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具有细胞穿透功能的串联亲和层析分离载体的构建与功能鉴定: 1; 作者邓鹏刘芸 +3 位作者李涛吴向玲刘亚伟姜勇《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期547-550,共4页; 目的建立基于抗生蛋白链菌素结合肽(SBP)-钙调蛋白结合肽(CBP)分离标签以及细胞穿透肽转录反式激活因子(TAT)和绿色荧光蛋白(GFP)原核表达系统的、具有细胞穿透功能的原核串联亲和层析分离系统。方法应用PCR方法,以pEG-FP-C2载体为模板... 展开更多; 关键词基因产物 tat 色谱法亲和抗生蛋白链菌素钙调蛋白结合蛋白质类; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种新的免疫细胞化学染色方法──SIT法: 2; 作者王家鑫杜顺丰《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期90-91,共2页; 一种新的免疫细胞化学染色方法──ＳＩＴ法王家鑫（张家口农业高等专科学校组织学胚胎学教研室，张家口０７５１３１）杜顺丰（北京农业大学动物医学院组织学胚胎学教研室，北京１０００９４）关键词抗生蛋白链菌素；恒冷箱切片；免疫... 展开更多; 关键词抗生蛋白链菌素免疫细胞化学染色 SIT; 在线阅读下载PDF 职称材料

DNA分析与扩增: 3; 《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第10期25-27,共3页; 933234补给型 PCR:一种扩增已知 DNA 片段旁侧序列的有效方法[英]/Rudenko,G.N.…//Plant Mol.Biol.-1993,21(4).-723～728[译自 DBA,1993,12(8),93-04246]此法包括一个特定的富集步骤。; 关键词 DNA 旁侧序列聚合酶定序点突变异源双链基因表达载体劳斯肉瘤病毒抗生蛋白链菌素单模标本; 在线阅读下载PDF 职称材料

生物技术简讯: 4; 作者孙雷心《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第12期21-22,共2页; 蛋白分子量标记Amersham Life Science 建立了一组特别针对与 Amersham 的非放射性 ECL Western 点印系统一同使用而设计的蛋白质分子量标记。该标记为6种不同蛋白的混合物、为 SDS-PAGE 后在 Western 点印中提供了生物素化标签。与抗... 展开更多; 关键词抗生蛋白链菌素分子量标记生物素化过氧化物酶温育基因疗法定量检查生物技术聚合酶郁中; 在线阅读下载PDF 职称材料

