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胶体金免疫层析法检测猪圆环病毒2型Cap抗体方法的建立及应用 被引量:21
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作者 王慧杰 乔宏兴 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第8期23-25,共3页
关键词 猪圆环病毒2型 胶体金免疫层析法 抗体方法 断奶仔猪多系统衰竭综合征 CAP 应用 检测 PCV-2
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间接ELISA检测猪流感抗体方法的建立及应用 被引量:3
2
作者 孙忠晟 尹燕博 +2 位作者 王平 陈桂来 张思娟 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第1期78-80,共3页
近年来流感病毒已突破宿主限制,猪作为人与禽类流感病毒的中间宿主,更是有着不可忽视的作用,对猪流感病的预防和诊断就具有重要的公共卫生意义。而防治的关键需借助于准确的检测方法,
关键词 ELISA检测 猪流感 抗体方法 应用 间接 流感病毒 公共卫生意义 中间宿主
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单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立
3
作者 张浩 单虎 +5 位作者 吴延功 张守富 吴晓东 王志亮 刘佩兰 朱绍辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第9期16-18,共3页
关键词 猪附红细胞体病 ELISA检测 血清抗体 抗体方法 家畜附红细胞体病 ELISA方法
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A型塞内卡病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:1
4
作者 周函蓉 苏世博 +8 位作者 孙明霞 蒙靓 杨巍 史鑫琪 李鑫 安同庆 蔡雪辉 王海伟 孟凡丹 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1034-1042,共9页
为建立一种快速检测A型塞内卡病毒(SVA)的方法,本研究利用氯化铯密度梯度离心法纯化的SVA粒子免疫BALB/c小鼠3次,采用杂交瘤技术制备SVA单克隆抗体(MAb)。结果显示,共获得7株能够稳定分泌SVA MAb的杂交瘤细胞株。采用过碘酸钠法将其中5... 为建立一种快速检测A型塞内卡病毒(SVA)的方法,本研究利用氯化铯密度梯度离心法纯化的SVA粒子免疫BALB/c小鼠3次,采用杂交瘤技术制备SVA单克隆抗体(MAb)。结果显示,共获得7株能够稳定分泌SVA MAb的杂交瘤细胞株。采用过碘酸钠法将其中5株MAb标记HRP(MAb-HRP),并采用ELISA法检测标记效果。将7株MAb与5株MAb-HRP两两组合进行抗体配对试验。结果显示,5株MAb均标记上HRP,且其中各稀释度标记的MAb 2C8-HRP的反应性均最强;当MAb 2G7作为捕获抗体,MAb 2C8-HRP作为检测抗体时,P/N值最大,表明这两种MAb的配对效果最好。在此基础上,通过优化各反应条件初步建立检测SVA的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。利用建立的DAS-ELISA方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、O型和A型口蹄疫病毒和SVA,结果显示,该方法仅能检测SVA,其他常见的猪源病毒均为阴性结果,表明该方法特异性强。利用本研究建立的DAS-ELISA方法分别检测系列稀释的SVA上清液(1~1:80000,对应的病毒滴度分别为107.5TCID50/mL~1.25×10^(2.5)TCID_(50)/mL)和2倍倍比稀释的SVA猪阳性猪血清(1:2~1:256),同时采用猪塞内卡病毒抗原(SVA-Ag)ELISA试剂盒分别检测上述SVA上清液和SVA猪阳性血清,评估本研究建立DAS-ELISA方法的敏感性。结果显示SVA稀释40000倍后,其OD450nm值仍大于临界值0.115,即该方法对SVA上清液的检测限为2.5×10^(2.5)TCID_(50)/mL,且1:64倍稀释的SVA猪阳性血清样品仍为阳性;(SVA-Ag)ELISA结果显示,该方法检测的SVA最大稀释度为1:20000,即对SVA上清液的检测限为5×10^(2.5)TCID_(50)/mL,且仅能检测到稀释至32倍的SVA猪阳性血清,均低于本实验建立的DAS-ELISA方法,表明该方法敏感性高。