用抗原捕获ELISA方法及过氧化物酶染色法检测蓝舌病病毒

1

作者 鱼海琼 林志雄 +1 位作者 颜思通 黄生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第2期9-9,共1页

关键词 蓝舌病 蓝舌病病毒 抗原捕获elisa方法 过氧化物酶染色法 检测 进出境动物检疫.

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牛轮状病毒抗原捕获ELISA方法的建立与应用 被引量：4

2

作者 常继涛 张佳昕 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1142-1146,共5页

为建立牛轮状病毒(BRV)抗原检测方法,本研究以BRV VP6蛋白的多克隆抗体为捕获抗体、VP7蛋白的G6/G10共享型单克隆抗体(MAb)为检测抗体,建立了BRV抗原捕获ELISA方法。特异性试验结果显示,该ELISA方法与牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛细小... 为建立牛轮状病毒(BRV)抗原检测方法,本研究以BRV VP6蛋白的多克隆抗体为捕获抗体、VP7蛋白的G6/G10共享型单克隆抗体(MAb)为检测抗体,建立了BRV抗原捕获ELISA方法。特异性试验结果显示,该ELISA方法与牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛细小病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒以及阿卡斑病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,本研究建立的ELISA方法最低可以检出10^(4.2) TCID_(50)病毒,而商品化ELISA试剂盒和RT-PCR方法的最低检出限分别为10^(4.86) TCID_(50)和10^(3.36) TCID_(50)病毒。该方法组内和组间的变异系数均小于10%,表明重复性良好。应用该ELISA方法对67份牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示BRV阳性率为18%,与商品化试剂盒和RT-PCR方法的符合率均为100%。本研究建立的抗原捕获ELISA方法可以用于BRV的规模化检测,为BRV的病原流行病学调查研究提供了有效的技术手段。 展开更多

关键词 牛轮状病毒 抗原捕获elisa 检测 单克隆抗体

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牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及捕获ELISA检测方法的建立

3

作者 宋京格 周佳莹 +5 位作者 夏欣悦 王孟孟 李园 宋厚辉 徐义刚 王静 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第5期473-479,共7页

为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测方法,本研究采用纯化的BVDV作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5C7,采用抗体分型试剂盒鉴定其亚类为IgG2α,经IFA鉴定显示MAb 5C7能够特异性... 为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测方法,本研究采用纯化的BVDV作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5C7,采用抗体分型试剂盒鉴定其亚类为IgG2α,经IFA鉴定显示MAb 5C7能够特异性识别BVDV,利用间接ELISA测定其抗体效价为1:10^(6)。利用该BVDV特异性MAb作为检测抗体,兔源BVDV E2蛋白多克隆抗体(PAb)作为捕获抗体,经各反应条件的优化,建立了检测BVDV的抗原捕获ELISA(AC-ELISA)方法。采用该方法分别检测BVDV、牛传染性鼻气管炎病毒、牛细小病毒、牛轮状病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛副流感病毒3型等病毒,分析该方法的特异性;将10^(6.7)TCID_(50)的BVDV 10倍倍比稀释(10^(0)~10^(6)倍)稀释后,采用建立的AC-ELISA检测,评估该方法的敏感性;利用同一批次和不同批次E2蛋白PAb包被的酶标板,采用建立的AC-ELISA方法检测BVDV阳性及阴性样品,评估该方法的重复性。结果显示,该方法仅能检测到BVDV,与其余病毒均无交叉反应;对病毒BVDV的检测限为10~2TCID_(50);批内、批间重复性试验的变异系数均小于5%。利用该方法对618份牛血清和352份腹泻犊牛粪便样品检测,结果显示两种样品的阳性检出率分别为25.7%(159/618)和38.9%(137/352),与RT-PCR方法检测结果的符合率均达100%。此外,RT-PCR分析显示,阳性样品中BVDV-1的检出率为29.6%,为主要流行基因型,BVDV-2的检出率为0.9%。本研究建立的AC-ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可有效用于BVDV的检测,为BVDV的流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 抗原捕获elisa E2蛋白 单克隆抗体

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牛病毒性腹泻病毒抗原捕获ELISA检测方法的标准化研究 被引量：6

4

作者 邓宇 王新华 +2 位作者 郭燕 钟发刚 沈敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期541-544,549,共5页

