抗体 ELISA 牛结核病
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山羊白细胞介素6双抗体夹心ELISA检测方法的建立
4
作者 王天星 田曦庆 +4 位作者 乔玉娥 张丹辉 何海军 陈德坤 马文涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期19-24,共6页
为建立山羊白细胞介素6(IL-6)双抗体夹心ELISA检测方法,试验将纯化的山羊IL-6重组蛋白作为免疫原分别免疫家兔(1 mg/只)和Balb/c小鼠(100μg/只),并将获得的兔抗羊IL-6多克隆抗体和鼠抗羊IL-6多克隆抗体分别作为捕获抗体和检测抗体,建... 为建立山羊白细胞介素6(IL-6)双抗体夹心ELISA检测方法,试验将纯化的山羊IL-6重组蛋白作为免疫原分别免疫家兔(1 mg/只)和Balb/c小鼠(100μg/只),并将获得的兔抗羊IL-6多克隆抗体和鼠抗羊IL-6多克隆抗体分别作为捕获抗体和检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测方法,并对临床采集的健康山羊和乳房炎患羊乳腺组织中IL-6含量进行检测。结果显示,IL-6重组蛋白大小为38 ku,经Western blot鉴定该蛋白反应原性良好。在ELISA检测中,捕获抗体的最佳浓度为10μg/mL,检测抗体的稀释度为1∶800。IL-6重组蛋白的浓度低至0.06 ng/mL时,P/N值仍大于2.1,表明该方法具有较高的灵敏性。批内及批间变异系数均小于10%,表明该方法具有良好的重复性。用该方法检测发现乳房炎患羊乳腺组织的IL-6含量显著高于对照组(P<0.01)。建立了一种IL-6双抗体夹心ELISA检测方法,为进一步监测山羊乳房炎提供一定的技术支撑。 展开更多
关键词 山羊 白细胞介素6 免疫 双抗体夹心ELISA
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唾液白细胞介素-33、抗唾液腺蛋白1抗体水平与原发性干燥综合征唾液腺损伤的相关性
5
作者 严佳欣 史一雯 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第12期1879-1884,共6页
目的分析唾液白细胞介素-33(IL-33)、抗唾液腺蛋白1(SP-1)抗体水平与原发性干燥综合征(pSS)唾液腺损伤相关性。方法选择2020年3月至2025年1月宜兴市人民医院收治的91例pSS患者记为观察组,另选择医院同时间段性别、年龄匹配的健康体检者4... 目的分析唾液白细胞介素-33(IL-33)、抗唾液腺蛋白1(SP-1)抗体水平与原发性干燥综合征(pSS)唾液腺损伤相关性。方法选择2020年3月至2025年1月宜兴市人民医院收治的91例pSS患者记为观察组,另选择医院同时间段性别、年龄匹配的健康体检者42例记为对照组。对比观察组与对照组的唾液IL-33(采用酶联免疫吸附法检测)、抗SP-1抗体(采用化学发光法检测)水平及临床资料,对比不同唾液腺超声检查(SGUS)评分患者唾液IL-33、抗SP-1抗体水平,分析pSS患者唾液IL-33、抗SP-1抗体水平与唾液流速、临床指标及SGUS评分的相关性。结果观察组的唾液IL-33、抗SP-1抗体水平高于对照组(P<0.05)。观察组的动态唾液流速、静态唾液流速低于对照组(P<0.05),观察组的中性粒细胞计数、CD4+细胞计数、免疫球蛋白IgG高于对照组(P<0.05)。颌下腺SGUS评分≥2分患者的唾液IL-33、抗SP-1抗体水平高于颌下腺SGUS评分<2分患者(P<0.05),腮腺SGUS评分≥2分患者的唾液IL-33、抗SP-1抗体水平高于腮腺SGUS评分<2分患者(P<0.05)。相关性分析结果显示,pSS患者唾液IL-33、抗SP-1抗体水平与动态唾液流速、静态唾液流速、CD4+细胞计数及SGUS评分均呈正相关(P<0.05),pSS患者唾液IL-33、抗SP-1抗体水平与IgG、中性粒细胞计数无相关性(P>0.05)。二元logistic回归分析显示唾液IL-33、抗SP-1抗体均为SGUS评分≥2分的独立危险因素(P<0.05)。结论唾液IL-33、抗SP-1抗体水平是pSS患者SGUS评分≥2分的独立危险因素,且与pSS患者唾液流速、CD4+细胞计数及SGUS评分呈正相关,二者有潜力作为评估pSS患者唾液腺损伤的指标。 展开更多
关键词 白细胞介素-33 抗唾液腺蛋白1抗体 原发性干燥综合征 唾液腺损伤 相关性
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重组牛白细胞介素4的原核表达及其单克隆抗体研制 被引量：9
6
作者 陈祥 张成全 +4 位作者 徐正中 孟闯 黄金林 潘志明 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期653-656,共4页