对4份SVA猪阳性血清和1份SVA猪阴性血清采用DAS-ELISA方法进行批内和批间重复性试验,结果显示批间和批内重复性试验的变异系数均在10%以下,重复性较好。对采集的205份疑似SVA感染的猪扁桃体组织、鼻咽拭子及血清样品分别采用DAS-ELISA及RT-PCR方法检测。DAS-ELISA的检测结果显示,36份样品为阳性,169份样品为阴性;RT-PCR检测结果显示,50份样品为阳性,155份样品为阴性。经计算两种方法的阳性符合率为72%(36/50),总符合率为93%(191/205)。以上结果表明,本研究建立的DAS-ELISA适用于大规模多种临床样品的检测,为SVA的检测及流行病学调查提供技术支撑。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 单克隆抗体 抗体夹心ELISA方法
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吸收放散试验及抗体增强方法在ABO疑难血型鉴定中的应用 被引量:40
5
作者 张勇萍 安宁 +4 位作者 杨世明 崔颖 陈洁 焦琴 穆士杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1138-1141,共4页
目的探讨吸收放散试验及抗体增强方法在ABO血型抗原减弱和血清抗体效价降低及高效价冷凝集素引起疑难血型鉴定中应用的可行性。方法对30例ABO血型正反定型不相符的血标本,采用不规则抗体筛选、抗体增强方法、吸收放散试验及直接抗人球... 目的探讨吸收放散试验及抗体增强方法在ABO血型抗原减弱和血清抗体效价降低及高效价冷凝集素引起疑难血型鉴定中应用的可行性。方法对30例ABO血型正反定型不相符的血标本,采用不规则抗体筛选、抗体增强方法、吸收放散试验及直接抗人球蛋白试验,观察患者血型抗原及血清中抗体的检出情况。结果 30例患者不规则抗体筛选和直接抗人球蛋白试验阴性,被患者红细胞吸收后的人源抗A或抗B血清效价有所降低;患者红细胞放散液与A型或B型试剂红细胞出现预期的血型抗原抗体反应,凝集强度由常规方法的混合外观凝集(MF)~1+增加到吸收放散试验及抗体增强方法的1+~3+,ABO血型正反定型相符。结论吸收放散试验能起到浓缩血清及初步纯化抗体的作用,抗体增强方法可增加低效价血清抗体的凝集强度,在输血相容性检测中联合应用ABO正反定型、吸收放散试验及抗体增强方法,可准确鉴定ABO疑难血型及解决部分交叉配血不合的问题。 展开更多
关键词 抗原抗体减弱 冷凝集素 ABO疑难血型 吸收放散试验 抗体增强方法
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脑囊虫病抗体检测方法研究进展 被引量:2
6
作者 赵光辉 张改平 +6 位作者 宁长申 王选年 张龙现 菅复春 段艳华 李娜 张敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期738-742,共5页
囊虫病是由猪带绦虫幼虫——猪囊虫引起的一种重要的人畜共患病。猪囊虫可寄生于猪、野猪、人、骆驼、猫等动物的肌肉、大脑、皮下和跟部等多个器官等,能引起不同程度的发病。仔猪患该病后发育不良,肉品质下降。人感染囊虫会引起不同... 囊虫病是由猪带绦虫幼虫——猪囊虫引起的一种重要的人畜共患病。猪囊虫可寄生于猪、野猪、人、骆驼、猫等动物的肌肉、大脑、皮下和跟部等多个器官等,能引起不同程度的发病。仔猪患该病后发育不良,肉品质下降。人感染囊虫会引起不同部位的病变,其中最为严重的是脑囊虫病,它主要是由于人摄入猪带绦虫虫卵或猪带绦虫病患者自体感染所致。脑囊虫病的主要临床症状是癫痫、头痛和神经紊乱,愈后易留下癫痫、脑积水和痴呆等后遗症。该病流行范围甚广,呈世界性分布,除因宗教信仰而禁食猪肉的国家和民族以外, 展开更多
关键词 囊虫病 抗体检测方法 大脑 猪带绦虫 人畜共患病 猪囊虫 发育不良 临床症状
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猪传染性胃肠炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:9
7
作者 屈月 葛俊伟 +4 位作者 唐丽杰 乔薪瑗 姜艳平 尹光昕 李一经 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期364-368,共5页
