基因工程抗体片段——谱写抗体家族的新乐章 被引量：3

1

作者 崔恒 高磊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期467-472,共6页

随着分子生物学技术的进步和抗体基因结构的阐明,以小分子抗体为基础并经基因工程改建从而用于研究和临床诊治的大量基因工程抗体片段应运而生。其中,可将生物学活性效应桥连于治疗靶标的双特异性抗体、同时增强抗体效能及细胞毒靶向性... 随着分子生物学技术的进步和抗体基因结构的阐明,以小分子抗体为基础并经基因工程改建从而用于研究和临床诊治的大量基因工程抗体片段应运而生。其中,可将生物学活性效应桥连于治疗靶标的双特异性抗体、同时增强抗体效能及细胞毒靶向性的免疫结合物、以独特的单域结构在生物技术和临床医学等方面倍受青睐的纳米抗体,以及在细胞内特定部位表达的细胞内抗体是近年来研究最活跃的几个领域。凭借免疫原性弱、组织渗透性强、低毒性及制备简便等优势,基因工程抗体片段较之单克隆抗体受到了更广泛的关注与认可。尽管大多数处于临床开发的抗体片段的安全性和有效性还有待确定,但基因工程抗体片段的研发必将大大提高人类疾病尤其是肿瘤的诊治水平。 展开更多

关键词 抗体片段 基因工程 双特异性抗体 免疫结合物 纳米抗体 细胞内抗体 抗肿瘤作用

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高效高活性抗体片段的制备 被引量：3

2

作者 杨子义 王世真 李军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期198-200,共3页

为高效地制备高免疫活性的抗体片段，我们试用了两种新的蛋白酶消化鼠源性单克隆抗体（ｍＡｂ）。纯化的ＩｇＧ１抗肺癌ｍＡｂ经无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶消化后，抗体片段的产率分别为最大理论产率的７７．６％和９８．８％。两种酶制... 为高效地制备高免疫活性的抗体片段，我们试用了两种新的蛋白酶消化鼠源性单克隆抗体（ｍＡｂ）。纯化的ＩｇＧ１抗肺癌ｍＡｂ经无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶消化后，抗体片段的产率分别为最大理论产率的７７．６％和９８．８％。两种酶制备的片段为Ｆ（ａｂ′）２与Ｆａｂ混合物。经细胞结合实验、细胞结合抑制实验及动物模型的肿瘤定位显像证明，两种酶所得片段均具有良好的免疫活性，其中无花果蛋白酶所制片段的免疫活性较高。 展开更多

关键词 抗体片段 蛋白酶 免疫活性 制备

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有望调控植物表达的单链抗体片段

3

作者 孙雷心 《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第6期9-9,共1页

英国Leicester大学的Bill Cockburn和Gary Whitelam等人已成功地在植物中产生单链抗体片段(SCAB)。他们的工作是San Diego Scripps Clinic研究所Andrew Hiatt有关多克隆抗体工作的重复。但Leicester的研究人员相信,他们所研究的SCAB比... 英国Leicester大学的Bill Cockburn和Gary Whitelam等人已成功地在植物中产生单链抗体片段(SCAB)。他们的工作是San Diego Scripps Clinic研究所Andrew Hiatt有关多克隆抗体工作的重复。但Leicester的研究人员相信,他们所研究的SCAB比多抗更小,而且插入SCAB可调控基因的开启和关闭,这些SCAB可能更适于植物操作。代替使用整个抗体,只需整合其活性位点即可。他们认为利用与特异性酶结合的抗体片段可以关闭特异性酶。这样,如果插入了对淀粉合成途径中的酶具专性的抗体片段,那么淀粉合成途径就将中断,这些细胞就可将其能量集中于制造其它的相应产物。 展开更多

