抗生素筛选方法 被引量：3

1

作者 马寅姣 宋沁馨 顾觉奋 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期654-658,共5页

细菌耐药性发生率的升高,激励着人们去寻找更多的筛选抗生素的策略,进而发现了更多的抗生素作用机制。靶向策略、高通量筛选等方法已经被用于检测有潜力的抗生素。细菌的DNA复制、细胞分裂和蛋白合成的中间步骤已经成为了筛选的新靶点,... 细菌耐药性发生率的升高,激励着人们去寻找更多的筛选抗生素的策略,进而发现了更多的抗生素作用机制。靶向策略、高通量筛选等方法已经被用于检测有潜力的抗生素。细菌的DNA复制、细胞分裂和蛋白合成的中间步骤已经成为了筛选的新靶点,双组分信号传递系统也成为了较为重要的药物新筛选靶点。微生物基因组学的发展,给新抗生素的发现带来了更大的希望,使人们可以发现更多的新作用靶点。 展开更多

关键词 抗生素 抗生素筛选 基因组 靶向抗生素筛选

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杀线虫抗生素的筛选体系及应用

2

作者 陈井生 孙连成 +4 位作者 刘德福 齐国超 韩冰 于吉东 马兰 《上海蔬菜》 2013年第5期68-69,共2页

蔬菜根结线虫和大豆胞囊线虫等植物寄生线虫已经成为影响农业生产的重要病原物，由此造成的损失逐年加重。目前只有极少数几种杀线剂可以使用，一些高效低毒低残留的化学农药的防治作用越来越小。因此，人们将研究重点转向植物线虫病害... 蔬菜根结线虫和大豆胞囊线虫等植物寄生线虫已经成为影响农业生产的重要病原物，由此造成的损失逐年加重。目前只有极少数几种杀线剂可以使用，一些高效低毒低残留的化学农药的防治作用越来越小。因此，人们将研究重点转向植物线虫病害的生物防治。生物防治是有效控制植物线虫病害的主要途径，是线虫病害可持续治理的重要措施。从微生物中寻找新的杀线虫抗生素是当今研究的热点和难点。本文介绍了杀线虫抗生素筛选的几种模型以及在微生物源杀线剂筛选上的应用，同时对今后的研究提出了展望。 展开更多

关键词 植物寄生线虫 抗生素筛选 筛选体系 应用 大豆胞囊线虫 蔬菜根结线虫 生物防治 线虫病害

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低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株

3

作者 戴剑漉 李艳青 +3 位作者 李欣 蒋忠科 赫卫清 孙承航 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期995-1003,共9页

目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora sp.TMD166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效... 目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora sp.TMD166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果,并结合卡那霉素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选,获得高产菌株。方法利用低能N+离子注入技术对出发菌株TMD166-MU1的孢子进行辐照诱变,以卡那霉素耐受性为选择压力,不同诱变条件处理的菌悬液涂布在含有卡那霉素培养基平板上培养后获得单菌落,并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法进行高产菌株初筛,之后对高产菌株进行摇瓶复筛,利用高效液相法检测突变株摇瓶发酵的化学效价。结果通过研究30和60 keV能量下不同注入剂量与小单孢菌正突变率的生物学效应关系,确定了在注入能量为30 keV、注入剂量4×10^(13)ions/cm^(2)、卡那霉素抗性筛选浓度为6 mg/L条件下,可获得最高达36.33%的正突变率。复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有4株,其中突变株IK-3的166A产量是菌株TMD166-MU1的1.8倍。结论采用低能N+离子注入诱变方式,再结合抗生素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选的集成方法能简单、高效地获得166A高产突变菌株。 展开更多

关键词 新硫肽类抗生素166A 低能离子注入 诱变 抗生素抗性筛选 高通量筛选 高产菌株

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奶牛场的环境测定及其敏感抗生素的筛选

4

作者 赵达卓 孙福亮 《现代畜牧科技》 2015年第12期144-145,共2页

目前多数养殖场环境的处理不够恰当，各种药物的滥用已经使许多茵类、病毒产生了耐药性，引起各种传染病的发生和治疗难以控制，为防疫工作带来了一定的不便。通过对延边州某奶牛场进行了场内环境测定及其敏感抗生素的筛选，为养殖户提... 目前多数养殖场环境的处理不够恰当，各种药物的滥用已经使许多茵类、病毒产生了耐药性，引起各种传染病的发生和治疗难以控制，为防疫工作带来了一定的不便。通过对延边州某奶牛场进行了场内环境测定及其敏感抗生素的筛选，为养殖户提供一些科学、合理的养殖用药方案。 展开更多