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速检测方法,本研究以抗TGEV N蛋白单克隆抗体(MAb)为包被抗体,纯化的抗TGEV N蛋白多克隆抗体(PcAb)为检测抗体建立了TGEV双抗体夹心ELISA方法,优化其反应条件为:抗TGEV N蛋白MAb包被浓度为0.4μg/mL,... 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速检测方法,本研究以抗TGEV N蛋白单克隆抗体(MAb)为包被抗体,纯化的抗TGEV N蛋白多克隆抗体(PcAb)为检测抗体建立了TGEV双抗体夹心ELISA方法,优化其反应条件为:抗TGEV N蛋白MAb包被浓度为0.4μg/mL,抗TGEV N蛋白PcAb和酶标二抗的工作浓度分别为3.5μg/mL和1∶5 000,以P/N>2,同时OD490nm≥0.316作为阳性判定标准。该ELISA的重复性变异系数小于10%,与猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪轮状病毒等无交叉反应。对22份临床猪粪便样品RT-PCR的阳性检出率为31.8%;ELISA的阳性检出率为22.7%,二者符合率达81.8%,结果表明本研究建立的双抗体夹心ELISA方法检测TGEV具有较高的特异性和敏感性,可以用于TGEV的病原学检测。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 单克隆抗体 高免血清 抗体夹心ELISA方法
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水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨 被引量:7
8
作者 朱燕秋 张济培 +4 位作者 谢海燕 杨德胜 陈建红 郑建波 司兴奎 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期42-43,共2页
关键词 《高致病性禽流感诊断技术》 HI抗体水平 抗体检测方法 水禽 国家质量监督检验检疫总局 血凝抑制试验 疫苗免疫 鸡红细胞
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奶牛布鲁菌病奶液抗体检测方法的初步应用 被引量:1
9
作者 李彦伟 刘晓民 +3 位作者 高明春 王倩 张文龙 王君伟 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第3期15-16,共2页
布鲁菌病(以下简称布病)目前在国内一些地区广泛流行,不但影响畜牧业的健康发展,也严重威胁人类健康。布鲁菌感染奶牛的主要症状是网状内皮系统和妊娠期细胞的炎症反应,通常会导致妊娠5至7个月的奶牛胎儿流产和死亡,伴随着流产,大量... 布鲁菌病(以下简称布病)目前在国内一些地区广泛流行,不但影响畜牧业的健康发展,也严重威胁人类健康。布鲁菌感染奶牛的主要症状是网状内皮系统和妊娠期细胞的炎症反应,通常会导致妊娠5至7个月的奶牛胎儿流产和死亡,伴随着流产,大量的布鲁菌会被排出,继而感染同群动物中的其他个体。 展开更多
关键词 布鲁菌 抗体检测方法 奶牛 应用 奶液 人类健康 炎症反应 妊娠期
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弓形虫感染间接荧光抗体检测方法的建立 被引量:2
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作者 卢致民 王燕 +1 位作者 孙希萌 索勋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期33-35,99,共3页
弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,寄生于人和多种动物的有核细胞内,引起人兽共患的弓形虫病。弓形虫呈世界性分布,估计全世界至少有1/3的人感染弓形虫,中国人群平均感染率为7.88%,并呈逐年上升趋势。正常人感染后多呈带虫状态而不发病,... 弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,寄生于人和多种动物的有核细胞内,引起人兽共患的弓形虫病。弓形虫呈世界性分布,估计全世界至少有1/3的人感染弓形虫,中国人群平均感染率为7.88%,并呈逐年上升趋势。正常人感染后多呈带虫状态而不发病,当机体免疫功能受损或低下时可出现弓形虫性脑炎等致死性病变,而先天性弓形虫感染可导致流产、早产、畸胎、死胎等,因此,弓形虫病的诊断和治疗显得十分重要。弓形虫病的诊断当以病原学检查为依据,但病原体的检测费时且不易成功, 展开更多
