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低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株
1
作者
戴剑漉
李艳青
+3 位作者
李欣
蒋忠科
赫卫清
孙承航
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期995-1003,共9页
目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora sp.TMD166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效...
目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora sp.TMD166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果,并结合卡那霉素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选,获得高产菌株。方法利用低能N+离子注入技术对出发菌株TMD166-MU1的孢子进行辐照诱变,以卡那霉素耐受性为选择压力,不同诱变条件处理的菌悬液涂布在含有卡那霉素培养基平板上培养后获得单菌落,并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法进行高产菌株初筛,之后对高产菌株进行摇瓶复筛,利用高效液相法检测突变株摇瓶发酵的化学效价。结果通过研究30和60 keV能量下不同注入剂量与小单孢菌正突变率的生物学效应关系,确定了在注入能量为30 keV、注入剂量4×10^(13)ions/cm^(2)、卡那霉素抗性筛选浓度为6 mg/L条件下,可获得最高达36.33%的正突变率。复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有4株,其中突变株IK-3的166A产量是菌株TMD166-MU1的1.8倍。结论采用低能N+离子注入诱变方式,再结合抗生素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选的集成方法能简单、高效地获得166A高产突变菌株。
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关键词
新硫肽类
抗生素
166A
低能离子注入
诱变
抗生素抗性筛选
高通量
筛选
高产菌株
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职称材料
对海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43的微波诱变结合新霉素抗性与抗肿瘤活性组合筛选
被引量：
5
2
作者
张志军
崔承彬
李长伟
《中国海洋大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期33-37,共5页
以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,...
以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,100μg/mL发酵样品对K562细胞的抑制率>20%。经对不同微波辐照时间和不同浓度新霉素组合筛选实验结果的比较分析,初步确定对HLF-43的微波辐照诱变最佳时间为120 s。
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关键词
海洋来源微生物
放线菌
抗生素抗性筛选
微波诱变
新霉素
抗
肿瘤活
性
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职称材料
题名
低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株
1
作者
戴剑漉
李艳青
李欣
蒋忠科
赫卫清
孙承航
机构
中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所“天然药物活性物质与功能”国家重点实验室
中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生健康委员会抗生素生物工程重点实验室
中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所微生物化学研究室和抗感染药物研究北京市重点实验室
广东医科大学南方海洋科学与工程广东省实验室
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期995-1003,共9页
基金
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(No.2021-1-I2M-028)。
文摘
目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora sp.TMD166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果,并结合卡那霉素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选,获得高产菌株。方法利用低能N+离子注入技术对出发菌株TMD166-MU1的孢子进行辐照诱变,以卡那霉素耐受性为选择压力,不同诱变条件处理的菌悬液涂布在含有卡那霉素培养基平板上培养后获得单菌落,并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法进行高产菌株初筛,之后对高产菌株进行摇瓶复筛,利用高效液相法检测突变株摇瓶发酵的化学效价。结果通过研究30和60 keV能量下不同注入剂量与小单孢菌正突变率的生物学效应关系,确定了在注入能量为30 keV、注入剂量4×10^(13)ions/cm^(2)、卡那霉素抗性筛选浓度为6 mg/L条件下,可获得最高达36.33%的正突变率。复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有4株,其中突变株IK-3的166A产量是菌株TMD166-MU1的1.8倍。结论采用低能N+离子注入诱变方式,再结合抗生素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选的集成方法能简单、高效地获得166A高产突变菌株。
关键词
新硫肽类
抗生素
166A
低能离子注入
诱变
抗生素抗性筛选
高通量
筛选
高产菌株
Keywords
New thiopeptide antibiotic 166A
Low-energy ion implantation
Mutagenesis
Antibiotic resistance selection
High throughput screening
High-yield strains
分类号
R978 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
对海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43的微波诱变结合新霉素抗性与抗肿瘤活性组合筛选
被引量：
5
2
作者
张志军
崔承彬
李长伟
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
出处
《中国海洋大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期33-37,共5页
基金
国家自然科学基金(30973631&30572279)
国家高技术研究发展计划项目(2007AA09Z411)
+3 种基金
国家"重大新药创制"科技重大专项项目(2009ZX09103-019
2009ZX09301-002)
中国大洋协会国际海底区域研究开发项目(DYXM-115-02-2-09)
军事医学科学院科研创新基金重大专项(2008)资助
文摘
以海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43为出发菌,通过微波诱变结合新霉素抗性筛选,得到新霉素抗性突变株共128株,其中微波诱变新霉素抗性株117株、自发突变抗性株11株。经活性筛选,8株微波诱变新霉素抗性突变株对K562细胞有一定抑制作用,100μg/mL发酵样品对K562细胞的抑制率>20%。经对不同微波辐照时间和不同浓度新霉素组合筛选实验结果的比较分析,初步确定对HLF-43的微波辐照诱变最佳时间为120 s。
关键词
海洋来源微生物
放线菌
抗生素抗性筛选
微波诱变
新霉素
抗
肿瘤活
性
Keywords
marine-derived microorganism
actinomycete
antibiotic-resistant mutant selection
microwave mutagenesis
neomycin
antitumor activity
分类号
R979.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株
戴剑漉
李艳青
李欣
蒋忠科
赫卫清
孙承航
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
对海洋来源放线菌无活性野生株HLF-43的微波诱变结合新霉素抗性与抗肿瘤活性组合筛选
张志军
崔承彬
李长伟
《中国海洋大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
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