关键词 抗体片段 特异性酶 合成途径 调控基因 专性 能量集中 活性位点 履复

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具有GPX活力的抗体片段Fv的制备和性质 被引量：3

4

作者 时成波 刘俊秋 +1 位作者 罗贵民 阎岗林 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期566-569,共4页

具有谷胱甘肽 ( GSH)结合部位的鼠抗体 3 H4 ( Ig M)经胃蛋白酶水解 ,产生分子量为 2 50 0 0的抗体 Fv片段 ,用荧光滴定法测定了它与 GSH的亲和常数 Ka=1 .1 7× 1 0 7L/ mol.该片段经苯甲基磺酰氟活化 ,再经Na HSe作用 ,其结合部... 具有谷胱甘肽 ( GSH)结合部位的鼠抗体 3 H4 ( Ig M)经胃蛋白酶水解 ,产生分子量为 2 50 0 0的抗体 Fv片段 ,用荧光滴定法测定了它与 GSH的亲和常数 Ka=1 .1 7× 1 0 7L/ mol.该片段经苯甲基磺酰氟活化 ,再经Na HSe作用 ,其结合部位的丝氨酸被突变为谷胱甘肽过氧化物酶 ( GPX)的催化基团硒代半胱氨酸 .突变后的 Fv片段表现出很高的 GPX活性 ,其活力高达 2 50 0 U/μmol,称为 Fv抗体酶 .动力学分析表明 ,Fv酶的最适温度为 55℃ ,最适 p H为 7.0 ,催化机制为乒乓机制 ,米氏常数分别为 :Km( GSH) =4 .1 6× 1 0 - 3mol/ L,Km( H2 O2 ) =2 .8× 1 0 - 4 mol/ 展开更多

关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 抗体Fv片段 抗体酶 人工酶

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嵌合抗CD_(20)抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定 被引量：5

5

作者 赖增祖 熊冬生 +4 位作者 范冬梅 彭辉 许元富 朱祯平 杨纯正 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期521-524,共4页

目的 :构建抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达。方法 :利用PCR方法从抗CD2 0 单链抗体 (ScFv)表达载体上扩增抗CD2 0 抗体轻链可变区基因 (VL)、重链可变区基因 (VH) ,然后将VH、VL 基因重组到Fa... 目的 :构建抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达。方法 :利用PCR方法从抗CD2 0 单链抗体 (ScFv)表达载体上扩增抗CD2 0 抗体轻链可变区基因 (VL)、重链可变区基因 (VH) ,然后将VH、VL 基因重组到Fab表达载体pYZF中 ,构建抗CD2 0 Fab表达载体pYZF1cd2 0 ,并在 2 7C7菌中高效表这。结果 :经Fab表达载体转化的 2 7C7菌株 ,进行表达培养 ,经分离纯化获得具有CD2 0 特异结合活性的Fab片段 ,竞争性免疫荧光抑制实验表明 ,表达产物Fab片段能竞争性抑制鼠源性抗CD2 0 抗体HI47和CD2 0 表达细胞Raji细胞结合。结论 :在大肠杆菌中高效可溶性分泌表达有活性的抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段。 展开更多

关键词 单克隆抗体 嵌合抗体Fab片段 CD20 大肠杆菌

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嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建 被引量：3

6

作者 彭晖 杨纯正 +4 位作者 范冬梅 郑梦杰 赖增祖 熊冬生 朱祯平 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期4-8,共5页

分别以抗CD2 0 Fab’轻链和Fd段的氨基酸一级序列为探针 ,在PDB数据库中搜寻与其同源性高的蛋白作为参考蛋白 ,利用InsightII/MSI的同源蛋白质结构模建系统(homology)在SGI计算机图形工作站上模建轻链和Fd段的三维空间结构后 ,搭建成抗C... 分别以抗CD2 0 Fab’轻链和Fd段的氨基酸一级序列为探针 ,在PDB数据库中搜寻与其同源性高的蛋白作为参考蛋白 ,利用InsightII/MSI的同源蛋白质结构模建系统(homology)在SGI计算机图形工作站上模建轻链和Fd段的三维空间结构后 ,搭建成抗CD2 0 嵌合抗体片段Fab’的空间构象 ,并对模建蛋白进行分子力学和分子动力学优化。对优化后的模建蛋白的合理性验证显示 ,模建蛋白的三维结构是合理而可信的。 展开更多