关键词 弓形虫感染 抗体检测方法 间接荧光 弓形虫病 机体免疫功能 寄生原虫 病原学检查 人兽共患
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检测禽副粘病毒2型抗原的双抗体夹心ELISA方法的研究 被引量:3
11
作者 张国中 赵继勋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期474-476,共3页
以禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )群特异性单抗 7E5为基础建立了检测PMV_2抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对Yucaipa病毒的最低检出量为 1.6 96 2 μg/ml,对PMV_2不同形式病毒及各分离株也都有很好的检出率。用Yucaipa病毒尿囊液人工感... 以禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )群特异性单抗 7E5为基础建立了检测PMV_2抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对Yucaipa病毒的最低检出量为 1.6 96 2 μg/ml,对PMV_2不同形式病毒及各分离株也都有很好的检出率。用Yucaipa病毒尿囊液人工感染 10日龄SPF鸡 ,于感染后不同时间采集心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、气管等病科及泄殖腔拭子 ,经处理后用建立的方法进行检测 ,结果表明PMV_2病毒在感染鸡的法氏囊组织内大量存在 ,感染后 3天就可从法氏囊组织内检测到PMV_2病毒 ,粪便中仅个别有检出阳性者。 展开更多
关键词 抗体夹心ELISA方法 禽副粘病毒2型 单克隆抗体 抗原检测
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传染性胰坏死病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:5
12
作者 张琳琳 连科迅 +7 位作者 张英 蒋烨 姜艳萍 崔文 乔薪瑗 唐丽杰 李一经 刘敏 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第4期57-62,72,共7页
以纯化的兔抗传染性胰坏死病病毒(IPNV)VP2重组蛋白多克隆抗体为包被抗体,抗IPNV VP2单克隆抗体为检测抗体建立了IPNV双抗体夹心ELISA方法。优化反应条件为:兔抗IPNV VP2重组蛋白多克隆抗体包被浓度为1.28μg/mL,抗IPNV VP2单克隆抗体... 以纯化的兔抗传染性胰坏死病病毒(IPNV)VP2重组蛋白多克隆抗体为包被抗体,抗IPNV VP2单克隆抗体为检测抗体建立了IPNV双抗体夹心ELISA方法。优化反应条件为:兔抗IPNV VP2重组蛋白多克隆抗体包被浓度为1.28μg/mL,抗IPNV VP2单克隆抗体的工作浓度为1.34μg/mL,酶标二抗稀释比例为1∶2 000,以P/N>2,且OD490 nm>0.101 494作为阳性判定标准。该方法的重复性变异系数均小于10%,与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血败血症病毒(VHSV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、轮状病毒(HRV)无交叉反应。对41份虹鳟肝脏样品分别进行双抗体夹心ELISA和RT-PCR检测,结果双抗体夹心法与RT-PCR法检测符合率为97%,表明本实验建立的双抗体夹心ELISA检测方法检测IPNV具有较高的敏感性和特异性,可用于IPNV的病原学检测。 展开更多
关键词 传染性胰坏死病毒 抗体夹心ELISA检测方法 单克隆抗体 兔抗血清
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猪链球菌2型ELISA抗体检测方法的建立及应用 被引量:7
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作者 张安定 金梅林 +5 位作者 郑培 喻正军 涂家刚 方兵兵 吴斌 陈焕春 《养殖与饲料》 2005年第10期19-21,共3页
