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抗人卵巢癌×抗人CD3双特异性单链抗体的构建、表达及复性研究被引量：3: 1; 作者方敏赵瑞 +4 位作者李骅蒋欣尹长城林晴黄华 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第11期47-50,共4页; 构建了抗人卵巢癌×抗人CD3双特异性单链抗体 (scBsAb) ,在大肠杆菌中得到表达。用稀释复性 ,缓慢透析复性和凝胶过滤层析复性三种方法对scBsAb表达形成的包涵体进行复性研究表明 ,凝胶过滤层析复性能有效抑制蛋白的聚集。ELISA检... 展开更多; 关键词抗人卵巢癌抗人cd3 双特异性单链抗体包涵体复性基因表达肿瘤免疫治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体介导的αβT细胞CDR3谱系漂移被引量：4: 2; 作者罗微温茜 +1 位作者周明乾马骊《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期919-923,共5页; 目的探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础。方法采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的... 展开更多; 关键词双特异性抗体抗人卵巢癌/抗人cd3单链双特异性抗体 T细胞受体互补决定区3 基因扫描; 在线阅读下载PDF 职称材料

细胞融合法制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体被引量：1: 3; 作者苏瑾张亚莉 +2 位作者郭志兵车小燕王小宁《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期902-905,共4页; 目的制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体(Bispecificantibody,BsAb)的细胞株,并对建株的杂交-杂交瘤的稳定性及活性进行鉴定。方法将抗人CD3单克隆抗体细胞株采用8-AG诱变成HAT敏感杂交瘤细胞株,再通过FuGENETM6转染含neo基因质粒pCDa... 展开更多; 关键词双特异性抗体细胞融合抗人cd3抗体抗人IgMμ链抗体杂交-杂交瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建: 4; 作者杨治华李以莞 +6 位作者沈德诚田海梅刘向阳刘宝印李洁段世利佘鸣《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期108-113,共6页; 为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性,增加其在人体内的生物活性及治疗作用,使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病.本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆... 展开更多; 关键词抗人cd3 嵌合抗体基因肿瘤治疗抗cd3单抗人体内重链可变区 DNA 表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人CD3人/鼠嵌合抗体的表达及特性: 5; 作者杨治华刘向阳 +4 位作者田海梅李洁李以莞沈德诚佘鸣《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期114-119,共6页; 将从HIT3a基因库分离克隆的功能性抗CD3轻重链可变区基因插入含有人κ轻链γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中,构建了抗CD3嵌合抗体基因.用Lipofectin将抗CD3人/鼠嵌合轻重链基因共转染SP2/O细胞表达,获得稳定传代和稳定表达抗CD3... 展开更多; 关键词嵌合抗体 cd3单抗抗C 表达载体抗人cd3 杀伤活性 IL-2 分离克隆重链可变区哺乳动物; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定: 6; 作者武国军王禾 +5 位作者王栋于磊王智袁建林张波药立波《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期545-548,共4页; 目的　将抗人CD3单链抗体 (scFv) /人 p5 3四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞 ,进行真核表达和活性测定。方法　将抗人CD3scFv /人 p5 3四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,转染HeLa细胞进行表达 ,表达产物纯化... 展开更多; 关键词 SCFV 抗人cd3单链抗体基因 HELA细胞 T细胞抗原受体 TCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源性CD3抗体诱导食蟹猴T淋巴细胞培养方法的建立: 7; 作者缪怡董坚 +4 位作者角德灵宋倩高嫦娥赵恒孟小琴《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期407-413,共7页; 目的:在初步分析人、食蟹猴和猪CD3蛋白同源性的基础上,建立利用人源性CD3抗体诱导食蟹猴外周血T淋巴细胞的体外分离培养技术。方法:从NCBI查询获取人类、食蟹猴和猪CD3蛋白各自的氨基酸序列,并用DNAMAN软件进行序列比对、同源性分析和... 展开更多; 关键词同源性抗人cd3抗体 T淋巴细胞食蟹猴诱导培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人卵巢癌×抗人CD3双特异性单链抗体的构建、表达及复性研究被引量：3: 1; 作者方敏赵瑞李骅蒋欣尹长城林晴黄华; 机构中国科学院遗传与发育生物学研究所西北农林科技大学生命科学院; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第11期47-50,共4页; 基金 863计划 (863 10 2 0 9 0 4 0 1)资助项目; 文摘构建了抗人卵巢癌×抗人CD3双特异性单链抗体 (scBsAb) ,在大肠杆菌中得到表达。用稀释复性 ,缓慢透析复性和凝胶过滤层析复性三种方法对scBsAb表达形成的包涵体进行复性研究表明 ,凝胶过滤层析复性能有效抑制蛋白的聚集。ELISA检测显示 ,复性后的scBsAb具有较高活性 ,能与相应抗原特异结合。