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抗CCL20单克隆抗体对血清淀粉样蛋白A相关的结节病中促炎性细胞因子的抑制作用
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作者 魏佳 马成星 +2 位作者 郑颖 那雨琪 丁晶晶 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期1-6,共6页
目的探讨抗CCL20单克隆抗体是否可抑制高水平血清淀粉样蛋白A(SAA)相关的结节病外周血单个核细胞(PBMC)中促炎性细胞因子的表达。方法提取健康人和结节病患者的PBMC,并进行分组。除空白对照组(正常人PBMC)和结节病PBMC对照组(患者PBMC)... 目的探讨抗CCL20单克隆抗体是否可抑制高水平血清淀粉样蛋白A(SAA)相关的结节病外周血单个核细胞(PBMC)中促炎性细胞因子的表达。方法提取健康人和结节病患者的PBMC,并进行分组。除空白对照组(正常人PBMC)和结节病PBMC对照组(患者PBMC)外,另将结节病组PBMC中分别加入SAA、SAA+抗CCL20单克隆抗体、SAA+NF-κB抑制剂BAY11-7082或地塞米松,经培养48 h后收集各组细胞,分别作为PBMC+SAA刺激组、PBMC+SAA+NF-κB抑制剂BAY11-7082组、PBMC+SAA+抗CCL20单抗组、PBMC+地塞米松干预组,使用ELISA分别测定各组细胞上清液中细胞因子IL-17A、IL-23、IL-6、CCL20和TGF-β1的表达,使用RT-PCR测定各组细胞中CCR6、IL-17、ROR-γt和Foxp3的mRNA表达水平,使用Western blot检测各组细胞中p-NF-κB和NF-κB蛋白的表达水平。结果PBMC+SAA+抗CCL20单抗组与PBMC+SAA组相比,细胞上清液中的IL-17A、IL-23和IL-6的水平显著降低(P<0.01),而TGF-β1的含量显著升高(P<0.01)。PBMC+SAA+抗CCL20单抗组相较于PBMC+SAA组,细胞中CCR6、IL-17A、ROR-γtmRNA水平显著降低(P<0.01),而Foxp3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05)。PBMC+SAA+抗CCL20单抗组中p-NF-κB蛋白表达水平较PBMC+SAA组明显降低(P<0.01)。结论抗CCL20单克隆抗体可抑制高水平SAA相关的结节病PBMC中促炎性细胞因子的表达。 展开更多
关键词 结节病 血清淀粉样蛋白A 核因子ΚB CCL20单克隆抗体
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单克隆抗体与抗血清联合应用建立血清CMLC测定方法的研究
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作者 霍勇 汪丽蕙 +3 位作者 刘新军 杨非易 杜国光 葛韵琴 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第4期454-459,共6页
单克隆抗体(McAb)和抗血清各有特点。本文提纯人心肌肌球蛋白轻链(CMLC)并制备其单克隆抗体和抗CMLC兔血清(下称抗血清),试建立测定血清CMLC的酶联免疫(ELISA)方法。通过比较,McAb和抗血清联合应用可提高测定方法的灵敏度和特异性;并对... 单克隆抗体(McAb)和抗血清各有特点。本文提纯人心肌肌球蛋白轻链(CMLC)并制备其单克隆抗体和抗CMLC兔血清(下称抗血清),试建立测定血清CMLC的酶联免疫(ELISA)方法。通过比较,McAb和抗血清联合应用可提高测定方法的灵敏度和特异性;并对各反应试剂的工作浓度进行确定,建立了McAb(1C_(11)-D_7株)为铺底抗体,抗血清为覆盖抗体,碱性磷酸酶标记的羊抗兔IgG为第三抗体的三抗体酶联免疫夹心测定血清CMLC的方法(MP-ELISA)。血清CMLC最小可测浓度为2.5ng/mL。 展开更多
关键词 血清 ELISA 单克隆抗体
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血清γ球蛋白种间交叉反应抗原的单克隆抗体的制备
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作者 许辉 汪美先 +1 位作者 薛采芳 安献禄 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第4期33-35,共3页
作者用人γ球蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0细胞系融合,并以猪γ球蛋白作ELISA进行筛选,获得两株抗γ球蛋白种间交叉反应抗原的McAb杂交瘤细胞系(1B_(11)和2A_4)。用有限稀释法对1B_(11)和2A_4进行了克隆化。阳性率达到100%。特... 作者用人γ球蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0细胞系融合,并以猪γ球蛋白作ELISA进行筛选,获得两株抗γ球蛋白种间交叉反应抗原的McAb杂交瘤细胞系(1B_(11)和2A_4)。用有限稀释法对1B_(11)和2A_4进行了克隆化。阳性率达到100%。特异性试验结果表明:1B_(11)能识别人IgG、猪γ球蛋白和兔γ球蛋白;2A_4所识别的抗原存在于人Ig和猪γ球蛋白上,但未测出对兔γ球蛋白结合活性。 展开更多
关键词 交叉反应 Γ球蛋白 单克隆抗体 制备 血清 BALB/c 杂交瘤细胞系 Sp2/0 小鼠脾细胞 ELISA 有限稀释法 McAb igg 试验结果 结合活性 克隆 阳性率 特异性 识别
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单克隆抗体在法血清学上的应用及其制备方法的进展(综述)
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作者 李莉 《法医学杂志》 CAS CSCD 1993年第4期163-165,共3页