猪链球菌按照荚膜多糖抗原的不同可分成35个荚膜血清型,提纯猪2型链球菌荚膜多糖抗原包被酶标板,建立了检测猪2型链球菌血清抗体的间接ELISA检测方法,并将该方法应用于四川省2005年夏季猪血清流行病学调查和2005年上半年湖北、河南、湖... 猪链球菌按照荚膜多糖抗原的不同可分成35个荚膜血清型,提纯猪2型链球菌荚膜多糖抗原包被酶标板,建立了检测猪2型链球菌血清抗体的间接ELISA检测方法,并将该方法应用于四川省2005年夏季猪血清流行病学调查和2005年上半年湖北、河南、湖南三省的猪血清流行病学调查。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 ELISA检测 抗体检测方法 方法应用 流行病学调查 荚膜多糖 血清抗体 猪血清 血清型
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两种猪瘟抗体检测方法的应用比较 被引量:2
14
作者 郑教雀 《养猪》 2014年第2期94-95,共2页
我国是生猪生产与猪肉消费大国,多年来一直采取预防为主的防制方针,一定程度上降低了猪瘟的感染率与发病率,但在扩大疫苗接种面积、提高防疫密度、增加免疫剂量和免疫次数的情况下,并没有使猪瘟得到彻底控制。它的流行一直阻碍着我... 我国是生猪生产与猪肉消费大国,多年来一直采取预防为主的防制方针,一定程度上降低了猪瘟的感染率与发病率,但在扩大疫苗接种面积、提高防疫密度、增加免疫剂量和免疫次数的情况下,并没有使猪瘟得到彻底控制。它的流行一直阻碍着我国养猪业健康发展,造成巨大的人力和资源浪费。 展开更多
关键词 抗体检测方法 猪瘟 应用 生猪生产 疫苗接种 防疫密度 免疫次数 免疫剂量
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O型口蹄疫免疫效果抗体监测方法比较
15
作者 王芳 张彦昌 +2 位作者 栗勇 刘艳莉 董晓坤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期39-40,共2页
O型口蹄疫是世界上危害最严重的家畜传染病之一,感染所有的偶蹄动物,对养殖业构成严重威胁,可造成严重的经济损失和国际畜产品贸易的负面影响。农业部将其列为强制免疫动物疫病病种。免疫抗体效价检测是科学评价免疫质量的有效手段... O型口蹄疫是世界上危害最严重的家畜传染病之一,感染所有的偶蹄动物,对养殖业构成严重威胁,可造成严重的经济损失和国际畜产品贸易的负面影响。农业部将其列为强制免疫动物疫病病种。免疫抗体效价检测是科学评价免疫质量的有效手段,其抗体检测方法很多, 展开更多
关键词 O型口蹄疫 免疫抗体 监测方法 免疫效果 家畜传染病 抗体检测方法 偶蹄动物 产品贸易
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鸡传染性法氏囊病病毒抗体快速检测方法的研究
16
作者 翟新国 辛颜彬 《中国家禽》 北大核心 2001年第19期12-13,共2页
采用Vero细胞繁殖鸡法氏囊病毒(Infections Bursal Disease Virus,IBDV),并用PEG方法提纯病毒制备抗原。应用抗鸡血清IgG重链单克隆抗体酶标结合物作为第二抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸡血清中的法氏囊病毒抗... 采用Vero细胞繁殖鸡法氏囊病毒(Infections Bursal Disease Virus,IBDV),并用PEG方法提纯病毒制备抗原。应用抗鸡血清IgG重链单克隆抗体酶标结合物作为第二抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸡血清中的法氏囊病毒抗体,较好地克服了非特异反应问题,该方法简便、快速和特异性好,有较大的推广应用价值。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 抗体检测方法 抗体夹心ELISA
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猪伪狂犬病三种不同血清抗体检测方法的比较 被引量:1
17
作者 冼琼珍 黄良宗 王淑敏 《上海畜牧兽医通讯》 2007年第1期35-35,共1页
关键词 猪伪狂犬病 血清学检测 抗体检测方法 琼脂免疫扩散试验 酶联免疫吸附试验 间接血凝抑制试验 急性传染病 病毒分离鉴定
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二种狂犬病抗体检测方法的应用比较
18
作者 金颜辉 夏晓红 +4 位作者 杨佳 吴波平 许先明 林芬 黄雁 《福建畜牧兽医》 2011年第5期23-24,共2页