关键词 同源建模在 CD20 抗体Fab'片段 三维结构 蛋白 B淋巴细胞瘤 药物治疗 嵌合抗体

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CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究 被引量：2

7

作者 王立勇 刘秀明 +6 位作者 张玲 姚娜 王德仲 历雯清 蔡静波 李海燕 姜潮 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第12期112-120,共9页

【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索... 【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索不同初始接种量、蔗糖质量分数、水解酪蛋白质量浓度对红花悬浮细胞生长的影响。将CD20复合片段抗体基因两端引入XmaⅠ/EcoRⅠ酶切位点,并将其与pEASY-T1和pBasta载体相连,构建pEASY-T1-CD20克隆载体和pBasta-CD20表达载体,再将构建的pBasta-CD20表达载体转入根瘤农杆菌,利用根瘤农杆菌介导红花悬浮细胞转化法表达CD20复合片段抗体。【结果】红花子叶愈伤诱导最佳条件为MS+NAA 2mg/L+6-BA 0.5mg/L、温度(25±0.1)℃、光照70μmol/(m2·s)连续光照,继代培养条件为MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、30μmol/(m2·s)连续光照、温度(25±0.1)℃。悬浮细胞体系培养最佳条件为不加琼脂粉的MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、接种量2.5g(50mL培养基)、蔗糖质量分数2%、水解酪蛋白800mg/L。pBastaCD20表达载体构建成功,且目的蛋白在红花悬浮细胞中成功表达。【结论】成功构建了红花悬浮细胞培养体系,并用该体系成功表达了CD20复合片段抗体。 展开更多

关键词 红花愈伤组织 悬浮细胞 农杆菌介导 表达载体 CD20复合片段抗体

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抗体F(ab′)_2片段靶向的载多柔比星免疫毫微粒的构建及其抗肝癌作用 被引量：3

8

作者 王霞 刘晓波 +2 位作者 蔡美英 黎光 魏大鹏 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期176-180,共5页

目的　构建抗体F(ab′) 2 片段靶向的载药免疫毫微粒 ;评价F(ab′) 2 片段免疫毫微粒对肿瘤的特异结合性及杀伤作用。方法　采用异型双功能交联剂琥珀酰亚胺基 3 (2 吡啶二硫 )丙酸酯 (SPDP)将抗人肝癌单抗HAb18或对照抗体 4E3的F(ab... 目的　构建抗体F(ab′) 2 片段靶向的载药免疫毫微粒 ;评价F(ab′) 2 片段免疫毫微粒对肿瘤的特异结合性及杀伤作用。方法　采用异型双功能交联剂琥珀酰亚胺基 3 (2 吡啶二硫 )丙酸酯 (SPDP)将抗人肝癌单抗HAb18或对照抗体 4E3的F(ab′) 2 片段与多柔比星 (ADR)人血清白蛋白毫微粒 (ADR HAS NP)共价交联构建抗体F (ab′) 2 片段靶向的载药免疫毫微粒 (HAb18F(ab′) 2 ADR HSA NP ,4E3F (ab′) 2 ADR HSA NP) ;采用玻片凝集试验 ,免疫荧光染色实验确定F(ab′) 2 片段是否结合在毫微粒表面 ;采用花环形成实验 ,花环形成阻断实验 ,扫描电镜分别从光镜、电镜水平观察F(ab′) 2 片段免疫毫微粒是否同人肝癌细胞株SMMC 772 1特异性结合 ;采用MTT比色分析法研究F(ab′) 2 片段免疫毫微粒的体外细胞毒作用 ;采用皮下荷人肝癌裸鼠模型 ,经瘤体注射观察免疫毫微粒的抗人肝癌作用。结果　F (ab′) 2 片段免疫毫微粒圆球状 ,粒径1 2 μm左右 ,免疫荧光染色阳性而ADR HSA NP为阴性 ,提示F (ab′) 2 片段已偶联到ADR HSA NP表面 ;HAb18F(ab′) 2 ADR HSA NP能有效结合于人肝癌细胞株SMMC 772 1,该结合能被HAb18抗体的F(ab′) 2片段阻断 ,未见该免疫毫微粒与对照细胞 (SW 1116)有效结合 ,这些结果提示 ,HAb18F(ab′) 展开更多