用纯化牛病毒性腹泻病毒免疫蛋鸡制备出的卵黄抗体作为包被抗体,采用自制的单抗为一抗,建立牛病毒性腹泻病毒抗原捕获ELISA方法。通过试验确定,抗牛病毒性腹泻病毒卵黄抗体最佳包被浓度为1:50;McAb最适稀释浓度为1:10,HRP-羊抗鼠IgG工... 用纯化牛病毒性腹泻病毒免疫蛋鸡制备出的卵黄抗体作为包被抗体,采用自制的单抗为一抗,建立牛病毒性腹泻病毒抗原捕获ELISA方法。通过试验确定,抗牛病毒性腹泻病毒卵黄抗体最佳包被浓度为1:50;McAb最适稀释浓度为1:10,HRP-羊抗鼠IgG工作浓度为1:800。通过引入牛病毒性腹泻病毒质控血清进行质控检验,该方法所得检测结果均在质量控制范围内,达到预定标准化要求。标准化的抗原捕获ELISA方法具有特异、灵敏、可靠、方便、快捷等特点,可广泛应用推广,为我国牛病毒性腹泻病毒监测提供了行之有效的技术手段。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 抗原捕获elisa 标准化

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草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立 被引量：3

5

作者 景宏丽 曹欢 +4 位作者 张旻 王娜 林祥梅 张利峰 吴绍强 《中国动物检疫》 CAS 2014年第12期78-81,83,共5页

研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/m L,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度... 研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/m L,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1:400稀释,以3%牛血清白蛋白作为封闭液。该方法的检测限为5×105 pfu/m L,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒。特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应。该方法还具有较好的稳定性。 展开更多

关键词 草鱼呼肠孤病毒 抗原捕获elisa 单克隆抗体

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McAb捕获抗原检测EDS76病毒抗体的ELISA方法的建立和应用 被引量：1

6

作者 王雪敏 《中国家禽》 北大核心 2002年第1期10-11,共2页

将三株EDS76病毒单克隆抗体IgG混合,包被ELISA板,捕获病毒抗原后用于检测鸡血清中的EDS76抗体,以OD490nm>0.3,P/N>2.1判为阳性结果。经测定,待检血清做1∶100倍稀释时可以很好地区分阴阳性。所建方法与鸡的其它传染病血清无交叉反... 将三株EDS76病毒单克隆抗体IgG混合,包被ELISA板,捕获病毒抗原后用于检测鸡血清中的EDS76抗体,以OD490nm>0.3,P/N>2.1判为阳性结果。经测定,待检血清做1∶100倍稀释时可以很好地区分阴阳性。所建方法与鸡的其它传染病血清无交叉反应,可被免抗EDS76病毒高免血清竞争性抑制。对11个鸡场330份未接种EDS76疫苗的产蛋鸡血清检测结果表明,血清阳性率最高可达93.33%。 展开更多

关键词 McAb捕获抗原 elisa EDS76 鸡 产蛋下降综合征 单克隆抗体 抗体监测

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抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测方法的建立 被引量：4

7

作者 孙静 周国辉 +3 位作者 王幸 李超斯 魏萍 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期146-150,共5页

为建立A型口蹄疫病毒(FMDV)病原学诊断方法,本研究应用纯化的A型FMDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5F7。经IFA特异性鉴定,5F7为一株血清型特异性MAb。亚类为IgG1/κ。间... 为建立A型口蹄疫病毒(FMDV)病原学诊断方法,本研究应用纯化的A型FMDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5F7。经IFA特异性鉴定,5F7为一株血清型特异性MAb。亚类为IgG1/κ。间接ELISA检测杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1∶12 800和1∶105。硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L。应用该A型特异性MAb及实验室已制备的MAb 3D9初步建立了检测A型FMDV的抗原捕获ELISA方法。该方法可以检出2.0 ng纯化FMDV和1.0×104TCID50病毒,与O型、Asia1型FMDV及牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,组内及组间重复性试验显示变异系数小于8%。本研究建立的抗原捕获ELISA方法为A型FMDV抗原检测提供了一种实用有效的技术手段。 展开更多

关键词 A型口蹄疫病毒 单克隆抗体 抗原捕获elisa

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猪流行性乙型脑炎病毒prM-E抗原捕获ELISA检测方法的建立 被引量：2

8

作者 王晓磊 霍红 +3 位作者 郭立平 李伟 步志高 华荣虹 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期465-468,485,共5页