; 关键词抗人卵巢癌抗人cd3 双特异性单链抗体包涵体复性基因表达肿瘤免疫治疗; Keywords Single chain antibody, Bispecific antibody, Inclusion body, Refolding, Expression; 分类号 R737.31 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体介导的αβT细胞CDR3谱系漂移被引量：4: 2; 作者罗微温茜周明乾马骊; 机构南方医科大学生物技术学院分子免疫学研究所; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期919-923,共5页; 基金国家自然科学基金(81171539 30972680) +1 种基金高等学校博士学科点专项科研基金(20114433110002)~~; 文摘目的探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础。方法采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的TCR库多样性变化(CDR3谱型分布特征)及刺激后T细胞TCRα、β链CDR3优势利用情况,对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析。结果刺激前6例正常献血员TCR CDR3谱型均呈高斯分布,刺激后发生CDR3谱系漂移,部分TCR Vα、Vβ家族出现优势增生,明确了BHL-1介导下单克隆增生T细胞的α、β链CDR3序列。结论 SKOV3联合BHL-1诱导的T细胞CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达可能与BHL-1介导的特异性T细胞免疫反应有关,特异应答T细胞TCR CDR3序列的确定,将为卵巢癌的T细胞免疫治疗提供基础。; 关键词双特异性抗体抗人卵巢癌/抗人cd3单链双特异性抗体 T细胞受体互补决定区3 基因扫描; Keywords bispecific antibody BHL-1 T cell receptors complementarity-determining region 3 genescan; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细胞融合法制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体被引量：1: 3; 作者苏瑾张亚莉郭志兵车小燕王小宁; 机构第一军医大学南方医院呼吸科第一军医大学分子免疫研究所; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期902-905,共4页; 基金全军九五医学科研基金(98M069) 广东省卫生厅医学科研基金(A1998314)。; 文摘目的制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体(Bispecificantibody,BsAb)的细胞株,并对建株的杂交-杂交瘤的稳定性及活性进行鉴定。方法将抗人CD3单克隆抗体细胞株采用8-AG诱变成HAT敏感杂交瘤细胞株,再通过FuGENETM6转染含neo基因质粒pCDaA3,制备成具有双标记杂交瘤αCD3HATS G418R亚系,与抗人IgMμ链单克隆抗体细胞株融合,通过ELISA法及流式细胞仪筛选,制备分泌BsAb的细胞株。结果融合6次,共接种1080孔,共得5株抗CD3-抗IgM杂交-杂交瘤。经亚克隆后,其中2株体外连续传代培养2月仍保持良好的分泌BsAb功能。结论采取细胞融合法可成功制备分泌BsAb的杂交-杂交瘤,其稳定性及效价与亲本杂交瘤相似。; 关键词双特异性抗体细胞融合抗人cd3抗体抗人IgMμ链抗体杂交-杂交瘤; Keywords bispecificantibody cellfusion anti-cd3antibody anti-IgMμchainantibody hybridhybridoma; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建: 4; 作者杨治华李以莞沈德诚田海梅刘向阳刘宝印李洁段世利佘鸣; 机构中国医学科学院肿瘤研究所中国医学科学院血液学研究所; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期108-113,共6页; 文摘为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性,增加其在人体内的生物活性及治疗作用,使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病.本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆了抗体的轻重链可变区基因的cDNA.以此轻重链可变区cDNA为特异探针从HIT3a基因文库中分离带有调控序列的功能性轻重链可变区基因;并将其插入到含有人κ轻链及人γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中成功地构建了抗人CD3人/鼠轻重链嵌合抗体基因,为研制人抗CD3人/鼠嵌合抗体完成了关键性的第一步.; 关键词抗人cd3 嵌合抗体基因肿瘤治疗抗cd3单抗人体内重链可变区 DNA 表达载体; Keywords anti-cd3 antibody polymerase chain reaction(PCR) gene library gene cloning chimeric antibody gene; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学] R737.32 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人CD3人/鼠嵌合抗体的表达及特性: 5; 作者杨治华刘向阳田海梅李洁李以莞沈德诚佘鸣; 机构中国医学科学院肿瘤研究所中国医科学学院血液学研究所; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期114-119,共6页; 文摘将从HIT3a基因库分离克隆的功能性抗CD3轻重链可变区基因插入含有人κ轻链γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中,构建了抗CD3嵌合抗体基因.用Lipofectin将抗CD3人/鼠嵌合轻重链基因共转染SP2/O细胞表达,获得稳定传代和稳定表达抗CD3嵌合抗体的转染杂交瘤细胞株C-HIT3a.ELISA、免疫荧光和PCR实验证实嵌合抗体与原鼠CD3单抗有相同的特异性和亲和性.