关键词 抗体F(ab')2片段 多柔比星 ADR 白蛋白毫微粒 肝癌 载体

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人源抗Trop-2抗体Fab的制备及条件优化 被引量：5

9

作者 王小英 林红 +8 位作者 张慧林 仇金荣 丁贵鹏 唐小军 陈汐敏 唐甜 刘琼琼 冯振卿 朱进 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期35-39,共5页

目的 :探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件。方法 :将含有抗Trop-2 Fab抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F′大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响;比较不同诱... 目的 :探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件。方法 :将含有抗Trop-2 Fab抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F′大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响;比较不同诱导温度、诱导时间及诱导前加入葡萄糖对蛋白表达的影响;大量表达的抗Trop-2 Fab经亲和层析纯化后,用免疫荧光和流式细胞术检测其免疫学特性。结果:在培养液中加入5 g/L的葡萄糖,人源抗Trop-2抗体Fab片段的表达产量明显增加;16℃的诱导温度比其它温度能表达更多的Fab分子;加诱导剂12 h,目的蛋白的表达量至峰值。结论:本实验结果为在原核系统中大量制备抗Trop-2抗体片段及后续的肿瘤靶向治疗提供了基础。 展开更多

关键词 人源抗Trop-2抗体片段 原核表达 免疫学检测

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噬菌体展示技术筛选DNA错配修复蛋白MutS高亲和性抗体

10

作者 刘俊 全智勇 刘建华 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期544-546,共3页

目的制备MutS的高亲和抗体,以有利于MutS的检测及应用。方法利用IPTG的诱导作用,在E.coli中诱导表达目标蛋白MutS。利用亲和层析方法获得目标蛋白,并利用凝胶阻滞实验分析其活性。将MutS作为抗原,在Tomlinson抗体库中利用噬菌体展示技... 目的制备MutS的高亲和抗体,以有利于MutS的检测及应用。方法利用IPTG的诱导作用,在E.coli中诱导表达目标蛋白MutS。利用亲和层析方法获得目标蛋白,并利用凝胶阻滞实验分析其活性。将MutS作为抗原,在Tomlinson抗体库中利用噬菌体展示技术来筛选MutS的高亲和力噬菌粒。将其转化到大肠杆菌后,诱导表达并通过亲和层析的方法来获得可溶性的抗体片段,并检测其亲和力。结果纯化后的MutS具有识别、结合错配DNA双链的活性。ELISA分析表明,利用噬菌体展示技术可获得MutS高亲和力的噬菌粒。将其转化到大肠杆菌HB2151后,诱导表达并纯化到抗体片段,其亲和力为0.9×108L/mol。结论利用噬菌体展示技术筛选到MutS高亲和力的抗体。 展开更多

关键词 噬菌体展示 DNA错配修复蛋白MutS 可溶性抗体片段

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特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建