目的:原核表达重组牛白细胞介素4(rBoIL-4)并制备针对抗rBoIL-4的单克隆抗体(mAb)。方法:通过PCR从重组质粒pSP73-BoIL-4中扩增BoIFN-γ基因,分别克隆入表达载体pGEX-6p-1和pET-30a(+)中,构建重组菌并对其进行诱导表达、纯化和鉴定。以... 目的:原核表达重组牛白细胞介素4(rBoIL-4)并制备针对抗rBoIL-4的单克隆抗体(mAb)。方法:通过PCR从重组质粒pSP73-BoIL-4中扩增BoIFN-γ基因,分别克隆入表达载体pGEX-6p-1和pET-30a(+)中,构建重组菌并对其进行诱导表达、纯化和鉴定。以纯化的融合蛋白rHis-BoIL-4为免疫原,用纯化的rGST-BoIL-4为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIL-4的mAb。结果:获得表达BoIL-4基因的重组菌BL21(pGEX-6p-1-BoIL-4)和BL21(DE3)(pET-BoIL-4),重组蛋白相对分子质量(Mr)的大小分别为39 000和19 000,且以包涵体的形式存在。获得7株可稳定分泌抗rBoIL-4 mAb的细胞株,命名为2B8、4A10、5D6、5D8、7G10、8B7和10F8,这些mAb腹水的效价依次为5 000、160 000、10 000、640 000、5 000、40 000和40 000,mAb亚类均为IgG1。Dot-ELISA的结果表明,7株mAb只与融合蛋白rHis-BoIL-4和rGST-BoIL-4起反应,而不与其他重组细胞因子和对照细菌起反应,显示出良好的特异性。Western blot试验显示,7株mAb均能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时7株mAb均能与BoIL-4的标准品起反应。结论:7株抗rBoIL-4的mAb均具有高度的特异性,为进一步研究其在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 重组牛白细胞介素4 原核表达 单克隆抗体
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抗重组人白细胞介素18单克隆抗体的制备与特性研究 被引量：5
7
作者 马颖 邹全明 +2 位作者 朱永红 罗萍 毛旭虎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期412-414,417,共4页
目的 :获得有生物活性的小鼠抗重组人白细胞介素 18(rhIL 18)单克隆抗体。方法 :采用重组hIL 18免疫BALB C小鼠 ,应用杂交瘤技术 ,ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株并经多次克隆化。结果 :建立了 2株小鼠抗hIL 18单克隆抗体杂交瘤细胞 1C7和... 目的 :获得有生物活性的小鼠抗重组人白细胞介素 18(rhIL 18)单克隆抗体。方法 :采用重组hIL 18免疫BALB C小鼠 ,应用杂交瘤技术 ,ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株并经多次克隆化。结果 :建立了 2株小鼠抗hIL 18单克隆抗体杂交瘤细胞 1C7和 1F5 ,染色体数目分别为 92条和 90条 ,所分泌的抗体分别为IgG2a和IgG1,轻链均为κ型 ,腹水IgG抗体经亲和层析法纯化后纯度达 95 %以上 ,效价为 1× 10 - 4和 1× 10 - 5,Westernblot显示 2株单抗均能特异性识别 18 3kD处的rhIL 18蛋白。 1C7单抗的亲和常数Ka=1 7× 10 5,1F5的亲和常数Ka=1 3× 10 5。 2株单抗识别不同抗原表位。结论 :制备的 2株单抗为进一步研究IL 18的分子结构、生物学功能及其与免疫相关性疾病的关系提供了实验材料。 展开更多
关键词 抗重组人白细胞介素18 单克隆抗体 制备 特性 杂交瘤
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抗白细胞介素-8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病的临床研究 被引量：4
8
作者 车敦发 曹扬 +3 位作者 管海宏 叶楠 张敏 金洁 《医学研究生学报》 CAS 2006年第6期548-550,共3页
目的:观察新型抗白介素-8单克隆抗体乳膏外用治疗银屑病的疗效和安全性。方法:选取84例寻常型银屑病患者外用抗白介素-8单克隆抗体乳膏治疗8周,观察不良反应及皮损大小、颜色、肥厚、鳞屑等变化,以判断安全性和疗效。结果:治疗8周后,11... 目的:观察新型抗白介素-8单克隆抗体乳膏外用治疗银屑病的疗效和安全性。方法:选取84例寻常型银屑病患者外用抗白介素-8单克隆抗体乳膏治疗8周,观察不良反应及皮损大小、颜色、肥厚、鳞屑等变化,以判断安全性和疗效。结果:治疗8周后,11例基本痊愈,41例显著改善,痊愈率和有效率分别为13.1%和61.9%;其中点滴型的痊愈率和混合状的有效率最高,而进行期的痊愈率和有效率均高于静止期;其中只有1例出现轻度不良反应。结论:抗白介素-8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病有较好的临床疗效和安全性。 展开更多