关键词 奶牛场 环境测定 抗生素筛选

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菊花高效再生体系的建立及抗生素对叶片分化的影响 被引量：5

5

作者 梁芳 王默霏 +3 位作者 王洁琼 袁秀云 刘建松 崔波 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第6期40-43,共4页

以菊花的叶片为外植体,研究无菌体系的建立以及不同植物生长调节剂组合对菊花愈伤组织的诱导及分化的影响;同时研究了筛选抗生素G418和抑菌抗生素美罗培南对菊花叶片分化的影响。结果表明,以2%Na Cl O为主要灭菌剂,处理20 min,同时加入2... 以菊花的叶片为外植体,研究无菌体系的建立以及不同植物生长调节剂组合对菊花愈伤组织的诱导及分化的影响;同时研究了筛选抗生素G418和抑菌抗生素美罗培南对菊花叶片分化的影响。结果表明,以2%Na Cl O为主要灭菌剂,处理20 min,同时加入2滴Tween-20,灭菌效果最佳。最适的愈伤组织诱导及分化培养基为MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,平均每外植体上可诱导出5.3个芽。G418浓度为15 mg/L能完全抑制外植体的分化;低浓度的美罗培南对菊花叶片再生具有明显抑制作用,但是高浓度反而促进叶片的分化。 展开更多

关键词 菊花 叶片 再生体系 筛选抗生素G418 抑菌抗生素 美罗培南 愈伤组织 培养基配方

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对海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43的微波诱变结合新霉素抗性与抗肿瘤活性组合筛选 被引量：5

6

作者 张志军 崔承彬 李长伟 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期33-37,共5页

以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,... 以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,100μg/mL发酵样品对K562细胞的抑制率>20%。经对不同微波辐照时间和不同浓度新霉素组合筛选实验结果的比较分析,初步确定对HLF-43的微波辐照诱变最佳时间为120 s。 展开更多

关键词 海洋来源微生物 放线菌 抗生素抗性筛选 微波诱变 新霉素 抗肿瘤活性

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多花黑麦草特高和多年生黑麦草四季高频组培再生体系的优化与建立 被引量：8

7

作者 曾庆飞 韦鑫 +4 位作者 陈锡 陈光洁 马培杰 吴佳海 王小利 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1649-1660,共12页

对在贵州地区广泛种植的多花黑麦草特高(Lolium multiflorum‘Tetragold’)和多年生黑麦草四季(L.perenne‘Four seasons’)的成熟种子进行了愈伤组织诱导及植株再生的研究,建立了两个品种的胚性愈伤组织高频诱导与再生体系。结果表明,... 对在贵州地区广泛种植的多花黑麦草特高(Lolium multiflorum‘Tetragold’)和多年生黑麦草四季(L.perenne‘Four seasons’)的成熟种子进行了愈伤组织诱导及植株再生的研究,建立了两个品种的胚性愈伤组织高频诱导与再生体系。结果表明,剥去成熟种子的颖壳,切除1/3胚乳端,将特高接种于CC+7mg·L^(-1) 2,4-D+0.5mg·L^(-1) 6-BA、四季接种于CC+5mg·L^(-1) 2,4-D+0.5 mg·L^(-1) 6-BA的培养基中,在明显降低组培污染率的同时,能分别得到65.52%和63.55%的最高愈伤组织诱导率;将两个品种诱导出的愈伤组织转移在MS+0.5 mg·L^(-1) 2,4-D+0.5mg·L^(-1) 6-BA+1.25mg·L^(-1) CuSO4+1.0g·L^(-1) CH的继代培养基上,能促进质量较好的Ⅱ型胚性愈伤组织的形成;根据后续转化试验所选用的植物表达载体pCAMBIA 1300的抗性特点,30~40mg·L^(-1)的潮霉素是两个品种愈伤组织最佳的筛选剂和临界浓度;特高的胚性愈伤组织接种在MS+2.0 mg·L^(-1) 6-BA+0.5 mg·L^(-1) NAA+0.1mg·L^(-1) TDZ的培养基上,可以产生86.37%的最高分化率,四季的胚性愈伤组织接种在MS+6.0 mg·L^(-1) 6-BA+0.3mg·L^(-1) NAA+5.0mg·L^(-1) KT的培养基上,能得到85.40%的最高分化率;生根培养基1/2MS+0.5 mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1) IAA能让两个品种分化出的不定芽形成100%的生根率;以腐殖土∶蛭石∶砂壤土=1∶1∶1的混合材料作为营养土,能保证组培再生苗达到99%以上的成活率。优化建立的高频组培再生体系为下一步的遗传转化奠定了基础。 展开更多

