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牙龈卟啉单胞菌prtC基因原核表达系统构建及牙周损伤与局部 PrtC水平的关系(英文)
被引量：
2
1
作者
阮萍
罗耀东
严杰
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第5期369-374,共6页
目的构建牙龈卟啉单胞菌胶原酶基因prtC原核表达系统并鉴定其表达产物的抗原性和免疫反应性,确定牙周损伤与其局部PrtC水平之间的关系。方法采用高保真PCR从牙龈卟啉单胞菌ATCC33277和47A1株扩增出全长prtC基因片段,TA克隆后测序。采用p...
目的构建牙龈卟啉单胞菌胶原酶基因prtC原核表达系统并鉴定其表达产物的抗原性和免疫反应性,确定牙周损伤与其局部PrtC水平之间的关系。方法采用高保真PCR从牙龈卟啉单胞菌ATCC33277和47A1株扩增出全长prtC基因片段,TA克隆后测序。采用pET32a质粒和大肠杆菌BL21DE3株构建prtC基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导目的重组蛋白rPrtC的表达。采用Westernblot检测rPrtC的抗原性和免疫反应性。建立ELISA,检测人慢性牙周炎龈下菌斑标本中的PrtC水平。结果牙龈卟啉单胞菌ATCC33277和47A1株prtC基因核苷酸序列完全相同。与报道的相应序列比较,克隆的prtC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.46%和99.07%。在不同浓度的IPTG诱导下,rPrtC的产量高达细菌总蛋白的50%左右。rPrtC能与牙龈卟啉单胞菌全菌抗体结合,并能有效地诱导家兔产生特异性抗体。91.39%的人慢性牙周炎龈下菌斑标本中可检出PrtC,重度牙周炎标本中PrtC水平明显高于轻度牙周炎(P<0.05)。结论本研究成功地构建了牙龈卟啉单胞菌prtC基因高效原核表达系统。rPrtC具有良好的抗原性和免疫反应性,可作为研制牙龈卟啉单胞菌疫苗和血清学检测试剂盒的候选抗原。人慢性牙周炎的牙周破坏程度与局部PrtC水平密切相关。
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关键词
牙龈卟啉单胞菌
胶原酶
prtC基因
克隆/表达
抗原性/免疫反应性
PrtC/牙周破坏
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题名
牙龈卟啉单胞菌prtC基因原核表达系统构建及牙周损伤与局部 PrtC水平的关系(英文)
被引量：
2
1
作者
阮萍
罗耀东
严杰
机构
浙江省绍兴文理学院医学院病原生物学教研室
浙江大学医学院
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第5期369-374,共6页
基金
ThissubjectwassupportedbytheNaturalScienceFundofZhejiangProvince(No.399125)
文摘
目的构建牙龈卟啉单胞菌胶原酶基因prtC原核表达系统并鉴定其表达产物的抗原性和免疫反应性,确定牙周损伤与其局部PrtC水平之间的关系。方法采用高保真PCR从牙龈卟啉单胞菌ATCC33277和47A1株扩增出全长prtC基因片段,TA克隆后测序。采用pET32a质粒和大肠杆菌BL21DE3株构建prtC基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导目的重组蛋白rPrtC的表达。采用Westernblot检测rPrtC的抗原性和免疫反应性。建立ELISA,检测人慢性牙周炎龈下菌斑标本中的PrtC水平。结果牙龈卟啉单胞菌ATCC33277和47A1株prtC基因核苷酸序列完全相同。与报道的相应序列比较,克隆的prtC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.46%和99.07%。在不同浓度的IPTG诱导下,rPrtC的产量高达细菌总蛋白的50%左右。rPrtC能与牙龈卟啉单胞菌全菌抗体结合,并能有效地诱导家兔产生特异性抗体。91.39%的人慢性牙周炎龈下菌斑标本中可检出PrtC,重度牙周炎标本中PrtC水平明显高于轻度牙周炎(P<0.05)。结论本研究成功地构建了牙龈卟啉单胞菌prtC基因高效原核表达系统。rPrtC具有良好的抗原性和免疫反应性,可作为研制牙龈卟啉单胞菌疫苗和血清学检测试剂盒的候选抗原。人慢性牙周炎的牙周破坏程度与局部PrtC水平密切相关。
关键词
牙龈卟啉单胞菌
胶原酶
prtC基因
克隆/表达
抗原性/免疫反应性
PrtC/牙周破坏
Keywords
Porphyromonas gingivalis
Collagenase
prtC gene
Cloning / expression
Antigenicity / immunoreactivity
PrtC / Periodontal damage
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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出处
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1
牙龈卟啉单胞菌prtC基因原核表达系统构建及牙周损伤与局部 PrtC水平的关系(英文)
阮萍
罗耀东
严杰
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005
2
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