关键词 抗白细胞介素-8单克隆抗体 银屑病
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人白细胞介素15单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1
9
作者 孙安源 孙汭 +2 位作者 田志刚 张建华 魏海明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期787-789,794,共4页
目的 :用rhIL 15与沙门氏菌裸菌相偶联制备IL 15单克隆抗体 (monoclonalantibody ,McAb) ,以便为疾病的诊断、治疗和发病机制的研究提供可靠的生物制剂。方法 :将纯化的rhIL 15蛋白与沙门氏菌裸菌相偶联制成免疫原 ,用脾内、腹腔、静脉... 目的 :用rhIL 15与沙门氏菌裸菌相偶联制备IL 15单克隆抗体 (monoclonalantibody ,McAb) ,以便为疾病的诊断、治疗和发病机制的研究提供可靠的生物制剂。方法 :将纯化的rhIL 15蛋白与沙门氏菌裸菌相偶联制成免疫原 ,用脾内、腹腔、静脉三种途径相结合免疫BALB c小鼠 ,以PEG为促融剂 ,将脾细胞与SP2 0细胞进行融合 ,HAT选择培养 ,间接ELISA筛选阳性克隆 ,通过多次克隆化 ,获得稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞株 ,并对所获得的细胞株及分泌的McAb特性进行了分析。结果 :获得 4株能稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞系 (hybridomacell,Hc) ,ELISA法检测其效价分别为 1:10 6 、1:10 7、1:10 7、1:10 7。Dotblot检测IL 15的灵敏度为 1 5ng ,其中一株 (1 7E4 )尚可用于Westernblot检测。结论 :成功制备了 4株IL 15McAb杂交瘤细胞系。 展开更多
关键词 人白细胞介素-15 单克隆抗体 制备 鉴定
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重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备 被引量：2
10
作者 陈飞虎 盛晓蓉 +2 位作者 吴亦伦 陈敏珠 智强 《安徽医科大学学报》 CAS 2000年第2期104-106,共3页
目的　制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法　应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目... 目的　制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法　应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果　获得了 2株能分泌抗rhIL 10单克隆抗体的杂交瘤细胞系 (1D3、2A3) ,无血清培养液效价为 1∶5 12、1∶2 5 6 ,腹水效价 1∶10 5、1∶10 4 。单克隆抗体为IgG2 亚类 ,染色体数目 98～ 10 3条。 2株杂交瘤细胞体外传代培养6个月以上 ,ELISA检测抗体滴度无明显降低。结论　制备的 2株单克隆抗体效价高 。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素10 单克隆抗体 杂交瘤
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人白细胞介素4单克隆抗体的研制及其鉴定 被引量：1
11
作者 姚智 庞学文 +2 位作者 郭淑君 田季德 陈慰峰 《北京医科大学学报》 CSCD 1991年第3期167-169,共3页
应用脾内免疫法免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,获得两株分泌IgG型抗人白细胞介素4单克隆抗体的杂交瘤细胞。用间接ELISA法可测出的抗原量100pg/ml;抗体的效价细胞培养基上清达1:16,腹水达1:1×10^(-5)。对E.coli表达的重组IL_4、商... 应用脾内免疫法免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,获得两株分泌IgG型抗人白细胞介素4单克隆抗体的杂交瘤细胞。用间接ELISA法可测出的抗原量100pg/ml;抗体的效价细胞培养基上清达1:16,腹水达1:1×10^(-5)。对E.coli表达的重组IL_4、商品化的IL_4及天然IL_4呈阳性反应,与E.coli蛋白及重组IL_1、IL_2、IL_3、IFNa及TNFa无交叉反应。 展开更多
