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虹鳟Ⅰ型干扰素IFNa原核表达与抗病毒活性分析
1
作者
杨倩
魏文燕
+5 位作者
汪开毓
刘韬
何晟毓
谢恒
李良玉
刘家星
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期84-87,共4页
为了解重组虹鳟Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)IFNa的抗病毒效果,本研究根据NCBI中登录的虹鳟IFNa基因序列(AM489418)设计引物,PCR扩增IFNa基因,并构建重组质粒pET32a(+)-IFNa,在大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,获得的重组IFNa(...
为了解重组虹鳟Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)IFNa的抗病毒效果,本研究根据NCBI中登录的虹鳟IFNa基因序列(AM489418)设计引物,PCR扩增IFNa基因,并构建重组质粒pET32a(+)-IFNa,在大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,获得的重组IFNa(rIFNa)蛋白以可溶性和包涵体两种形式表达,大小约为35 ku;重组蛋白纯化后经western blot检测,结果显示rIFNa蛋白大小符合预期;通过细胞病变抑制法检测了rIFNa蛋白的抗病毒活性,结果显示rIFNa蛋白的生物活性与其浓度呈正相关关系,抗病毒效价约为1×10~4U/mg。以上结果表明,原核表达的虹鳟rIFNa蛋白具备较好的抗病毒活性。本研究为后续研究rIFNa蛋白作为免疫增强剂抵抗病毒感染奠定了基础。
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关键词
虹鳟
IFNa基因
原核表达
抗病毒活性检测
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职称材料
犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性的测定
被引量:
2
2
作者
李皓洋
胡小元
+3 位作者
易咏竹
杨鑫
张志芳
李轶女
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期216-220,共5页
犬α干扰素(Ca IFNα)在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的Ca IFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对Gen Bank中的一个Ca IFNα基因进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体p VL1393中,并与亲本病毒Bm Bacmid共转...
犬α干扰素(Ca IFNα)在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的Ca IFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对Gen Bank中的一个Ca IFNα基因进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体p VL1393中,并与亲本病毒Bm Bacmid共转染家蚕细胞进行细胞内重组。得到的重组病毒用于感染家蚕幼虫,收集发病幼虫的蚕血淋巴用于Ca IFNα检测。采用细胞病变抑制法在MDCK-VSV*GFP系统中测定其抗病毒活性。结果显示家蚕表达的Ca IFNα能有效抑制VSV*GFP在细胞内的复制,其抗病毒活性不低于1.78×106U/m L。
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关键词
犬α干扰素
家蚕杆状
病毒
表达系统
抗病毒活性检测
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职称材料
题名
虹鳟Ⅰ型干扰素IFNa原核表达与抗病毒活性分析
1
作者
杨倩
魏文燕
汪开毓
刘韬
何晟毓
谢恒
李良玉
刘家星
机构
四川农业大学鱼病研究中心
四川农业大学动物疾病与人类健康四川省重点实验室
四川成都市农林科学院水产研究所
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期84-87,共4页
基金
四川省科技厅应用基础项目(2014JY0143)
成都市农林科学院2017年“集成应用示范和科研创新”项目—现代免疫学技术在鲑鳟和鲈重要疫病防治中的研究与应用。
文摘
为了解重组虹鳟Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)IFNa的抗病毒效果,本研究根据NCBI中登录的虹鳟IFNa基因序列(AM489418)设计引物,PCR扩增IFNa基因,并构建重组质粒pET32a(+)-IFNa,在大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,获得的重组IFNa(rIFNa)蛋白以可溶性和包涵体两种形式表达,大小约为35 ku;重组蛋白纯化后经western blot检测,结果显示rIFNa蛋白大小符合预期;通过细胞病变抑制法检测了rIFNa蛋白的抗病毒活性,结果显示rIFNa蛋白的生物活性与其浓度呈正相关关系,抗病毒效价约为1×10~4U/mg。以上结果表明,原核表达的虹鳟rIFNa蛋白具备较好的抗病毒活性。本研究为后续研究rIFNa蛋白作为免疫增强剂抵抗病毒感染奠定了基础。
关键词
虹鳟
IFNa基因
原核表达
抗病毒活性检测
Keywords
Rainbow trout
IFNa gene
prokaryotic expression
antiviral activity analysis
分类号
S942.5 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性的测定
被引量:
2
2
作者
李皓洋
胡小元
易咏竹
杨鑫
张志芳
李轶女
机构
中国农业科学院生物技术研究所
中国农业科学院蚕业研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期216-220,共5页
基金
国家高技术研究发展计划"863"计划(2011AA100603)
国家重点基础研究发展计划"973"计划(2012CB114600)
文摘
犬α干扰素(Ca IFNα)在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的Ca IFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对Gen Bank中的一个Ca IFNα基因进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体p VL1393中,并与亲本病毒Bm Bacmid共转染家蚕细胞进行细胞内重组。得到的重组病毒用于感染家蚕幼虫,收集发病幼虫的蚕血淋巴用于Ca IFNα检测。采用细胞病变抑制法在MDCK-VSV*GFP系统中测定其抗病毒活性。结果显示家蚕表达的Ca IFNα能有效抑制VSV*GFP在细胞内的复制,其抗病毒活性不低于1.78×106U/m L。
关键词
犬α干扰素
家蚕杆状
病毒
表达系统
抗病毒活性检测
Keywords
canine interferon alpha
silkworm-baculovirus expression system
antiviral activity assay
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
虹鳟Ⅰ型干扰素IFNa原核表达与抗病毒活性分析
杨倩
魏文燕
汪开毓
刘韬
何晟毓
谢恒
李良玉
刘家星
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性的测定
李皓洋
胡小元
易咏竹
杨鑫
张志芳
李轶女
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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职称材料
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