狂犬病又称"疯狗病",早在公元前四世纪即有记载,狂犬病在我国大部分地区也曾发生和流行过,造成很大的经济损失。狂犬病病毒属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus),
关键词 狂犬病病毒 抗体检测方法 应用 经济损失 弹状病毒 狗病
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猪瘟病毒化学发光抗体检测方法的建立与应用 被引量:7
19
作者 麻园 石正旺 +9 位作者 罗俊聪 杨波 王丽娟 万颖 宋锐 曹丽艳 周改静 田宏 郑海学 陈轶霞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1744-1752,共9页
旨在建立猪瘟病毒(CSFV)化学发光抗体检测方法,本研究以CSFV E2蛋白作为包被抗原,山羊抗猪IgG-HRP抗体作为酶标抗体,鲁米诺为底物溶液,优化检测方法,成功建立CSFV化学发光抗体检测方法。该方法能在室温20 min内完成对CSFV抗体血清特异... 旨在建立猪瘟病毒(CSFV)化学发光抗体检测方法,本研究以CSFV E2蛋白作为包被抗原,山羊抗猪IgG-HRP抗体作为酶标抗体,鲁米诺为底物溶液,优化检测方法,成功建立CSFV化学发光抗体检测方法。该方法能在室温20 min内完成对CSFV抗体血清特异性检测,灵敏度与商品化CSFV抗体检测试剂盒相当,且与A型口蹄疫病毒、O型口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、塞内卡病毒、非洲猪瘟病毒抗体阳性血清均无交叉反应;批内变异系数为1.80%~6.88%,批间变异系数为1.11%~9.18%,重复性好。通过对152份田间猪血清样品的检测并与商品化CSFV抗体检测试剂盒检测结果进行比较,其Kappa值为0.929,具有高度的一致性。综上表明,本研究建立的CSFV化学发光抗体检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好、简单快速,可应用于临床血清CSFV抗体的检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 化学发光 抗体检测方法
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猪伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA抗体检测方法的建立 被引量:3
20
作者 袁梦 常巍 +3 位作者 杨世丽 周海欧 李翠婷 马燕梅 《江西农业学报》 CAS 2022年第8期114-121,共8页
为了制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白gE的单克隆抗体并制备竞争ELISA猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒,以原核表达系统表达PRV FA株囊膜蛋白gE的主要抗原表位区段(aa52~aa238)的His标签,获得了融合蛋白gE-6×His;将gE-6×His纯... 为了制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白gE的单克隆抗体并制备竞争ELISA猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒,以原核表达系统表达PRV FA株囊膜蛋白gE的主要抗原表位区段(aa52~aa238)的His标签,获得了融合蛋白gE-6×His;将gE-6×His纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾脏制备脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0),进行细胞融合,以感染PRV的PK15细胞的蛋白为样本检测抗体,使用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞系,获得了2株稳定分泌抗PRV gE单克隆抗体的杂交瘤细胞系。结果显示:制备的抗体特异性好,效价为1∶5120;以单克隆抗体为检测抗体建立的竞争ELISA抗体检测方法灵敏、特异。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gE蛋白 单克隆抗体 竞争ELISA抗体检测方法
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