关键词 白细胞介素 单克隆抗体 研制 鉴定
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白细胞介素17A单克隆抗体在非银屑病性皮肤病中的应用 被引量：1
12
作者 王玲艳 潘靖 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期445-448,共4页
白细胞介素(IL)-17在多种疾病的发病机制中起着重要作用。近年来,靶向IL-17家族成员IL-17A的单克隆抗体已经应用于多种皮肤病的治疗。该文对司库奇尤单抗、依奇珠单抗等靶向IL-17A的药物在化脓性汗腺炎、毛发红糠疹、白塞综合征、人乳... 白细胞介素(IL)-17在多种疾病的发病机制中起着重要作用。近年来,靶向IL-17家族成员IL-17A的单克隆抗体已经应用于多种皮肤病的治疗。该文对司库奇尤单抗、依奇珠单抗等靶向IL-17A的药物在化脓性汗腺炎、毛发红糠疹、白塞综合征、人乳头瘤病毒感染、SAPHO综合征、扁平苔藓、坏疽性脓皮病和酒渣鼻等非银屑病性皮肤病中的治疗情况作一综述。 展开更多
关键词 白细胞介素17A单克隆抗体 皮肤疾病 治疗 司库奇尤单抗 依奇珠单抗
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抗人白细胞介素-18鼠单克隆抗体的制备
13
作者 刘树玲 杜勇 +2 位作者 陈万荣 徐静 王海涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期308-308,共1页
关键词 白细胞介素18 单克隆抗体 制备
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抗重组人白细胞介素12单克隆抗体的制备及其生物学特性
14
作者 李俐 马颖哲 张桂荣 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期621-625,共5页
目的:以纯化的重组人白细胞介素12(rhIL-12)蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体(McAb),并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法:以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,... 目的:以纯化的重组人白细胞介素12(rhIL-12)蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体(McAb),并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法:以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,用间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及多次克隆化,培养制备杂交瘤细胞系,用clutathione sepharose 4B进行纯化。采用间接ELISA及Western blotting等方法对McAb的Ig亚类(型)腹水效价及特异性进行鉴定。结果:建立了3株持续分泌rhIL-12p70McAb的杂交瘤细胞株,3株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞,所分泌的抗体为2株IgG1亚类及1株IgG2a亚类,轻链属k型,小鼠腹水效价测定分别为1∶5.9×106、1∶2.9×107、1∶3.6×107,亲和力依次为EM5>EM6>EV9。结论:成功地制备了3株能稳定分泌抗rhIL-12p70的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高。 展开更多
关键词 白细胞介素12 单克隆抗体 杂交瘤
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重组人白细胞介素10单克隆抗体对角朊细胞增殖及产生细胞因子的影响
15
作者 陈飞虎 李俊 陈敏珠 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第2期105-107,共3页
目的　研究重组人白细胞介素10单克隆抗体对无血清培养的角朊细胞增殖、产生细胞因子的影响。方法　用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定对细胞增殖的影响;用小鼠胸腺细胞增殖法检测IL- 1;ELISA法检测IL -6、IL- 8。结果　抗重组人白细胞介... 目的　研究重组人白细胞介素10单克隆抗体对无血清培养的角朊细胞增殖、产生细胞因子的影响。方法　用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定对细胞增殖的影响;用小鼠胸腺细胞增殖法检测IL- 1;ELISA法检测IL -6、IL- 8。结果　抗重组人白细胞介素10单克隆抗体促进角朊细胞增殖与IL -1、IL- 6及IL -8的分泌,并呈剂量依赖关系。结论　重组人白细胞介素10单克隆抗体促进角朊细胞增殖与细胞因子分泌。 展开更多