医药其它: 5; 《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第4期52-58,共7页; 关键词融合蛋白逆转录病毒载体生物学活性基因克隆基因转移编码序列抗生蛋白链菌素重组蛋白基因文库外源基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名具有细胞穿透功能的串联亲和层析分离载体的构建与功能鉴定: 1; 作者邓鹏刘芸李涛吴向玲刘亚伟姜勇; 机构南方医科大学基础医学院病理生理学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期547-550,共4页; 基金国家自然科学基金面上项目(30572151) 教育部长江学者和创新团队发展计划(IRT0731) +1 种基金广州市科技计划(2007J1-C0301); 文摘目的建立基于抗生蛋白链菌素结合肽(SBP)-钙调蛋白结合肽(CBP)分离标签以及细胞穿透肽转录反式激活因子(TAT)和绿色荧光蛋白(GFP)原核表达系统的、具有细胞穿透功能的原核串联亲和层析分离系统。方法应用PCR方法,以pEG-FP-C2载体为模板扩增EGFP序列,以pNTAP载体为模板扩增CBP-SBP序列,采用退火方法得到TAT片段,采用常规酶切、连接方法将EGFP、CBP-SBP和TAT片段依次克隆入pET14b-MCStop载体中,酶切、PCR和测序鉴定无误后,得到pET14b-CBP-SBP-EGFP-TAT重组质粒。将重组质粒转化BL21(DE3)大肠埃希菌,以IPTG诱导融合蛋白表达,利用Ni2+-NTA亲和层析纯化获得融合蛋白,将不同浓度的融合蛋白加入培养的人肝癌细胞株(HepG2)检测融合蛋白的穿细胞膜功能。结果所构建的pET14b-MCS-CBP-SBP-EGFP-TAT融合蛋白表达载体正确,该载体可在大肠埃希菌内高效表达,用Ni2+-NTA纯化获得了相对分子量约40kD的目的融合蛋白。细胞功能实验结果表明融合蛋白能够穿越细胞膜,且具有浓度依赖性。结论成功构建了pET14b-MCS-CBP-SBP-EGFP-TAT融合蛋白表达载体,并获得了具有良好穿透真核细胞膜功能的融合蛋白,为进一步研究细胞内蛋白相互作用、细胞穿透肽TAT的功能及其穿透细胞的机制奠定了基础。; 关键词基因产物 tat 色谱法亲和抗生蛋白链菌素钙调蛋白结合蛋白质类; Keywords gene products tat chromato graphy affinity streptavidin calmodulin-binding proteins; 分类号 R373.2 [医药卫生—病原生物学] R392.32 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种新的免疫细胞化学染色方法──SIT法: 2; 作者王家鑫杜顺丰; 机构张家口农业高等专科学校组织学胚胎学教研室; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期90-91,共2页; 基金国家教委资助优秀青年教师基金; 文摘一种新的免疫细胞化学染色方法──ＳＩＴ法王家鑫（张家口农业高等专科学校组织学胚胎学教研室，张家口０７５１３１）杜顺丰（北京农业大学动物医学院组织学胚胎学教研室，北京１０００９４）关键词抗生蛋白链菌素；恒冷箱切片；免疫细胞化学ＡＮｅｗＴｅｃｈｎｉｑｕｅ...; 关键词抗生蛋白链菌素免疫细胞化学染色 SIT; Keywords Streptavidin Cryostat sectioning Immunocytochemistry; 分类号 S852.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DNA分析与扩增: 3; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第10期25-27,共3页; 文摘 933234补给型 PCR:一种扩增已知 DNA 片段旁侧序列的有效方法[英]/Rudenko,G.N.…//Plant Mol.Biol.-1993,21(4).-723～728[译自 DBA,1993,12(8),93-04246]此法包括一个特定的富集步骤。; 关键词 DNA 旁侧序列聚合酶定序点突变异源双链基因表达载体劳斯肉瘤病毒抗生蛋白链菌素单模标本; 分类号 Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名生物技术简讯: 4; 作者孙雷心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第12期21-22,共2页; 文摘蛋白分子量标记Amersham Life Science 建立了一组特别针对与 Amersham 的非放射性 ECL Western 点印系统一同使用而设计的蛋白质分子量标记。该标记为6种不同蛋白的混合物、为 SDS-PAGE 后在 Western 点印中提供了生物素化标签。与抗生蛋白链菌素辣根过氧化物酶温育后用 ECL 光检测,将在胶片上产型一组条带阶梯。定量检查证明此6种标准蛋白的分子量不因生物素化而明显改变。详情请与 Amersham Inter-; 关键词抗生蛋白链菌素分子量标记生物素化过氧化物酶温育基因疗法定量检查生物技术聚合酶郁中; 分类号 Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名医药其它: 5; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第4期52-58,共7页; 关键词融合蛋白逆转录病毒载体生物学活性基因克隆基因转移编码序列抗生蛋白链菌素重组蛋白基因文库外源基因; 分类号 Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	操作
1	具有细胞穿透功能的串联亲和层析分离载体的构建与功能鉴定	邓鹏刘芸李涛吴向玲刘亚伟姜勇	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	在线阅读下载PDF 职称材料
2	一种新的免疫细胞化学染色方法──SIT法	王家鑫杜顺丰	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1996	在线阅读下载PDF 职称材料
3	DNA分析与扩增		《生物技术通报》 CAS CSCD	1993	在线阅读下载PDF 职称材料
4	生物技术简讯	孙雷心	《生物技术通报》 CAS CSCD	1993	在线阅读下载PDF 职称材料
5	医药其它		《生物技术通报》 CAS CSCD	1992	在线阅读下载PDF 职称材料