为建立猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,本研究以pr M-E结构蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5B10和5E7分别作为捕获抗体和辣根过氧化酶标记的检测抗体,对反应条件进行优化,建立了抗原捕获ELISA(AC-ELISA)方法。该方法与其它常见猪病病... 为建立猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,本研究以pr M-E结构蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5B10和5E7分别作为捕获抗体和辣根过氧化酶标记的检测抗体,对反应条件进行优化,建立了抗原捕获ELISA(AC-ELISA)方法。该方法与其它常见猪病病原无交叉反应,特异性强。该方法可以检出1.25×105 pfu/m L的病毒和48.44 ng/m L pr M-E重组蛋白,最佳线性检测范围为0.05μg/m L^1.00μg/m L,线性相关系数(R2)为0.996。组装的试剂盒批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。试剂盒4℃保存12个月稳定。该研究为JEV亚单位疫苗的研制与生产提供了技术支持。 展开更多

关键词 流行性乙型脑炎病毒 prM-E 抗原捕获elisa 检测

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抗Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测口蹄疫病毒的研究 被引量：6

9

作者 周国辉 李万 +1 位作者 赵磊 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期960-964,共5页

本研究用纯化的Asial型口蹄疫病毒（Footandmouthdiseasevirus，FMDV）免疫BALB／c小鼠，按常规单克隆抗体技术方法，经筛选获得6株能稳定分泌抗Asial型FMDV单抗的杂交瘤细胞株。以牛抗口蹄疫病毒IgG为捕获抗体，选择一株单抗（184）用... 本研究用纯化的Asial型口蹄疫病毒（Footandmouthdiseasevirus，FMDV）免疫BALB／c小鼠，按常规单克隆抗体技术方法，经筛选获得6株能稳定分泌抗Asial型FMDV单抗的杂交瘤细胞株。以牛抗口蹄疫病毒IgG为捕获抗体，选择一株单抗（184）用辣根过氧化物酶标记（HRP-184）作为检测抗体，建立了检测Asial型FMDV的抗原捕获ELISA方法。该方法可检出0．5859μg纯化Asial型FMDV抗原和2．5×10^3TCID50病毒，对O型FMDV、牛结核病、牛肺疫、牛流热、赤羽病、牛传染性鼻炎等病毒进行检测，均为阴性，无交叉反应发生。本研究建立的FMDV抗原捕获ELISA方法，具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点，可用于Asia1型FMDV的特异性检测。 展开更多

关键词 Asia1型 口蹄疫病毒 单克隆抗体 抗原捕获elisa

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以p33重组蛋白为抗原建立牛瑟氏泰勒虫病间接ELISA诊断方法 被引量：9

10

作者 许应天 高旭 +2 位作者 武振久 张守发 张西臣 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第4期13-14,共2页

关键词 瑟氏泰勒虫病 牛红细胞 诊断抗原 诊断方法 重组蛋白 间接elisa 血液原虫病 发病率

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犬新孢子虫可溶性抗原分析及间接ELISA检测方法的建立 被引量：10

11

作者 贾立军 张守发 鲁承 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期25-27,共3页

关键词 犬新孢子虫 elisa检测方法 抗原分析 可溶性 新生犊牛 间接 新孢子虫病 哺乳动物

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以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究 被引量：5

12

作者 何宏轩 张西臣 +2 位作者 尹继刚 李建华 杨举 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第1期3-5,共3页

以在 E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原 CP2 3为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠Ig G为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接 EL ISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为 1μg/孔纯化的 E.coli表达的CP2 3抗原... 以在 E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原 CP2 3为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠Ig G为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接 EL ISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为 1μg/孔纯化的 E.coli表达的CP2 3抗原包被酶标板 ,用 10 %兔血清进行封闭 ,以正常 E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用 CP2 3重组蛋白作为诊断 C.parvum抗原具有特异性高。 展开更多

关键词 微小隐孢子虫 抗体检测 CP23重组蛋白 抗原 间接elisa方法 辣根过氧化物酶 隐孢子虫病

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检测禽副粘病毒2型抗原的双抗体夹心ELISA方法的研究 被引量：3

13

作者 张国中 赵继勋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期474-476,共3页

以禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )群特异性单抗 7E5为基础建立了检测PMV_2抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对Yucaipa病毒的最低检出量为 1.6 96 2 μg/ml,对PMV_2不同形式病毒及各分离株也都有很好的检出率。用Yucaipa病毒尿囊液人工感... 以禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )群特异性单抗 7E5为基础建立了检测PMV_2抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对Yucaipa病毒的最低检出量为 1.6 96 2 μg/ml,对PMV_2不同形式病毒及各分离株也都有很好的检出率。用Yucaipa病毒尿囊液人工感染 10日龄SPF鸡 ,于感染后不同时间采集心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、气管等病科及泄殖腔拭子 ,经处理后用建立的方法进行检测 ,结果表明PMV_2病毒在感染鸡的法氏囊组织内大量存在 ,感染后 3天就可从法氏囊组织内检测到PMV_2病毒 ,粪便中仅个别有检出阳性者。 展开更多