关键词 白细胞介素10 抗体 单克隆 角蛋白细胞 细胞因子类
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单克隆抗体ELISA双抗体夹心法测定人白细胞介素2 被引量：2
16
作者 赵满仓 周景林 +2 位作者 刘菊林 黎健 李健斋 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1992年第2期62-65,共4页
本文叙述了测定人白细胞介素2(IL-2)含量的ELISA双抗体夹心法。用辣根过氧化物酶标记IL-2单克隆抗体。聚苯乙烯反应板预先用0.1％戊二醛处理,然后以单克隆抗体包被。本法批内变异系数CV=3.99％,批间变异系数CV=5.96％,标准曲线的测定范... 本文叙述了测定人白细胞介素2(IL-2)含量的ELISA双抗体夹心法。用辣根过氧化物酶标记IL-2单克隆抗体。聚苯乙烯反应板预先用0.1％戊二醛处理,然后以单克隆抗体包被。本法批内变异系数CV=3.99％,批间变异系数CV=5.96％,标准曲线的测定范围为3.1～100u/ml,检测下限为1.55u/ml。应用本法已测定了2S例正常人和11例恶性肿瘤患者的IL-2含量。 展开更多
关键词 白细胞介素 ELISA 单克隆抗体
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人源化白细胞介素-6受体抗体治疗全身型幼年特发性关节炎的疗效及安全性 被引量：4
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作者 邹丽霞 卢美萍 +3 位作者 郭莉 滕丽萍 徐益萍 郑琪 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期421-426,共6页
目的:探讨人源化IL-6受体抗体(托珠单抗注射液)治疗全身型幼年特发性关节炎(sJIA)的临床疗效及安全性。方法:回顾性分析2015年12月—2016年11月在浙江大学医学院附属儿童医院应用托珠单抗治疗的13例sJIA患儿的临床资料,包括血常规、C反... 目的:探讨人源化IL-6受体抗体(托珠单抗注射液)治疗全身型幼年特发性关节炎(sJIA)的临床疗效及安全性。方法:回顾性分析2015年12月—2016年11月在浙江大学医学院附属儿童医院应用托珠单抗治疗的13例sJIA患儿的临床资料,包括血常规、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、IL-6、血清铁蛋白、美国风湿病学儿科(ACR Pedi)30/50/70/90评分、激素使用情况以及治疗期间的不良反应。结果:与治疗前比较,治疗后第3天患儿的CRP和ESR明显下降(均P<0.05);治疗后第2周血红蛋白增加和血小板减少(均P<0.05);第4周血清铁蛋白水平下降(P<0.05);白细胞在治疗后第8周时减少(P<0.05)。IL-6水平在治疗后先上升,第4周时下降,但与治疗前比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗第4周ACR Pedi 30或以上达100%;第20周时,61.5%的患儿达到ACR Pedi 90和停用糖皮质激素。随访至20周,所有患儿共发生不良反应22例次,其中感染发生率占54.5%(12/22),无严重不良反应发生。结论:托珠单抗能快速控制sJIA炎症,改善疾病活动度,有助于糖皮质激素的顺利减量及停药,且安全有效。 展开更多
关键词 关节炎 幼年型类风湿/药物疗法 糖皮质激素类/治疗应用 白细胞 介素6 抗体 单克J坠/治疗应用 治疗结果 安全性
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抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及其鉴定 被引量：2
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作者 戴华 陈俊华 +3 位作者 张海霞 沈颖 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期986-990,共5页
