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大肠杆菌PGDH末端缺失突变体的构建及抗反馈抑制效应分析被引量：6: 1; 作者张绪梅郭长江 +3 位作者刘云杨继军韦京豫徐琪寿《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期806-810,共5页; 为了获得具有抗反馈抑制性质的大肠杆菌磷酸甘油酸脱氢酶（PGDH,d-3-phosphoglycerate dehydrogenase,EC 1.1.1.95）,通过对其碱基序列和蛋白质结构分析,用PCR突变法构建突变酶M1（缺失第410位氨基酸）、M2（缺失407～410位氨基酸）、M... 展开更多; 关键词大肠杆菌 PGDH 蛋白纯化缺失突变体抗反馈抑制; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌CM/PDT抗反馈抑制突变体的构建及其性质: 2; 作者刘云王世春 +3 位作者张学清刘志红高波徐琪寿《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期535-540,共6页; 为了获得具有高催化活性且抗反馈抑制的大肠杆菌分支酸变位酶预苯酸脱水酶 (chorismatemutase prephenatedehydrataseCM PDT) [EC5 .4 .99.5 EC4 .2 .1.5 1],通过相关菌种CM PDT氨基酸序列同源比较 ,寻找高度保守位点 .用定点突变及... 展开更多; 关键词大肠杆菌CM/PDT 抗反馈抑制突变体构建性质分支酸变位酶/预苯酸脱水酶苯丙氨酸代谢类似物; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株黄色短杆菌基因工程菌株的构建及其L-缬氨酸积累被引量：6: 3; 作者徐大庆谭延振 +1 位作者缪铭王小元《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第23期262-266,共5页; 从谷氨酸棒杆菌模式菌株C.glutamicumATCC13032中克隆出L-缬氨酸合成途径上的限速酶——乙酰羟酸合酶编码基因ilvBN。对ilvBN进行定点突变,获得其抗反馈抑制突变型ilvBNr。以大肠杆菌-黄色短杆菌穿梭表达载体pDXW-10为基础,构建重组质粒... 展开更多; 关键词乙酰羟酸合酶抗反馈抑制黄色短杆菌发酵 L-缬氨酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

乳糖发酵短杆菌lysC突变对L-赖氨酸积累的影响被引量：5: 4; 作者董迅衍徐大庆 +2 位作者李烨李江华王小元《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期592-596,共5页; 从一株乳糖发酵短杆菌L-异亮氨酸生产菌中克隆出天冬氨酸激酶AK-1的编码基因ly-sC1,经DNA测序并与来自谷氨酸棒杆菌ATCC13032的野生型lysC比对发现其中有2个核苷酸1186G和1187C缺失,造成翻译提前终止。AK-1还有下列2个有效突变位点:Ala ... 展开更多; 关键词乳糖发酵短杆菌天冬氨酸激酶抗反馈抑制发酵 L-赖氨酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌PGDH末端缺失突变体的构建及抗反馈抑制效应分析被引量：6: 1; 作者张绪梅郭长江刘云杨继军韦京豫徐琪寿; 机构军事医学科学院卫生学环境医学研究所北京放射医学研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期806-810,共5页; 基金国家自然科学基金( No.30300010) 天津市科技攻关项目(No.033182711)~~; 文摘为了获得具有抗反馈抑制性质的大肠杆菌磷酸甘油酸脱氢酶（PGDH,d-3-phosphoglycerate dehydrogenase,EC 1.1.1.95）,通过对其碱基序列和蛋白质结构分析,用PCR突变法构建突变酶M1（缺失第410位氨基酸）、M2（缺失407～410位氨基酸）、M3（缺失337～410位氨基酸）.M0（野生型）及各突变型基因与pET22b（＋）载体连接后,表达融合蛋白.在非变性条件下,由NTA-Ni镍离子螯合亲和层析柱纯化野生型和突变体的酶蛋白.酶活性测定结果表明,M1、M2蛋白酶均保持了原有的野生型磷酸甘油酸脱氢酶活性,且部分解除了终产物L-丝氨酸的反馈抑制作用;M3蛋白酶完全解除了终产物的反馈抑制作用,但酶本身的催化活性略有降低（为野生型的83%）.M0、M1、M2菌株PGDH与L-丝氨酸结合的Ki值分别约为7μmol/L、20μmol/L、50μmol/L,说明该酶C末端1～4个氨基酸残基对L-丝氨酸和调控区的结合有重要影响.; 关键词大肠杆菌 PGDH 蛋白纯化缺失突变体抗反馈抑制; Keywords E. coli PGDH protein purification deletion mutant feedback-inhibition resistance; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌CM/PDT抗反馈抑制突变体的构建及其性质: 2; 作者刘云王世春张学清刘志红高波徐琪寿; 机构军事医学科学院放射医学研究所军事医学科学院基础医学研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期535-540,共6页; 基金军事医学科学院创新基金资助项目 (No .990 2 5 0 2 )~~; 文摘为了获得具有高催化活性且抗反馈抑制的大肠杆菌分支酸变位酶预苯酸脱水酶 (chorismatemutase prephenatedehydrataseCM PDT) [EC5 .4 .99.5 EC4 .2 .1.5 1],通过相关菌种CM PDT氨基酸序列同源比较 ,寻找高度保守位点 .