11

作者 王潇 王秀敏 +3 位作者 管庆丰 滕达 姚军虎 王建华 《中国饲料》 北大核心 2015年第9期19-22,29,共5页

以纯化的重组大肠杆菌外膜蛋白Omp C免疫BALB/c小鼠,提取骨髓浆细胞总RNA,逆转录获得c DNA,作为模板通过PCR扩增获得重链和轻链可变区序列。由(Gly4Ser)3 linker连接两片段,获得单链抗体可变区片段基因库。重叠延伸PCR添加T7启动子、核... 以纯化的重组大肠杆菌外膜蛋白Omp C免疫BALB/c小鼠,提取骨髓浆细胞总RNA,逆转录获得c DNA,作为模板通过PCR扩增获得重链和轻链可变区序列。由(Gly4Ser)3 linker连接两片段,获得单链抗体可变区片段基因库。重叠延伸PCR添加T7启动子、核糖体结合位点、gⅢtether和两端茎环结构等元件,成功构建对外膜蛋白C具有特异性亲和力的单链抗体可变区的核糖体展示文库,为特异性强、亲和力高的单链抗体可变区筛选提供了技术和材料基础。构建能与革兰氏阴性菌外膜蛋白C特异性结合的鼠源单链抗体核糖体展示文库,是奠定构建饲料革兰氏阴性腐败菌分子预警和靶向抗菌剂的靶向定位区的高亲和力单链抗体可变区片段的重要基础,对建立有害革兰氏阴性菌分子检测方法和靶向抗革兰氏阴性菌菌剂设计方法具有借鉴作用。 展开更多

关键词 外膜蛋白C 单链抗体可变区片段 核糖体展示 文库

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新型抗体工程技术

12

作者 李思经 《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第6期23-23,共1页

今年,Celltech公司的主要课题是新型抗体工程技术的研究。目前,公司正在扩展它现有的合同研究和开发服务,包括抗体工程技术如嵌合、互补检测区移植和抗体片段生产。通过抗体工程技术,Celltech公司科学家们一直在进行单克隆抗体“人类化... 今年,Celltech公司的主要课题是新型抗体工程技术的研究。目前,公司正在扩展它现有的合同研究和开发服务,包括抗体工程技术如嵌合、互补检测区移植和抗体片段生产。通过抗体工程技术,Celltech公司科学家们一直在进行单克隆抗体“人类化”以降低免疫系统反抗一代鼠单克隆抗体的趋势。这项技术在提高单克隆抗体的治疗潜力上是一重大进展。 展开更多

关键词 抗体工程技术 单克隆抗体 抗体片段 类化 子里 一本

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销售重组噬菌体抗体系统,加速抗体工程

13

作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第8期8-9,共2页

瑞典 Pharmacia 公司美国法人 Pharmacia P-L Biochemicals 公司与英国 Cambridge AntibodyTechnology 公司共同开发利用噬菌体的抗体片段的克隆化和表达系统"Recombiant Phage Antibo-dy System(RPAS)",年内开始商品化。预... 瑞典 Pharmacia 公司美国法人 Pharmacia P-L Biochemicals 公司与英国 Cambridge AntibodyTechnology 公司共同开发利用噬菌体的抗体片段的克隆化和表达系统"Recombiant Phage Antibo-dy System(RPAS)",年内开始商品化。预计在日本于93年4月开始销售此系统。由于"RPAS"的商品化,大大加速了用利基因重组技术开发抗体。 展开更多

关键词 噬菌体抗体 抗体工程 抗体片段 Pharmacia PHAGE 表达系统 基因重组技术 CAMBRIDGE 重组噬菌体 克隆化

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抗肿瘤的双专一性抗体

14

作者 朱遐 《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第2期22-23,共2页

双专一性抗体是用于生物技术产业,特别是用于治疗肿瘤的可行性技术。最近,三个各自独立的研究小组成功地利用上述抗体在临床前及早期临床研究中治疗肿瘤。 但是,这一技术仍面临许多问题。双专一性抗体像Mab一样,将单个抗原定靶于病变细胞。

关键词 专一性 抗肿瘤 抗体片段 生物技术产业 T细胞抗原 治疗肿瘤 重组蛋白 细胞淋巴瘤 研究人员 抗体治疗

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特异于病毒的抗体在转基因植物中的表达:研究遗传工程病毒抗性的新方法