目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 ... 目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 mAb细胞株;采用间接ELISA、间接免疫荧光法(IFA)以及Western blot法分析mAb的特异性。结果获得4株抗ChIL-4的mAb,分别命名为6A8、18F12、19F1、20G3,腹水mAb的ELISA效价为(1.6~6.4)×104;ELISA、IFA及Western blot结果显示该4株mAb均是特异针对重组ChIL-4的mAb,不具有识别重组牛IL-4、鸡γ干扰素(IFN-γ)等其他蛋白的能力。结论成功制备了抗ChIL-4的mAb。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素4(ChIL-4) 单克隆抗体
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抗人白细胞单克隆抗体的特异性及其特性鉴定 被引量：1
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作者 杨斌 何杨 +3 位作者 赵益明 沈文红 李佩霞 阮长耿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期158-160,共3页
目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色Ｓ... 目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色ＳＰ法鉴定其组织特异性。　结果成功地制备１株抗人白细胞　ｍＡｂ，命名为ＳＺ－１０５。ＥＬＩＳＡ法测定其腹水效价为１×１０－５。琼脂糖双扩散鉴定为ＩｇＧ１类。流式细胞仪间接免疫荧光技术及免疫组化ＳＰ法测定表明，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５可选择性地与外周血液的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞呈强阳性反应，而与红细胞及血小板不出现反应。该ｍＡｂ还可与正常人骨髓的白细胞前体起反应。另外，在肝、肺、脾、胸腺及淋巴结正常组织中的巨噬细胞表面，也有ＳＺ－１０５抗原表达。ＳＺ－１０５抗原经亲和层析纯化，再经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ　和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ证实，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５识别的抗原是相对分子质量（Ｍｒ）为７５　０００左右的单链蛋白多肽。结论　获得１株具有高度免疫学活性和组织特异性的抗人白细胞ｍＡｂ　ＳＺ－１０５，其对研究白细胞的分化、免疫功能，以及隐匿性急、慢性炎症疾病的放免显像诊断都具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 抗人白细胞单克隆抗体 特异性 特性鉴定 免疫组织化学
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携白细胞介素-8单克隆抗体的靶向对比剂对兔心肌梗死微循环的定量研究 被引量：1
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作者 张晓奇 张容亮 +1 位作者 孙月 陆永萍 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期565-569,共5页
目的采用携白细胞介素(IL)-8单克隆抗体(IL-8单抗)的靶向对比剂行心肌声学造影(MCE)定量评价兔心肌梗死的心肌微循环灌注。材料与方法选取健康成年日本大耳白兔30只,通过抽签的方式随机分为急性心肌梗死组和假手术组,每组15只。制备兔... 目的采用携白细胞介素(IL)-8单克隆抗体(IL-8单抗)的靶向对比剂行心肌声学造影(MCE)定量评价兔心肌梗死的心肌微循环灌注。材料与方法选取健康成年日本大耳白兔30只,通过抽签的方式随机分为急性心肌梗死组和假手术组,每组15只。制备兔心肌梗死模型,将模型分别于术前、术后30 min、2 h及6 h行常规心脏超声检查、Sono Vue对比剂及携IL-8单抗靶向对比剂MCE检查。应用QLAB 8.0软件,定量分析左心室短轴乳头肌水平各节段心肌充盈影像。结果 Sono Vue对比剂及携IL-8单抗的靶向对比剂MCE检查发现,术后心肌梗死组造模节段前壁、前间隔的2种对比剂视频强度超声均值均低于非梗死节段、术前及假手术组(P均<0.05);携IL-8单抗靶向对比剂MCE前壁、前间隔的对比剂超声均值均高于Sono Vue对比剂对应节段,达峰时间、开始显影时间均早于Sono Vue对比剂对应节段(P均<0.05)。结论靶向对比剂携带的IL-8单抗对缺血心肌释放的炎性因子IL-8存在靶向作用。缺血性心脏病可通过携IL-8单抗靶向对比剂MCE检查进行更早、更精确的诊断。 展开更多
关键词 心肌梗死 急性病 超声心动描记术 造影剂 白细胞介素-8 抗体 单克隆 心肌 血液灌注 疾病模型 动物 兔
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