关键词 多花黑麦草特高 多年生黑麦草四季 外植体处理 培养基成分 激素浓度组合 抗生素筛选剂 组培再生体系

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薄荷茎段不定芽离体诱导影响因素分析及植株再生体系的建立 被引量：3

8

作者 于盱 梁呈元 +2 位作者 刘艳 王海棠 李维林 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第12期56-59,共4页

以薄荷(Mentha haplocalyx Briq.)茎段为外植体,研究激素种类与浓度、外植体位置和品种等因素对不定芽诱导的影响,建立高再生率的薄荷离体培养植株再生体系,并确定2种抗生素的选择压。试验结果表明:激素种类和浓度、外植体位置和品种对... 以薄荷(Mentha haplocalyx Briq.)茎段为外植体,研究激素种类与浓度、外植体位置和品种等因素对不定芽诱导的影响,建立高再生率的薄荷离体培养植株再生体系,并确定2种抗生素的选择压。试验结果表明:激素种类和浓度、外植体位置和品种对薄荷离体不定芽诱导率存在显著影响;适合薄荷离体不定芽再生最佳培养基为MS培养基(添加3.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L IAA+25%椰乳),最佳外植体为薄荷品种73-8的第2至第4节间茎段;潮霉素对薄荷3个品种73-8、68-7和沪-39的选择压分别为4、3、2 mg/L,卡那霉素的选择压分别为50、40、40 mg/L。 展开更多

关键词 薄荷 茎段 不定芽 离体诱导 植株再生 抗生素筛选

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微生物中抗耐药菌活性天然产物的研究进展 被引量：8

9

作者 褚福鑫 白志强 朱红惠 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1466-1482,共17页

近年来,细菌耐药性已成为全球性问题。微生物作为抗生素的重要来源,在发掘抗耐药菌新型抗生素的研究中承担了重要角色,许多微生物来源天然化合物展现了显著的抗耐药菌活性。本文主要综述了近十年发现的微生物源抗耐药菌天然化合物,并概... 近年来,细菌耐药性已成为全球性问题。微生物作为抗生素的重要来源,在发掘抗耐药菌新型抗生素的研究中承担了重要角色,许多微生物来源天然化合物展现了显著的抗耐药菌活性。本文主要综述了近十年发现的微生物源抗耐药菌天然化合物,并概括了抗耐药菌活性天然产物的筛选方法,以期对抗耐药菌新型抗生素的发现做铺垫。 展开更多

关键词 天然活性产物 耐药性 药物开发 抗生素筛选

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慢病毒感染方法构建稳定干涉PDRG1的HeLa细胞系 被引量：3

10

作者 巩伟丽 徐广 +1 位作者 韩秋影 陈媛 《科学技术与工程》 北大核心 2013年第22期6385-6388,共4页

PDRG1(p53 and DNA-damage regulated 1)是实验室通过文库筛选发现的参与NF-kB信号通路调控的一个新基因。已知PDRG1在多种肿瘤中高表达,并参与p53信号通路;同时该基因受UV以及基因毒性等刺激调控。但其在NF-κB信号通路中作用尚未见报... PDRG1(p53 and DNA-damage regulated 1)是实验室通过文库筛选发现的参与NF-kB信号通路调控的一个新基因。已知PDRG1在多种肿瘤中高表达,并参与p53信号通路;同时该基因受UV以及基因毒性等刺激调控。但其在NF-κB信号通路中作用尚未见报道,为了深入研究PDRG1对NF-κB信号通路的调控机理,构建了稳定干涉PDRG1的HeLa细胞系。选择了基于慢病毒载体pLKO.1的感染体系,该慢病毒体系可以同时感染分裂期与非分裂期的细胞,将目的基因干涉序列稳定整合至靶细胞基因组中;再经过抗生素压力筛选后在短时间内获得稳定干涉目的基因表达的细胞株。设计合成PDRG1干涉序列并克隆至pLKO.1载体,转染病毒包装细胞293TN后收集慢病毒上清感染HeLa细胞系,进一步经过嘌呤霉素压力筛选成功获得稳定表达PDRG1干涉序列的细胞株。该稳定细胞株的建立为PDRG1的功能研究提供了必要的实验工具。 展开更多

关键词 PDRG1 慢病毒感染 抗生素筛选 稳定敲低细胞系

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我所科技档案分类方法的介绍

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作者 叶小燕 《北京档案》 北大核心 1994年第3期24-25,共2页