用定点突变及PCR法构建突变酶M1(缺失 30 4T、30 5G、Q30 6K)、M2 (缺失W 338)、M3(缺失 30 1～ 386位氨基酸 )、M32 9(E32 9A)和M374 (C374A) ,野生型及各突变型基因与pET2 8a(+ )载体连接后 ,表达融合蛋白 .在非变性条件下 ,由TALON金属螯合亲和层析柱纯化野生型和突变体的酶蛋白 .酶活性测定表明 ,突变体M3的PDT活性下降为野生型活性的 2 9% ,但保持了CM活性 .突变体M374保持了CM ,PDT两种酶的活性 ,突变体M1、M2、M32 9的CM ,PDT活性有一定程度的提高 .酶抗反馈抑制作用检测表明 ,突变体M3、M374解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 ,M1、M2、M32 9部分解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 .与含野生型pheA基因的E .coliBL2 1菌株相比 ,含突变基因的E .coliBL2 1菌株对 10mmol L的苯丙氨酸代谢类似物具有强的抗反馈抑制作用 ,其中M1,M2 ,M3对 2 0mmol; 关键词大肠杆菌CM/PDT 抗反馈抑制突变体构建性质分支酸变位酶/预苯酸脱水酶苯丙氨酸代谢类似物; Keywords chorismate mutase/preohenate dehydratase, feedback-inhibition resistance, mutant, phenylalanine analogue; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] Q939.121 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株黄色短杆菌基因工程菌株的构建及其L-缬氨酸积累被引量：6: 3; 作者徐大庆谭延振缪铭王小元; 机构江南大学食品科学与技术国家重点实验室河北农业大学生命科学学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第23期262-266,共5页; 基金国家"863"计划项目(2007AA02Z229 2007AA02Z230); 文摘从谷氨酸棒杆菌模式菌株C.glutamicumATCC13032中克隆出L-缬氨酸合成途径上的限速酶——乙酰羟酸合酶编码基因ilvBN。对ilvBN进行定点突变,获得其抗反馈抑制突变型ilvBNr。以大肠杆菌-黄色短杆菌穿梭表达载体pDXW-10为基础,构建重组质粒pDXW-10-ilvBNr,并转化野生型黄色短杆菌B.flavumATCC14067,获得工程菌株ATCC14067/pDXW-10-ilvBNr。3L罐发酵实验结果显示:在野生型菌株发酵液中检测不到L-缬氨酸积累,而工程菌株发酵液中L-缬氨酸积累达5.0g/L。; 关键词乙酰羟酸合酶抗反馈抑制黄色短杆菌发酵 L-缬氨酸; Keywords acetyl-carboxylic acid synthase anti-feedback inhibition Brevibacterium flavum fermentation L-valine; 分类号 Q851 [生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳糖发酵短杆菌lysC突变对L-赖氨酸积累的影响被引量：5: 4; 作者董迅衍徐大庆李烨李江华王小元; 机构食品科学与技术国家重点实验室江南大学生物工程学院; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期592-596,共5页; 基金国家863计划项目(2007AA02Z229和2007AA02Z230); 文摘从一株乳糖发酵短杆菌L-异亮氨酸生产菌中克隆出天冬氨酸激酶AK-1的编码基因ly-sC1,经DNA测序并与来自谷氨酸棒杆菌ATCC13032的野生型lysC比对发现其中有2个核苷酸1186G和1187C缺失,造成翻译提前终止。AK-1还有下列2个有效突变位点:Ala 279 Thr和Ser317 Ala。lysC1在大肠杆菌BL21中的诱导表达量约为lysC的1/4,其表观比酶活也较低,但对L-苏氨酸和L-赖氨酸协同反馈抑制不敏感。用大肠杆菌-黄色短杆菌穿梭表达载体pDXW-8将ly-sC1在野生型乳糖发酵短杆菌ATCC13869中诱导型表达,经摇瓶发酵积累L-赖氨酸7.4 g/L,在3 L发酵罐上达40 g/L。; 关键词乳糖发酵短杆菌天冬氨酸激酶抗反馈抑制发酵 L-赖氨酸; Keywords Brevibacterium lactofermentum, aspartate kinase, feedback inhibition,fermentation, L-lysine; 分类号 TQ922.3 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大肠杆菌PGDH末端缺失突变体的构建及抗反馈抑制效应分析	张绪梅郭长江刘云杨继军韦京豫徐琪寿	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大肠杆菌CM/PDT抗反馈抑制突变体的构建及其性质	刘云王世春张学清刘志红高波徐琪寿	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	一株黄色短杆菌基因工程菌株的构建及其L-缬氨酸积累	徐大庆谭延振缪铭王小元	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2010	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	乳糖发酵短杆菌lysC突变对L-赖氨酸积累的影响	董迅衍徐大庆李烨李江华王小元	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料