关键词 双抗体夹心elisa方法 禽副粘病毒2型 单克隆抗体 抗原检测

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流行性造血器官坏死病病毒抗原捕获ELISA建立 被引量：1

14

作者 刘宁 高志强 +5 位作者 谷强 张旻 景宏丽 江育林 张利峰 刘金华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期10-12,I0001,共4页

使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体。利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法亚克隆,获得杂交瘤细胞株。将杂交瘤接种小鼠诱... 使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体。利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法亚克隆,获得杂交瘤细胞株。将杂交瘤接种小鼠诱生腹水获得单抗3A4。以抗EHNV多克隆抗体为捕获抗体,单抗3A4为检测抗体,使用HRP标记的羊抗鼠IgG作为酶标二抗,建立了EHNV的抗原捕获ELISA方法。该方法可检出103TCID_(50)的病毒液上清和0.0056!g的MCP重组蛋白。对纯化的GCRV、IHNV、IPNV、VHSV及SVCV病毒液进行检测,结果均为阴性,未发现交叉反应。本研究建立的EHNV抗原捕获ELISA方法,具有敏感、特异和重复性好的特点。通过应用于人工感染样品和临床样品的检测进一步证实了本检测方法的实用性。 展开更多

关键词 流行性造血器官坏死病 抗原捕获elisa

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以重组蛋白作为诊断抗原用ELISA方法对马梨形虫病调查 被引量：2

15

作者 于龙政 孙福余 张守发 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第8期27-28,共2页

关键词 马梨形虫病 elisa方法 诊断抗原 重组蛋白 血液原虫病 呼吸困难 经济损失 季节性

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CV-A5抗体制备及ELISA抗原检测方法的建立 被引量：4

16

作者 张小宇 靳卫平 +5 位作者 王文辉 吴杰 卢佳 孟胜利 王泽鋆 申硕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1346-1351,共6页

目的:制备柯萨奇病毒A组5型(CV-A5)多克隆抗体和单克隆抗体,建立CV-A5抗原定量ELISA检测方法,用于CV-A5疫苗研制中抗原定量及质量控制。方法:纯化后的CV-A5全病毒颗粒作为免疫原,制备兔多克隆抗体并免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合技... 目的:制备柯萨奇病毒A组5型(CV-A5)多克隆抗体和单克隆抗体,建立CV-A5抗原定量ELISA检测方法,用于CV-A5疫苗研制中抗原定量及质量控制。方法:纯化后的CV-A5全病毒颗粒作为免疫原,制备兔多克隆抗体并免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合技术制备、中和试验和ELISA法筛选获得CV-A5单克隆抗体。建立CV-A5抗原检测方法,确定线性范围,验证其准确度、精密度、稳定性、特异性;检测CV-A5病毒颗粒纯化过程样品抗原含量。结果:制备了高效价的CV-A5兔多克隆抗体及单克隆抗体并建立ELISA抗原检测法,检测范围为15.61000.0 ng/ml;高、中、低3个浓度样品准确度验证回收率为88.5%128.7%;重复性验证CV分别为1.3%、3.2%、1.2%;中间精密度验证CV分别为2.1%、2.2%和3.5%;耐用性验证回收率为97.4%127.6%;包被微孔板37℃放置3 d,样品回收率为101.7%106.9%;特异性验证结果显示抗原检测方法仅识别CV-A5抗原,与CV-A5以外的抗原均无交叉反应。结论:建立的CV-A5 ELISA抗原检测法可用于纯化过程样品的抗原检测,为含CVA5的手足口病(HFMD)多价疫苗的研制提供质量控制方法。 展开更多

