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单克隆抗体介导对细粒棘球蚴原头节细胞毒作用的体外试验
被引量：
1
1
作者
刘金明
陈燕军
+2 位作者
陈德华
顾惠明
王爱华
《中国兽医寄生虫病》
1993年第4期29-31,共3页
用抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)试验在体外观察了单克隆抗体对细粒棘球蚴原头节的杀伤作用。原头节在1C_2、2E_3、3E_8、3F_(10)、3C_2 5株单抗浓缩上清(1:5)及嗜酸性粒细胞存在情况下培养40小时,发育抑制率分别为100％,100％,100...
用抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)试验在体外观察了单克隆抗体对细粒棘球蚴原头节的杀伤作用。原头节在1C_2、2E_3、3E_8、3F_(10)、3C_2 5株单抗浓缩上清(1:5)及嗜酸性粒细胞存在情况下培养40小时,发育抑制率分别为100％,100％,100％,100％,57％;死亡率分别为100％,100％,100％,96％和14％。这一结果显示我们所获单抗中部分具有较强保护性,为寻求保护性抗原提供了线索,同时表明ADCC是宿主获得性抵抗力的重要组成部分。
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关键词
单克隆
抗体
细粒棘球蚴
原头节
细胞
毒作用
体外试验
抗体依赖性细胞介导
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职称材料
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
被引量：
3
2
作者
刘传苗
刘明珠
+3 位作者
黄艳平
储菲
李永海
李正红
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期401-407,共7页
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯...
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响。结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关。结论制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞。
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关键词
c-Met
单链
抗体
(scFv)
A549
细胞
靶向性
补体
依赖
的
细胞
毒性(CDC)
抗体依赖性细胞介导
的
细胞
毒作用(ADCC)
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职称材料
K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
3
作者
叶琳洁
黄庆生
+4 位作者
李琦
张明杰
马旭东
杨慧
师俊玲
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期537-542,共6页
目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合I...
目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。
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关键词
自然杀伤
细胞
细胞
毒活性
抗体依赖性细胞介导
的
细胞
毒活性
体外扩增
活化性受体
抑制性受体
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职称材料
题名
单克隆抗体介导对细粒棘球蚴原头节细胞毒作用的体外试验
被引量：
1
1
作者
刘金明
陈燕军
陈德华
顾惠明
王爱华
机构
中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所
出处
《中国兽医寄生虫病》
1993年第4期29-31,共3页
基金
国家青年自然科学基金
"八五"攻关资助
文摘
用抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)试验在体外观察了单克隆抗体对细粒棘球蚴原头节的杀伤作用。原头节在1C_2、2E_3、3E_8、3F_(10)、3C_2 5株单抗浓缩上清(1:5)及嗜酸性粒细胞存在情况下培养40小时,发育抑制率分别为100％,100％,100％,100％,57％;死亡率分别为100％,100％,100％,96％和14％。这一结果显示我们所获单抗中部分具有较强保护性,为寻求保护性抗原提供了线索,同时表明ADCC是宿主获得性抵抗力的重要组成部分。
关键词
单克隆
抗体
细粒棘球蚴
原头节
细胞
毒作用
体外试验
抗体依赖性细胞介导
Keywords
Echinococcus granulosus protoscolex ADCC Monoclonal antibody
分类号
S852.73 [农业科学—基础兽医学]
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
被引量：
3
2
作者
刘传苗
刘明珠
黄艳平
储菲
李永海
李正红
机构
蚌埠医学院第一附属医院感染科
蚌埠医学院科研中心生理学实验室
蚌埠医学院第一附属医院药剂科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期401-407,共7页
基金
国家自然科学基金(81472656)
安徽省教育厅自然科学基金重点项目(KJ2017A247)
蚌埠医学院研究生科研创新项目(Byycx1634)
文摘
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响。结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关。结论制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞。
关键词
c-Met
单链
抗体
(scFv)
A549
细胞
靶向性
补体
依赖
的
细胞
毒性(CDC)
抗体依赖性细胞介导
的
细胞
毒作用(ADCC)
Keywords
c-Met
scFv
A549 cells
targeting
complement-dependent cytotoxicity（CDC）
antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity（ADCC）
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
3
作者
叶琳洁
黄庆生
李琦
张明杰
马旭东
杨慧
师俊玲
机构
西北工业大学生命学院陕西省空间生物实验模拟技术重点学科实验室
福建医科大学附属漳州市医院血液科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期537-542,共6页
基金
陕西省自然科学基金资助项目(No.2014JM4171)~~
文摘
目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。
关键词
自然杀伤
细胞
细胞
毒活性
抗体依赖性细胞介导
的
细胞
毒活性
体外扩增
活化性受体
抑制性受体
Keywords
natural killer cell（NK cell）
cytotoxicity
antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity（ADCC）
ex vivo expansion
activation receptor
inhibitive receptors
分类号
R730.3 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单克隆抗体介导对细粒棘球蚴原头节细胞毒作用的体外试验
刘金明
陈燕军
陈德华
顾惠明
王爱华
《中国兽医寄生虫病》
1993
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
刘传苗
刘明珠
黄艳平
储菲
李永海
李正红
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
叶琳洁
黄庆生
李琦
张明杰
马旭东
杨慧
师俊玲
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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