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不同细胞消化方式对靶向CD3L1的抗体结合肿瘤细胞的影响
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作者 张远 邓守言 许杰 《复旦学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期429-436,共8页
目的探讨不同的细胞消化方式对靶向CD3L1的人源化单克隆抗体(代号:5H)结合肿瘤细胞的影响。方法使用胰蛋白酶溶液或胶原酶与中性蛋白酶混合液,在室温和37℃两种消化温度下对不同贴壁肿瘤细胞系进行离解、传代和收集。随后,通过流式细胞... 目的探讨不同的细胞消化方式对靶向CD3L1的人源化单克隆抗体(代号:5H)结合肿瘤细胞的影响。方法使用胰蛋白酶溶液或胶原酶与中性蛋白酶混合液,在室温和37℃两种消化温度下对不同贴壁肿瘤细胞系进行离解、传代和收集。随后,通过流式细胞术和共聚焦显微镜成像,比较不同消化条件下肿瘤细胞与5H抗体的结合差异。结果使用胰蛋白酶溶液在室温离解和传代的细胞仅表现出与5H抗体的微弱结合,而相同的细胞系用胶原酶与中性蛋白酶混合液在室温消化后,则显示出与5H抗体的明显结合,两组之间抗体结合信号及抗体染色阳性细胞比例的差异有统计学意义(P<0.01)。胶原酶与中性蛋白酶混合液处理的细胞与抗体的结合信号呈现出抗体浓度依赖性,可用于受体占位分析。相比室温,37℃的条件下消化后略微削弱了靶细胞与5H抗体的结合,但该差异无统计学意义。结论胰蛋白酶溶液消化方式显著削弱了抗CD3L1抗体与肿瘤细胞的结合,而胶原酶与中性蛋白酶混合液的消化方式能有效保护该结合。在选择适宜的消化酶处理细胞的前提下,消化温度的影响相对次要。在研究抗体药物与细胞表面抗原相互作用时,应采用合理且经过优化的细胞消化方案。 展开更多
关键词 CD3L1 胞膜蛋白 细胞消化 抗体-抗原结合 肿瘤免疫治疗
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山羊支原体山羊肺炎亚种单克隆抗体的制备及抗体结合抗原表位的筛选 被引量:2
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作者 郑莹莹 骈亚亚 +5 位作者 储岳峰 赵萍 贺英 简莹娜 姜永强 逯忠新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期21-24,共4页
本研究旨在制备山羊支原体山羊肺炎亚种(M.capricolumsubsp.capripneumoniae,Mccp)的单克隆抗体并筛选与抗体结合的抗原表位。试验用甲醛灭活的Mccp免疫BALB/c小鼠,运用传统的细胞融合技术进行融合获得杂交瘤细胞,亚克隆,制备单克隆抗... 本研究旨在制备山羊支原体山羊肺炎亚种(M.capricolumsubsp.capripneumoniae,Mccp)的单克隆抗体并筛选与抗体结合的抗原表位。试验用甲醛灭活的Mccp免疫BALB/c小鼠,运用传统的细胞融合技术进行融合获得杂交瘤细胞,亚克隆,制备单克隆抗体腹水,采用酶联免疫技术(ELISA)和免疫印迹(Western blotting)技术鉴定单克隆抗体的特异性及胶内酶切鉴定与抗体结合的抗原表位。最终成功筛选获得5株单克隆抗体,鉴定到3个与抗体结合的抗原表位,为下一步科学研究提供了初步且可靠的试验基础。 展开更多
关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 单克隆抗体 抗体结合抗原表位
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Eg犬粪抗原与多克隆抗体结合的条件筛选与纯化
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作者 徐晶 班万里 +11 位作者 王冰洁 赵莉 穆尼拉·特列吾汗 吴小霞 陈云英 段兰利 艾沙江 郭涛 王方 乌云花 布于其其格 张壮志 《草食家畜》 2020年第3期39-50,共12页
包虫病又称棘球蚴病,此病是由细粒棘球绦虫引起的一类严重的人兽共患寄生虫病,它严重危害人类与家畜的健康,并对畜牧业造成危害与阻碍。了解终末宿主犬科动物粪样中细粒棘球绦虫虫体蛋白组成,寻找特异性的靶抗原能对包虫病的预防和提高... 包虫病又称棘球蚴病,此病是由细粒棘球绦虫引起的一类严重的人兽共患寄生虫病,它严重危害人类与家畜的健康,并对畜牧业造成危害与阻碍。了解终末宿主犬科动物粪样中细粒棘球绦虫虫体蛋白组成,寻找特异性的靶抗原能对包虫病的预防和提高双抗夹心ELISA检测的敏感性与特异性提供重要依据。本文通过对缓冲溶液的筛选,多克隆血清与粪抗原结合条件的筛选,确定抗体与抗原结合最佳配比浓度,用亲和层析与凝胶层析对抗原抗体结合物纯化分离,并检测纯化后样品的敏感性和特异性。最终确定PBST和柠檬酸缓冲液都能用于溶解犬粪中细粒棘球绦虫可溶性抗原,且抗原抗体最佳结合浓度选用溶液体积不变情况下,多克隆血清占比20%与粪抗原结合。抗原抗体结合物通过凝胶层析柱在A峰(45.5~50.5 min附近)接收的样品中含有纯化的抗原抗体结合物。本研究的结果与方法可以为以后筛选鉴定靶抗原,提高粪抗原ELISA检测试剂盒的敏感性与特异性提供重要依据。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 棘球蚴 抗原抗体结合
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人源化基因修饰猪红细胞与人血清免疫相容性的体外研究
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作者 陈蕾佳 崔梦一 +11 位作者 宋翔宇 王恺 贾志博 杨鎏璞 董阳辉 左浩辰 杜嘉祥 潘登科 许文静 任洪波 赵亚群 彭江 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期415-421,共7页