我所科技档案分类方法的介绍中国医学科学院医药生物技术研究所叶小燕科技档案的分类是按照不同种类的科技档案及其自然形成的规律，在保持科技文件材料有机联系，便于保管和利用的原则下，将科技档案分成一定的类别，从而得出科技档案... 我所科技档案分类方法的介绍中国医学科学院医药生物技术研究所叶小燕科技档案的分类是按照不同种类的科技档案及其自然形成的规律，在保持科技文件材料有机联系，便于保管和利用的原则下，将科技档案分成一定的类别，从而得出科技档案的分类，它是科技档案系统整理的第一... 展开更多

关键词 科技档案 分类方法 新抗生素筛选 科研成果 单克隆抗体 分类方案 科研管理 医药生物 交叉问题 抗生素类

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猪巴氏杆菌病的预防与治疗 被引量：1

12

作者 康乾辰 《养殖与饲料》 2021年第7期68-69,共2页

猪巴氏杆菌病是临床常见的细菌性传染病,呈世界流行趋势,该病病原对多种动物都具有易感性,猪应激可促使本病的发生。根据病程长短和临床表现,本病分为最急性型、急性型和慢性型3种。该病主要表现为呼吸道症状,预防本病需要做好环境卫生... 猪巴氏杆菌病是临床常见的细菌性传染病,呈世界流行趋势,该病病原对多种动物都具有易感性,猪应激可促使本病的发生。根据病程长短和临床表现,本病分为最急性型、急性型和慢性型3种。该病主要表现为呼吸道症状,预防本病需要做好环境卫生的管理,对健康猪群进行科学的疫苗免疫,对巴氏杆菌敏感的抗生素可用于本病的治疗。 展开更多

关键词 猪 巴氏杆菌病 预防 治疗 抗生素筛选 注射用药

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生物固氮

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第7期62-64,共3页

922582 光合同氮菌深红红螺菌人工DNA介导的遗传转化[英]/Fitzmaurice,W.P.…∥Arch.Microbiol.-1991,156（2）.-142～144[译自DBA,1992,10（25）,91-14770] 用CaCl₂、CaCl₂-PEG6000和... 922582 光合同氮菌深红红螺菌人工DNA介导的遗传转化[英]/Fitzmaurice,W.P.…∥Arch.Microbiol.-1991,156（2）.-142～144[译自DBA,1992,10（25）,91-14770] 用CaCl₂、CaCl₂-PEG6000和冻融法,以载体质粒pSa4转化深红红螺菌（Rhodospirillumrubrum）VR2（一种天然的链霉素抗性突变株）。DNA浓度低时,转化频率呈线性增加,较高浓度时则达到饱和。在用抗生素筛选前,用对数生长早期和静止生长早期的细胞,1～2分钟热激、37℃、200mM CaCl₂、表达5小时的转化最佳。 展开更多

关键词 深红红螺菌 遗传转化 载体质粒 突变株 链霉素抗性 转化频率 热激 豌豆根瘤菌 抗生素筛选 固氮活性

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基于联合策略提高FAD依赖的葡萄糖脱氢酶的酵母表达 被引量：2

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作者 董聪 高庆华 +2 位作者 王玥 罗同阳 王庆庆 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期316-324,共9页

为了提高了FAD依赖的葡萄糖脱氢酶在毕赤酵母中的表达量,本研究通过G418浓度梯度筛选,构建含有不同分子伴侣基因拷贝数共表达毕赤酵母重组菌株实现高效表达,优化摇瓶发酵条件。经G418浓度梯度筛选,得到1株高产重组菌,在此基础上分别构建... 为了提高了FAD依赖的葡萄糖脱氢酶在毕赤酵母中的表达量,本研究通过G418浓度梯度筛选,构建含有不同分子伴侣基因拷贝数共表达毕赤酵母重组菌株实现高效表达,优化摇瓶发酵条件。经G418浓度梯度筛选,得到1株高产重组菌,在此基础上分别构建了HAC1、Ero1、PDI三种分子伴侣1-4拷贝共表达重组菌株,RT-qPCR检测结果符合预期。试管水平酶活表明3拷贝PDI、3拷贝HAC1和2拷贝Ero1分别比1拷贝提高83%、77%和51%。总体比较而言,共表达3拷贝PDI的重组菌株酶活最高,比对照提高198%,优化摇瓶发酵条件表明培养基初始pH 7.0,摇瓶装液量50 mL,甲醇添加量1%,诱导温度28℃时,效果最佳。通过抗生素浓度筛选、增加分子伴侣的基因拷贝数策略可以提高FAD-GDH在毕赤酵母中的发酵产量。 展开更多

关键词 FAD依赖的葡萄糖脱氢酶 毕赤酵母 抗生素梯度筛选 分子伴侣多拷贝 发酵条件

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