15

作者 陶冶 《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第5期13-13,共1页

最近几年内,通过在转基因植物体内表达各种病毒基因,已经成功地获得了转基因植物病毒感染的减毒作用。但在某些情况下,该方法可能受到限制,即缺乏广泛的应用性以及与在植物中表达病毒基因有关联的潜在风险。最近Paraskevi Tavladoraki、... 最近几年内,通过在转基因植物体内表达各种病毒基因,已经成功地获得了转基因植物病毒感染的减毒作用。但在某些情况下,该方法可能受到限制,即缺乏广泛的应用性以及与在植物中表达病毒基因有关联的潜在风险。最近Paraskevi Tavladoraki、Eugenio Benvenuto及同事们(ENEA,Rome和Antonio Cattaneo from SISSA,Trieste,Italy)用实验证实了一种选择方法,以减少植物病毒感染(《自然》)(1993),366,469～472)。他们的工作第一次表明,在转基因植物中组成性表达单链Fv(scFv)抗体能够降低感染发病率,并延缓症状发展。scFv抗体能直接抗植物二十面体的菊芋斑皱番茄丛矮病毒(AMCV)。 展开更多

关键词 转基因植物 番茄丛矮病毒 抗体片段 SCFV 病毒感染 病毒基因 组成性表达 减毒作用 二十面体 体内表达

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动物细胞培养及单克隆抗体

16

《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第3期44-48,共5页

关键词 单克隆抗体 杂交瘤细胞 动物细胞培养 免疫原性 麦芽糖结合蛋白 抗原特异性 抗体反应 弗氏不完全佐剂 抗体片段 脾细胞

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应用噬菌体展示随机12肽库筛选诺如病毒抗原模拟表位

17

作者 周飞园 王璐 +6 位作者 梁芷妍 林璧慧 李佳恒 王宇 井多娜 张绪富 戴迎春 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期383-388,共6页

目的:利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库筛选诺如病毒(NoV)的抗原模拟表位。方法:包被与GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ.17型NoV具有高特异性及中和能力较强的单链可变片段抗体(scFv),用Ph.D.-12噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选。ELISA鉴定淘选所得噬菌体与... 目的:利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库筛选诺如病毒(NoV)的抗原模拟表位。方法:包被与GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ.17型NoV具有高特异性及中和能力较强的单链可变片段抗体(scFv),用Ph.D.-12噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选。ELISA鉴定淘选所得噬菌体与scFv的结合活性及其与NoV P蛋白的竞争作用;阳性克隆测序后进行生物信息学分析,合成多肽鉴定其抗原性。结果:发现1段与GⅡ.6 VP1区同源性较高的氨基酸序列“MG-D-W”,综合分析提示其可能为GⅡ.6 NoV的抗原模拟表位,且合成的包含“MG-D-W”的多肽可竞争抑制P蛋白与人类组织血型抗原(HBGAs)受体的结合。结论:“MG-DW”是与NoV单链抗体高亲和力的肽段,可能模拟了GⅡ.6 NoV与scFv结合的抗原表位。 展开更多

关键词 诺如病毒 12肽库 抗原模拟表位 单链可变片段抗体

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采用改进免疫算法的机组组合优化 被引量：19

18

作者 王敏蔚 杨莉 《电网技术》 EI CSCD 北大核心 2010年第8期112-117,共6页

电力系统机组组合问题是一个高维、离散、非线性的工程优化问题。提出了一种改进的免疫算法用于机组组合优化。该算法便于考虑不同类型机组启停的特性,采用抗体片段表示不同的机组组合状态,并构造了由同一机组的抗体片段集合形成的抗体... 电力系统机组组合问题是一个高维、离散、非线性的工程优化问题。提出了一种改进的免疫算法用于机组组合优化。该算法便于考虑不同类型机组启停的特性,采用抗体片段表示不同的机组组合状态,并构造了由同一机组的抗体片段集合形成的抗体片段记忆库,加快了满足抗原匹配要求的抗体的形成速度。在最优解搜索过程中,采用一种考虑亲和度的变异方法,自适应地调整搜索范围。算例表明该方法收敛性好,结果稳定,有较强的实用意义。 展开更多

