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体积排阻色谱法测定低分子量肝素抗凝血因子Xa的活性
被引量：
12
1
作者
张倩倩
康经武
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期684-690,共7页
发展了一种基于体积排阻色谱测定低分子量肝素(LMWH)抗凝血活性的方法。利用肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后可增强ATⅢ对凝血因子Xa(FXa)抑制作用的原理,通过测定加入LMWH后FXa水解其生色底物产生对硝基苯胺(pNA)这一反应的抑制程度确定L...
发展了一种基于体积排阻色谱测定低分子量肝素(LMWH)抗凝血活性的方法。利用肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后可增强ATⅢ对凝血因子Xa(FXa)抑制作用的原理,通过测定加入LMWH后FXa水解其生色底物产生对硝基苯胺(pNA)这一反应的抑制程度确定LMWH的活性。首先将含有一定浓度LMWH的缓冲溶液与ATⅢ溶液混合,然后依次加入FXa和生色底物,分别孵育一段时间。底物被FXa水解,产生游离的pNA。体积排阻色谱可将小分子产物pNA与其他大分子分离开,因而可以在pNA的最大吸收波长下得到高灵敏度的测定,并且不再受其他成分的干扰。该方法重复性好,灵敏度高,极大地减少了样品的消耗量,降低了成本,并且还可进行各种复杂样品(如血浆)中LMWH抗FXa活性的监测。
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关键词
体积排阻色谱
抗凝血因子
Xa
低分子量肝素
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职称材料
尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ的稀土离子荧光探针研究
被引量：
1
2
作者
徐小龙
刘清亮
解永树
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第11期1807-1812,共6页
尖吻蝮蛇毒抗凝血因子 ( ACF )分子中有两个钙离子结合位点 ,钙离子对 ACF 的内源荧光有增强作用 ,稀土离子 ( Nd3 +,Sm3 +,Eu3 +,Gd3 +和 Tb3 +)能取代 ACF 分子中的钙离子 ,并对 ACF 的内源荧光有不同程度的猝灭作用 ,其中 Tb3 ...
尖吻蝮蛇毒抗凝血因子 ( ACF )分子中有两个钙离子结合位点 ,钙离子对 ACF 的内源荧光有增强作用 ,稀土离子 ( Nd3 +,Sm3 +,Eu3 +,Gd3 +和 Tb3 +)能取代 ACF 分子中的钙离子 ,并对 ACF 的内源荧光有不同程度的猝灭作用 ,其中 Tb3 +接受 ACF 分子中 Trp残基传递的能量后 ,特征荧光增强 .稀土离子与 ACF 荧光滴定表明 ,ACF 分子中有两个稀土离子结合位点 ,稀土离子和钙离子在 ACF 分子中两个结合部位是共同的竞争结合部位 .ACF 与不同稀土离子之间有相近的表观结合常数 K1 或 K2 .Tb3 +与 RE3 +( RE=Nd,Sm,Eu或 Gd)间线性自由能关系表明 ,稀土离子与 ACF 结合时 ,没有明显的空间效应 .ACF 分子中的两个结合位点在结构上都有较大的柔性 ,这种结构柔性为钙离子在 ACF 与活化凝血因子
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关键词
稀土离子
抗凝血因子
Ⅱ
荧光探讨
金属离子
结合位点
尖吻蝮蛇
蛇毒
抗凝
血
机理
抗栓药物
钙离子
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职称材料
题名
体积排阻色谱法测定低分子量肝素抗凝血因子Xa的活性
被引量：
12
1
作者
张倩倩
康经武
机构
中国科学院上海有机化学研究所
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期684-690,共7页
基金
国家自然科学基金项目(20975109
9713021)
+1 种基金
国家科技重大专项项目(2011ZX09202-101-10)
杭州九源基因工程有限公司对本工作的资助
文摘
发展了一种基于体积排阻色谱测定低分子量肝素(LMWH)抗凝血活性的方法。利用肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后可增强ATⅢ对凝血因子Xa(FXa)抑制作用的原理,通过测定加入LMWH后FXa水解其生色底物产生对硝基苯胺(pNA)这一反应的抑制程度确定LMWH的活性。首先将含有一定浓度LMWH的缓冲溶液与ATⅢ溶液混合,然后依次加入FXa和生色底物,分别孵育一段时间。底物被FXa水解,产生游离的pNA。体积排阻色谱可将小分子产物pNA与其他大分子分离开,因而可以在pNA的最大吸收波长下得到高灵敏度的测定,并且不再受其他成分的干扰。该方法重复性好,灵敏度高,极大地减少了样品的消耗量,降低了成本,并且还可进行各种复杂样品(如血浆)中LMWH抗FXa活性的监测。
关键词
体积排阻色谱
抗凝血因子
Xa
低分子量肝素
Keywords
size exclusion chromatography （SEC）
anti-factor Xa activity
low molecularweight heparins
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ的稀土离子荧光探针研究
被引量：
1
2
作者
徐小龙
刘清亮
解永树
机构
中国科学技术大学化学系
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第11期1807-1812,共6页
基金
安徽省自然科学基金 (批准号 :0 0 0 444 2 8)资助
文摘
尖吻蝮蛇毒抗凝血因子 ( ACF )分子中有两个钙离子结合位点 ,钙离子对 ACF 的内源荧光有增强作用 ,稀土离子 ( Nd3 +,Sm3 +,Eu3 +,Gd3 +和 Tb3 +)能取代 ACF 分子中的钙离子 ,并对 ACF 的内源荧光有不同程度的猝灭作用 ,其中 Tb3 +接受 ACF 分子中 Trp残基传递的能量后 ,特征荧光增强 .稀土离子与 ACF 荧光滴定表明 ,ACF 分子中有两个稀土离子结合位点 ,稀土离子和钙离子在 ACF 分子中两个结合部位是共同的竞争结合部位 .ACF 与不同稀土离子之间有相近的表观结合常数 K1 或 K2 .Tb3 +与 RE3 +( RE=Nd,Sm,Eu或 Gd)间线性自由能关系表明 ,稀土离子与 ACF 结合时 ,没有明显的空间效应 .ACF 分子中的两个结合位点在结构上都有较大的柔性 ,这种结构柔性为钙离子在 ACF 与活化凝血因子
关键词
稀土离子
抗凝血因子
Ⅱ
荧光探讨
金属离子
结合位点
尖吻蝮蛇
蛇毒
抗凝
血
机理
抗栓药物
钙离子
Keywords
Rare earth ions
Anticoagulation factor Ⅱ
Fluorescence probe
Metal ion binding site
分类号
R973.2 [医药卫生—药品]
R996.3 [医药卫生—毒理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体积排阻色谱法测定低分子量肝素抗凝血因子Xa的活性
张倩倩
康经武
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2013
12
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ的稀土离子荧光探针研究
徐小龙
刘清亮
解永树
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
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职称材料
已选择
0
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