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水稻胚性愈伤诱导及其遗传转化的几个技术参数研究 被引量:7
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作者 李毓 洪国琴 +5 位作者 庄伟建 王乃元 戴非 张国林 张燕云 仇秀丽 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期394-398,共5页
以日本晴成熟种子及幼嫩种子为材料诱导形成胚性愈伤组织,经农杆菌介导将水稻隐花色素基因的4个RNAi和2个反义RNA表达载体分别转化日本晴愈伤组织,再经抗性筛选和分化培养诱导形成植株,经分子检测筛选出阳性转基因苗。对胚性愈伤诱导率... 以日本晴成熟种子及幼嫩种子为材料诱导形成胚性愈伤组织,经农杆菌介导将水稻隐花色素基因的4个RNAi和2个反义RNA表达载体分别转化日本晴愈伤组织,再经抗性筛选和分化培养诱导形成植株,经分子检测筛选出阳性转基因苗。对胚性愈伤诱导率、抗性愈伤率、分化出苗率及转化率进行统计分析。结果表明,成熟种子、新鲜成熟种子及幼嫩种子愈伤诱导率均大于81%,平均为86.67%,其中以新鲜成熟种子愈伤诱导率最高,达96.89%;抗性愈伤率成熟胚为22.21%-40.71%,平均为28.49%,幼胚为36.79%-43.21%,平均为40%,幼胚的抗性愈伤率高于成熟胚;分化出苗率成熟胚为59.29%-80.43%,平均为71.59%,幼胚为63.16%-72.73%,平均67.95%,幼胚与成熟胚差异不明显;转化率(Gus检测阳性率)成熟胚为43.07%-81.08%,平均61.59%,幼胚为58.33%-76.67%,平均67.50%,幼胚转化率稍高于成熟胚。 展开更多
关键词 水稻 诱导 抗性愈伤率 分化出苗 转化
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农杆菌介导的高效玉米遗传转化体系的建立 被引量:23
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作者 魏开发 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1158-1170,共13页
为了建立玉米高频再生及高效遗传转化体系,对影响玉米胚性愈伤组织诱导的11个因素及影响胚性愈伤分化的9个因素用正交实验方法进行研究。结果显示,基因型对胚性愈伤诱导有极显著影响。6-BA、培养基、AgNO3、2,4-D、ABA对胚性愈伤诱导的... 为了建立玉米高频再生及高效遗传转化体系,对影响玉米胚性愈伤组织诱导的11个因素及影响胚性愈伤分化的9个因素用正交实验方法进行研究。结果显示,基因型对胚性愈伤诱导有极显著影响。6-BA、培养基、AgNO3、2,4-D、ABA对胚性愈伤诱导的影响达到显著水平。多重比较分析显示ABA2mg/L每间隔1代添加对胚性愈伤诱导率有显著影响。在影响分化的因素中,基因型和6-BA浓度表现出极强的主效应,NAA、培养基、KT、2,4-D对分化产生显著影响。Southern blotting分析表明,25mg/L潮霉素选择压下抗性愈伤率作为转化体系优化指标是可靠的。在影响转化效率的因素中,acetosyringone(AS)使用浓度因基因型不同而表现出敏感度差异,共培养温度24~25℃、农杆菌浓度和浸泡时间0.7OD×15min,以及pH值5.5~6.2是最高转化率的优选组合。在整合后的玉米遗传转化体系中,黄早4和综31自交系以抗性愈伤率为指标的GUS基因稳定转化率分别达到48.6%和46.2%。 展开更多
关键词 玉米 正交实验 诱导 抗性愈伤率 农杆菌介导 遗传转化
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