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题名禽白血病病毒衣壳蛋白表达载体的构建及应用
被引量：1
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作者
孙舒
胡海
程晓薇
秦爱建
钱琨
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机构
扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室
扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室
江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
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出处
《中国家禽》
北大核心
2017年第18期18-22,共5页
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基金
国家重点研发计划(2016YFD0500803
2017YFD0500700)
+3 种基金
国家自然科学基金(31772734)
江苏省优势学科项目
公益性行业(农业)科研专项(201203055)
扬州大学新世纪人才项目
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文摘
为利用分段表达载体鉴定禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白单克隆抗体识别区域,构建ALV衣壳蛋白p27全长及分段真核表达载体。将实验室保存的pGEX-6p-1-p27质粒双酶切亚克隆到pcDNA3.1真核表达载体中,构建pcDNA3.1-p27全长表达质粒。同时设计引物,扩增p27基因1~480 bp的A片段以及241~720 bp的B片段,构建pcDNA3.1-p27A和pcDNA3.1-p27B分段表达载体,并在DF-1细胞中暂态表达,利用IFA和Western blot方法鉴定病毒衣壳蛋白单克隆抗体的识别区域。结果表明:重组质粒均能正确表达,并鉴定出两株单克隆抗体5D3和4F12的抗原识别区域均位于衣壳蛋白p27蛋白碳端161~240位氨基酸区域。研究成功构建并表达了ALV衣壳蛋白p27的全长和分段真核表达载体,并利用分段表达质粒鉴定了两株单克隆抗体的抗原识别区域,为深入研究衣壳蛋白p27的生物学功能提供了生物材料。
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关键词
衣壳蛋白p27
真核表达载体
单克隆抗体
抗原识别区域
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Keywords
capsid protein P27
eukaryotic expression vector
monoclonal antibody
recognition region of monoclonal antibody
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分类号
S855-3
[农业科学—临床兽医学]
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