关键词 柯萨奇A组5型 多克隆抗体 单克隆抗体 双抗体夹心elisa 抗原检测方法

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用快速敏感的抗原捕获ELISA法定量检测肌红蛋白

17

作者 李晓军 武建国 《医学研究生学报》 CAS 1989年第3期76-77,共2页

纯化肌红蛋白(Mb)是骨胳肌、心肌细胞的构成蛋白,血清Mb升高是肌细胞损伤的早期标志之一。心肌梗塞(AMI)时血Mb的升高与峰值常早于多种酶与同工酶,故可作为重要的辅助诊断指标。检测Mb国内已有放射免疫药盒,但放免法有着众所周知的局限... 纯化肌红蛋白(Mb)是骨胳肌、心肌细胞的构成蛋白,血清Mb升高是肌细胞损伤的早期标志之一。心肌梗塞(AMI)时血Mb的升高与峰值常早于多种酶与同工酶,故可作为重要的辅助诊断指标。检测Mb国内已有放射免疫药盒,但放免法有着众所周知的局限性。我们建立的反向血凝技术也难以推广。国外有关ELISA检查Mb的技术均很复杂,现将我们建立的一种抗原捕获ELISA法报告如下。本法灵敏度、准确性、精密度均符合常规试验要求,可在2小时内发出报告。材料与方法 (一)Mb与抗Mb抗体制备同以往方法。Mb自手术切除的人胸肌提取,浓度9.2mg/ 展开更多

关键词 elisa法 放射免疫药盒 肌细胞 抗原捕获 构成蛋白 早期标志 常规试验 抗体制备 同工酶 酶标记

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用抗原捕获ELISA检测牛冠状病毒

18

作者 李凯年 《畜牧兽医科技信息》 1997年第20期5-5,共1页

美国D.R.Smith等人研制了用单克隆抗体(PACELISA)或多克隆抗体(MACELISA)进行抗原捕获的两种ELISA,以检测粪便中的牛冠状病毒(BCV)抗原。从定菌犊牛或新生犊牛腹泻现地病例采集60份参考粪样(36份BCV阳性,24份BCV阴性),用电镜(EM)、免疫... 美国D.R.Smith等人研制了用单克隆抗体(PACELISA)或多克隆抗体(MACELISA)进行抗原捕获的两种ELISA,以检测粪便中的牛冠状病毒(BCV)抗原。从定菌犊牛或新生犊牛腹泻现地病例采集60份参考粪样(36份BCV阳性,24份BCV阴性),用电镜(EM)、免疫电镜(IEM)或免疫荧光确定这些犊牛的BCV感染状态。结果表明,PACELISA的敏感性为80.6％,特异性为95.8％;MACELISA的敏感性为97.2％,特异性为100％。用MACELISA测试来自定菌犊牛的2份粪样;(含有Breda病毒)用IEM检测BCV为阴性。用MACELISA测试这2份样品呈阴性。 展开更多

关键词 抗原捕获 elisa检测 单克隆抗体 牛冠状病毒 多克隆抗体 免疫电镜 特异性 免疫荧光 犊牛腹泻 病例采集

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牛γ-干扰素ELISA检测方法的建立与初步应用 被引量：16

19

作者 陈祥 牛中伟 +5 位作者 徐正中 孟闯 孙林 黄金林 潘志明 焦新安 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期54-59,共6页

以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓... 以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓度包被,与1∶3 000倍稀释的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗血清(13.8μg/mL)配对,以1∶6 000稀释的商品化酶标羊抗兔IgG为指示抗体,建立了BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法,该方法可以检出2.56 U/100μL(30.5 pg/100μL)的rHis-BoIFN-γ、8U/100μL的rBac-BoIFN-γ和1U/100μL的分泌性天然BoIFN-γ。以商品化试剂盒作为平行对照,将获得的奶牛临床检测血浆样品使用BoIFN-γ抗原捕获ELISA法进行检测,结果显示两种方法检测符合率达到83.9%。本研究建立的BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法可有效检测分泌性IFN-γ,为进一步开发BoIFN-γELISA检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 牛 Γ-干扰素 抗原捕获elisa 单克隆抗体

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日粮中大豆抗原蛋白检测方法的研究进展 被引量：3

20

作者 张诗尧 赵元 +3 位作者 刘丹丹 鲍男 赵寒冬 张迪 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期518-521,共4页

大豆抗原蛋白对动物造成不利的影响和不易灭活的特性,限制了大豆及其制品在动物饲料行业的应用。因而在当前蛋白质资源短缺的形式下,如何快速、简便、准确地检测出大豆中的抗原蛋白成为亟需解决的重要问题。文中综述了几种有关大豆抗原... 大豆抗原蛋白对动物造成不利的影响和不易灭活的特性,限制了大豆及其制品在动物饲料行业的应用。因而在当前蛋白质资源短缺的形式下,如何快速、简便、准确地检测出大豆中的抗原蛋白成为亟需解决的重要问题。文中综述了几种有关大豆抗原蛋白的常用检测方法,并比较其检测效果,为生产中选择适当的测定方法提供理论依据。 展开更多

关键词 大豆抗原蛋白 竞争elisa 双抗夹心elisa 检测方法

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