体外生物活性的初步分析表明嵌合抗体与鼠CD3单抗对人的PBMC细胞的增殖有相同类型的作用.高剂量抗体抑制人T细胞的增殖,低剂量显示明显的激活增殖作用.当与IL-2联合应用其激活增殖作用增加20倍.细胞毒实验表明嵌合CD3抗体或由该抗体介导的免疫活性细胞(CD3-AK)对多种肿瘤细胞有明显的杀伤活性,较单用IL-2或单用LAK细胞其杀伤活性增加25倍.; 关键词嵌合抗体 cd3单抗抗C 表达载体抗人cd3 杀伤活性 IL-2 分离克隆重链可变区哺乳动物; Keywords chimeric antibody anti-cd3 antibody cytotoxicity; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学] R737 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定: 6; 作者武国军王禾王栋于磊王智袁建林张波药立波; 机构第四军医大学西京医院泌尿外科第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期545-548,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目 (No.3990 0 1 80 ); 文摘目的　将抗人CD3单链抗体 (scFv) /人 p5 3四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞 ,进行真核表达和活性测定。方法　将抗人CD3scFv /人 p5 3四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,转染HeLa细胞进行表达 ,表达产物纯化后利用流式细胞仪进行活性测定。结果　表达产物经SDS PAGE和Westernblot证实 ,为Mr约35 0 0 0的特异蛋白条带。纯化后经流式细胞仪检测 ,可特异性地结合人外周血单个核细胞 (PBMCs) ,亲和力高于scFv。结论　获得了可与PBMCs特异性结合的抗人CD3scFv四聚体。; 关键词 SCFV 抗人cd3单链抗体基因 HELA细胞 T细胞抗原受体 TCR; Keywords cd3 single chain antibody gene expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源性CD3抗体诱导食蟹猴T淋巴细胞培养方法的建立: 7; 作者缪怡董坚角德灵宋倩高嫦娥赵恒孟小琴; 机构昆明医科大学第三附属医院云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南农业大学生物资源保护与利用重点实验室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期407-413,共7页; 基金云南省科技计划项目重大项目资助(No.2016FC007) 云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室资助(No.2015DG034)~~; 文摘目的:在初步分析人、食蟹猴和猪CD3蛋白同源性的基础上,建立利用人源性CD3抗体诱导食蟹猴外周血T淋巴细胞的体外分离培养技术。方法:从NCBI查询获取人类、食蟹猴和猪CD3蛋白各自的氨基酸序列,并用DNAMAN软件进行序列比对、同源性分析和构建系统进化树。Western blotting检测三种T细胞膜上CD3蛋白的表达水平。分离健康食蟹猴PBMC,分为3组,A组加入抗人CD3抗体单刺激、B组加入IL-2单刺激、C组加入抗人CD3抗体和IL-2共刺激。倒置显微镜下观察细胞生长状态并计数,绘制细胞生长曲线,锥虫蓝染色检测细胞活性,流式细胞术检测T细胞表面标志物CD3、CD4、CD8的表达。结果:食蟹猴、猪的CD3蛋白氨基酸序列与人类的同源性分别为86.9%、65.6%,T细胞膜上CD3蛋白的表达量分别为人的79%、17%。A组细胞不增殖;C组细胞增殖能力、细胞活性及CD3表达率[(93.8±3.6)%vs(70.3±4.7)%,P<0.01]均显著高于B组,细胞生长曲线呈S形,符合Logistic生长曲线;C组T细胞高表达CD3,T细胞纯度较高,且CD8+T细胞占比较多。结论:食蟹猴外周血T淋巴细胞膜表面能表达和人同源性很高的CD3蛋白,在人源性CD3抗体、IL-2和1%PHA共刺激下能诱导食蟹猴外周血T淋巴细胞的增殖分化,获得生长状态良好、增殖能力强、纯度较高的T淋巴细胞。; 关键词同源性抗人cd3抗体 T淋巴细胞食蟹猴诱导培养; Keywords homology anti-human cd3Ab T lymphocyte cynomolgus monkey induced culture; 分类号 R73-35 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	抗人卵巢癌×抗人CD3双特异性单链抗体的构建、表达及复性研究	方敏赵瑞李骅蒋欣尹长城林晴黄华	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2002	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体介导的αβT细胞CDR3谱系漂移	罗微温茜周明乾马骊	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	细胞融合法制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体	苏瑾张亚莉郭志兵车小燕王小宁	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建	杨治华李以莞沈德诚田海梅刘向阳刘宝印李洁段世利佘鸣	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	1995	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	抗人CD3人/鼠嵌合抗体的表达及特性	杨治华刘向阳田海梅李洁李以莞沈德诚佘鸣	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	1995	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定	武国军王禾王栋于磊王智袁建林张波药立波	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人源性CD3抗体诱导食蟹猴T淋巴细胞培养方法的建立	缪怡董坚角德灵宋倩高嫦娥赵恒孟小琴	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料