关键词 机组组合 经济调度 免疫算法 抗体片段

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融合蛋白anti-HER2-ScFv-GFP在昆虫细胞中的表达及其靶向结合乳腺癌细胞的功能分析 被引量：3

19

作者 高国辉 王金丹 +5 位作者 黄奇迪 杨纪峰 杨水兵 包兵兵 张羽 胡孝渠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1034-1040,共7页

目的:利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达获得携带绿色荧光蛋白(GFP)的抗人表皮生长因子受体2(HER2)的单链抗体可变区片段(ScFv),分析其靶向结合乳腺癌细胞表面受体HER2的功能。方法:构建融合基因anti-HER2-ScFv-GFP,重组获得真核表达... 目的:利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达获得携带绿色荧光蛋白(GFP)的抗人表皮生长因子受体2(HER2)的单链抗体可变区片段(ScFv),分析其靶向结合乳腺癌细胞表面受体HER2的功能。方法:构建融合基因anti-HER2-ScFv-GFP,重组获得真核表达载体重组子pFAST Bac-to-Bac HT A/anti-HER2-ScFv-GFP,转化DH10Bac,收集重组病毒bacmid,分别转染、感染粉纹夜蛾细胞Tn-5B1-4,SDS-PAGE及Westernblotting分析融合蛋白表达产物。Ni2+-NTA亲和层析法纯化anti-HER2-ScFv-GFP融合蛋白后分别滴入乳腺癌细胞HER2阳性的SKBR3和HER2阴性的MCF7,对比携带绿色荧光的抗HER2单链抗体靶向结合乳腺癌细胞表面HER2受体情况。结果:获得长度约1 539 bp的融合基因anti-HER2-ScFv-GFP,感染重组病毒的Tn-5B1-4细胞膜附近有明显绿色荧光,SDS-PAGE、Western blotting法检测到60 kD的特异性条带。结合实验显示HER2阳性的SKBR3细胞表面有明显绿色荧光,而HER2阴性的MCF7细胞表面荧光易被洗脱。结论:在Tn-5B1-4中成功表达携带绿色荧光的融合蛋白anti-HER2-ScFv-GFP,该携带绿色荧光的抗HER2单链抗体具有靶向结合乳腺癌细胞表面HER2受体的效能。 展开更多

关键词 抗HER2单链抗体可变区片段 绿色荧光蛋白 融合基因表达

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抗人肝癌mAb HAb18F(ab′)_2半成品的制备与质量控制 被引量：1

20

作者 余晓玲 米力 +1 位作者 陈志南 冯强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期161-163,共3页

目的制备符合人用标准的抗人肝癌mAbHAb18F(ab′)2 片段。方法用胃蛋白酶消化经硫酸铵盐析的腹水抗体 ,然后在快速蛋白液相色谱(FPLC)上用Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化并进行质检。结果经Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化后 ,F(ab′)2 片... 目的制备符合人用标准的抗人肝癌mAbHAb18F(ab′)2 片段。方法用胃蛋白酶消化经硫酸铵盐析的腹水抗体 ,然后在快速蛋白液相色谱(FPLC)上用Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化并进行质检。结果经Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化后 ,F(ab′)2 片段的纯度可达98.8% ;回收率大于50 % ;免疫活性为1∶8000;细菌、热原质检测均呈阴性。结论本制备工艺周期短、易于质控 ,适宜进行中试放大及半成品生产。 展开更多

关键词 抗人肝癌 单克隆抗体 片段抗体 制备 质量控制

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