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CEA微型抗体载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达
被引量:
1
1
作者
杨卫东
李彪
+2 位作者
朱承谟
廖文韬
吴祥甫
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2000年第3期199-202,共4页
目的制备适合放免显像的抗癌胚抗原微型抗体。 方法在已获得的抗癌胚抗原重链可变区 (VH)及轻链可变区 (VL)基因的基础上将重链可变区 (VH)与轻链可变区 (VL)基因直接连接制成微型抗体基因 ,并在大肠杆菌进行表达。 结果大肠杆菌高效...
目的制备适合放免显像的抗癌胚抗原微型抗体。 方法在已获得的抗癌胚抗原重链可变区 (VH)及轻链可变区 (VL)基因的基础上将重链可变区 (VH)与轻链可变区 (VL)基因直接连接制成微型抗体基因 ,并在大肠杆菌进行表达。 结果大肠杆菌高效表达了微型抗体C端 6×His的融合蛋白 ,表达量达菌体总蛋白的 15 % ,SDS -PAGE和Western印迹显示表达物分子量为 2 6kd与基因编码蛋白的理论推算值相符 ,RIA表明表达物与CEA特异性结合。
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关键词
放射损度显像
抗癌
胚
抗原
微型
抗体
制备
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职称材料
CEA串连表位-HSP70融合基因疫苗诱导小鼠的表位特异性免疫应答
2
作者
安力彬
刘力华
+6 位作者
方艳秋
李丹
段秀梅
许淑芬
李树蕾
谭岩
宋燕
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期241-245,共5页
目的:观察癌胚抗原(CEA)串联表位-HSP70融合基因疫苗诱导的免疫应答,为开发新型肿瘤特异性基因疫苗奠定基础。方法:在已经构建含有变异热休克蛋白(HSP)序列的基础上,插入重组CEA串联表位的编码片段获得CEA串联表位-HSP融合基因疫苗。3...
目的:观察癌胚抗原(CEA)串联表位-HSP70融合基因疫苗诱导的免疫应答,为开发新型肿瘤特异性基因疫苗奠定基础。方法:在已经构建含有变异热休克蛋白(HSP)序列的基础上,插入重组CEA串联表位的编码片段获得CEA串联表位-HSP融合基因疫苗。3次肌肉注射免疫Balb/c小鼠,设立注射生理盐水的阴性对照组、注射氢氧化铝佐剂混悬CEA串联表位的阳性对照组及注射pCITriCEA625-667-mtHSP70的实验组。FCM分析脾脏T细胞亚群;体外培养脾细胞,ELISA检测培养上清中干扰素γ(IFNγ)的相对含量;同时测定小鼠血清CEA特异性抗体的滴度。结果:阴性对照组脾细胞中CD3+和CD4+T细胞分别为55.1%±6.1%和30.2%±4.1%;实验组脾细胞中CD3+和CD4+T细胞分别为78.7%±9.2%和48.9%±4.7%,两组比较差异有显著性(P<0.01)。其体外特异性抗原肽诱导的IFNγ分泌处于本底水平,可视为生理性参数,体外非特异性和特异性的IFNγ分泌分别增加3和6倍(P<0.01)。血清中CEA表位特异性抗体滴度阴性对照组为0,阳性对照组<1:500,而融合基因疫苗免疫组达到1:4000。结论:CEA串联表位-HSP融合基因疫苗在体内诱导以激发辅助性T细胞为特征的免疫应答。
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关键词
癌
胚
抗原
热休克蛋白70
T细胞
抗癌胚抗原抗体
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职称材料
题名
CEA微型抗体载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达
被引量:
1
1
作者
杨卫东
李彪
朱承谟
廖文韬
吴祥甫
机构
上海第二医科大学瑞金医院核医学科
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2000年第3期199-202,共4页
基金
国家自然科学基金 !(39770 2 31 )
上海市启明星计划! (98Q1 4 0 1 1 )
文摘
目的制备适合放免显像的抗癌胚抗原微型抗体。 方法在已获得的抗癌胚抗原重链可变区 (VH)及轻链可变区 (VL)基因的基础上将重链可变区 (VH)与轻链可变区 (VL)基因直接连接制成微型抗体基因 ,并在大肠杆菌进行表达。 结果大肠杆菌高效表达了微型抗体C端 6×His的融合蛋白 ,表达量达菌体总蛋白的 15 % ,SDS -PAGE和Western印迹显示表达物分子量为 2 6kd与基因编码蛋白的理论推算值相符 ,RIA表明表达物与CEA特异性结合。
关键词
放射损度显像
抗癌
胚
抗原
微型
抗体
制备
Keywords
carcinoembryonic antigen miniantibody gene expression E.coli
分类号
R730.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
CEA串连表位-HSP70融合基因疫苗诱导小鼠的表位特异性免疫应答
2
作者
安力彬
刘力华
方艳秋
李丹
段秀梅
许淑芬
李树蕾
谭岩
宋燕
机构
吉林大学护理学院妇产科护理教研室
吉林大学第一医院中心实验室
吉林大学中日联谊医院普通外科
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期241-245,共5页
基金
吉林省科技厅重点项目资助课题(20020403,20040401-5,20050402-3)
文摘
目的:观察癌胚抗原(CEA)串联表位-HSP70融合基因疫苗诱导的免疫应答,为开发新型肿瘤特异性基因疫苗奠定基础。方法:在已经构建含有变异热休克蛋白(HSP)序列的基础上,插入重组CEA串联表位的编码片段获得CEA串联表位-HSP融合基因疫苗。3次肌肉注射免疫Balb/c小鼠,设立注射生理盐水的阴性对照组、注射氢氧化铝佐剂混悬CEA串联表位的阳性对照组及注射pCITriCEA625-667-mtHSP70的实验组。FCM分析脾脏T细胞亚群;体外培养脾细胞,ELISA检测培养上清中干扰素γ(IFNγ)的相对含量;同时测定小鼠血清CEA特异性抗体的滴度。结果:阴性对照组脾细胞中CD3+和CD4+T细胞分别为55.1%±6.1%和30.2%±4.1%;实验组脾细胞中CD3+和CD4+T细胞分别为78.7%±9.2%和48.9%±4.7%,两组比较差异有显著性(P<0.01)。其体外特异性抗原肽诱导的IFNγ分泌处于本底水平,可视为生理性参数,体外非特异性和特异性的IFNγ分泌分别增加3和6倍(P<0.01)。血清中CEA表位特异性抗体滴度阴性对照组为0,阳性对照组<1:500,而融合基因疫苗免疫组达到1:4000。结论:CEA串联表位-HSP融合基因疫苗在体内诱导以激发辅助性T细胞为特征的免疫应答。
关键词
癌
胚
抗原
热休克蛋白70
T细胞
抗癌胚抗原抗体
Keywords
carcinoembryo antigen
heat shock protein-70
T cells
anti-CEA antibody
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CEA微型抗体载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达
杨卫东
李彪
朱承谟
廖文韬
吴祥甫
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2000
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
CEA串连表位-HSP70融合基因疫苗诱导小鼠的表位特异性免疫应答
安力彬
刘力华
方艳秋
李丹
段秀梅
许淑芬
李树蕾
谭岩
宋燕
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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