目的 探讨野生型(WT)、四基因修饰(TKO/hCD55)和六基因修饰(TKO/hCD55/hCD46/hTBM)猪红细胞与人血清的免疫相容性和免疫差异。方法 收集20名不同血型志愿者的血液,将WT、TKO/hCD55和TKO/hCD55/hCD46/hTBM猪红细胞、ABO-相容(ABO-C)及ABO... 目的 探讨野生型(WT)、四基因修饰(TKO/hCD55)和六基因修饰(TKO/hCD55/hCD46/hTBM)猪红细胞与人血清的免疫相容性和免疫差异。方法 收集20名不同血型志愿者的血液,将WT、TKO/hCD55和TKO/hCD55/hCD46/hTBM猪红细胞、ABO-相容(ABO-C)及ABO-不相容(ABO-I)人红细胞分别暴露于不同血型人血清中,检测血凝集、抗原抗体结合(IgG、IgM)水平和补体依赖细胞毒性,评估2种基因修饰猪红细胞与人血清的免疫相容性。结果 ABO-C组未出现明显凝集;WT组和ABO-I组凝集水平高于TKO/hCD55组和TKO/hCD55/hCD46/hTBM组(均为P<0.001)。WT组猪红细胞裂解水平高于ABO-C组、TKO/hCD55组和TKO/hCD55/hCD46/hTBM组;ABO-I组猪红细胞裂解水平高于TKO/hCD55组、TKO/hCD55/hCD46/hTBM组(均为P<0.01)。TKO/hCD55组猪红细胞IgM和IgG结合水平均低于WT组和ABO-I组;TKO/hCD55/hCD46/hTBM组猪红细胞IgG和IgM结合水平低于WT组,IgG低于ABO-I组(均为P<0.05)。结论基因修饰猪红细胞的免疫相容性优于野生型猪,并接近于ABO-C,人源化猪红细胞在血资源奇缺时可考虑作为血液来源。 展开更多
关键词 输血 异种移植 基因修饰猪 异种抗原 红细胞 抗原抗体结合 凝集 补体依赖细胞毒性
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天花粉蛋白基因的克隆、表达和活性鉴定 被引量:1
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作者 蔡煊 胡拥军 +2 位作者 徐洪 俞吉安 孙兵 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1503-1505,共3页
用 PCR( Polymerase Chain Reaction)扩增出天花粉蛋白 ( Trichosanthin,TCS)基因全长序列 ,插入表达载体 .经双酶切鉴定及测序分析 ,表明阅读框正确 .表达 His- TCS活性融合蛋白并纯化天花粉蛋白 ,鉴定出其具有 RNA
关键词 天花粉蛋白 基因克隆 分离纯化 生物活性 基因表达 RNA N-糖苷酶活性 抗原抗体结合活性
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表面等离子共振技术测定生长抑素含量 被引量:2
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作者 高锦航 刘瑞 +3 位作者 童欢 李献 强鸥 唐承薇 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1327-1331,共5页
应用表面等离子共振(SPR)技术建立了一种快速检测生长抑素(SST)含量的方法,在pH=5.0,SST浓度为75μg/mL的最佳偶联条件下,SST在CM5芯片上的偶联值为1231.7Responseunit(RU).选择117.7nmol/L作为固定的大分子量抗体浓度,用抗原-抗体-抗... 应用表面等离子共振(SPR)技术建立了一种快速检测生长抑素(SST)含量的方法,在pH=5.0,SST浓度为75μg/mL的最佳偶联条件下,SST在CM5芯片上的偶联值为1231.7Responseunit(RU).选择117.7nmol/L作为固定的大分子量抗体浓度,用抗原-抗体-抗原结合法检测SST纯品,在20~2000pg范围内,SST纯品含量和RU值之间可建立直线相关的标准曲线,R=-0.824,p<0.05,变异系数CV=1.3%.所建立的方法测定SST含量的范围为20~2000pg,重复性好且可随时检测,有望用于SST的临床即时检测. 展开更多
关键词 生长抑素定量检测 表面等离子共振 抗原-抗体-抗原结合
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肉鸡新城疫Ⅱ系苗滴鼻期饮水中添加药物对免疫效果的影响
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作者 彭贵友 余一心 金升藻 《湖北畜牧兽医》 1989年第4期32-32,25,共2页
本试验用室星肉鸡为材料,新城疫(ND)Ⅱ系苗滴鼻期在饮水中添加青、链霉素和呋喃唑酮,并设计停药零天、一天、三天、五天,对免疫效果的影响作了试验。通过HI抗御水平的测定和F<sub>48</sub>E<sub>6</sub>—1... 本试验用室星肉鸡为材料,新城疫(ND)Ⅱ系苗滴鼻期在饮水中添加青、链霉素和呋喃唑酮,并设计停药零天、一天、三天、五天,对免疫效果的影响作了试验。通过HI抗御水平的测定和F<sub>48</sub>E<sub>6</sub>—1代强毒攻毒试验证明,滴鼻期饮水中添加药物影响Ⅱ系苗的免疫效果,且不同药物,停药不同天数的影响效果是不相同的,只有停药五天才起至100%的保护作用。 展开更多
关键词 攻毒试验 呋喃唑酮 抗体滴度 弱毒疫苗 致病性 胸部肌肉 报道分析 多宿主 宝星 抗原抗体结合
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关于宁波市奶牛结核病的检测报告
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作者 应如朗 余全法 +2 位作者 鲍伟华 王敏亚 王维金 《浙江畜牧兽医》 2001年第2期28-28,共1页
关键词 奶牛 结核病 PPD试验 克隆代抗原-抗体结合效应 检测
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