血型和酶型等遗传标记在法医学个人识别与亲权鉴定中有着广泛的应用。目前,一般用免疫学方法和电泳技术对其进行测定,前者需用抗血清,其来源有二:1)天然抗体的分离,如抗-A抗体可从螺丝和B型血清中提取,抗-B抗体可从霉菌和A型血清... 血型和酶型等遗传标记在法医学个人识别与亲权鉴定中有着广泛的应用。目前,一般用免疫学方法和电泳技术对其进行测定,前者需用抗血清,其来源有二:1)天然抗体的分离,如抗-A抗体可从螺丝和B型血清中提取,抗-B抗体可从霉菌和A型血清中提取,抗-H抗体可以从鳝鱼血和荆豆种子浸出液中提取,抗-P抗体可从山羊,猪等动物的血清中分离得到;2)抗原刺激机体产生免疫抗体,如HLA抗血清产生于妊娠,输血或器官移植之后。。 展开更多
关键词 单克隆抗体 制备方法 血清 免疫学方法 -B抗体 -H抗体 亲权鉴定 个人识别 遗传标记 电泳技术 天然抗体 免疫抗体 原刺激 器官移植 血清 法医学 提取 -A 浸出液 鳝鱼血 HLA 分离
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一种新的单克隆抗体检测方法在杂交瘤阳性细胞克隆筛选中的应用
5
作者 王雁云 张阳德 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期689-693,共5页
目的探讨将一种新的检测抗人血清IgG及白蛋白单克隆抗体的方法应用在杂交瘤阳性细胞克隆筛选中。方法分别将人血清IgG和白蛋白连接到微球Beads上,混合2种微球,然后与抗人血清IgG及白蛋白的单克隆抗体发生特异性反应,再与连接有荧光R-藻... 目的探讨将一种新的检测抗人血清IgG及白蛋白单克隆抗体的方法应用在杂交瘤阳性细胞克隆筛选中。方法分别将人血清IgG和白蛋白连接到微球Beads上,混合2种微球,然后与抗人血清IgG及白蛋白的单克隆抗体发生特异性反应,再与连接有荧光R-藻红蛋白(R-phycoerythrin,R-PE)的羊抗小鼠IgG抗体发生反应,最后在Luminex200仪器上读取微球上的平均荧光强度(MFI)值。结果抗人血清IgG及白蛋白单克隆抗体只与其相对应的微球发生特异性反应,2种抗体同时测定时,不互相干扰。当用该方法测定含有抗人血清IgG或白蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清液时,微球MFI值明显高于不含该抗体的上清液中微球的MFI值。结论该检测法具有较好的特异性,敏感性和重复性,可以应用到抗人血清IgG和白蛋白单克隆抗体杂交瘤阳性细胞克隆的筛选中。 展开更多
关键词 抗人血清igg单克隆抗体 人血清白蛋白单克隆抗体 杂交瘤阳性克隆筛选
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特异性单克隆与非特异性多克隆抗体荧光免疫偏振法测定肾移植病人全血环孢素浓度的比较及肝功能对血药浓度的影响<英文> 被引量:1
6
作者 王峰 张华峰 +2 位作者 李颖 苏士平 孙斌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 1996年第1期13-16,共4页
目的 观察特异性单克隆抗体与非特异性多克隆抗血清荧光免疫偏振法测定肾移植病人全血环孢素浓度的差异及肝功能对血药浓度的影响。方法 对36位肾移植术后病人的84份环孢素(CsA)血样同时用特异性单克隆(MAFPIA)和非特异性多克隆抗体(PAF... 目的 观察特异性单克隆抗体与非特异性多克隆抗血清荧光免疫偏振法测定肾移植病人全血环孢素浓度的差异及肝功能对血药浓度的影响。方法 对36位肾移植术后病人的84份环孢素(CsA)血样同时用特异性单克隆(MAFPIA)和非特异性多克隆抗体(PAFPIA)荧光免疫偏振分析法进行测定。对两种方法测得的数值进行统计学处理。结果MAFPIA与PAFPIA之间有较好的线性关系(相关系数为0.8947),两者的测得值具统计学显著性差异。肝功能异常的患者PAFPIA测得值显著大于MAFPIA测得值。与肝功能正常患者相比有明显差异,且两者的回归曲线参数均有明显不同。结论 对CsA血药浓度测定应采用特异性高的方法。 展开更多
关键词 环孢素 血药浓度 肝功能 非特异性 肾移植病人 全血 单克隆 克隆抗体 荧光 血清
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用反向被动血凝抑制试验进行乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体的位阻分析 被引量:2
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作者 刘新铭 李文琦 +5 位作者 李益民 阎伟 高鸿瑞 谢溱 蔡玲民 彭学芳 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期17-21,共5页
本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24... 本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24种McAb可分为10个不同的抑制群。并对这种简单易行的位阻分析方法在实用中的价值做了讨论。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面 反向被动血凝抑制试验 单克隆抗体 HBSAG 杂交瘤细胞系 IgM抗体 血凝抑制法 igg MeAb McAb 决定簇
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单克隆抗体对肾综合征出血热病毒感染乳鼠保护作用的研究 被引量:8
8
作者 卫立辛 汪美先 +1 位作者 徐志凯 汪力亚 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期5-10,共6页
HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100%,1株McAb保护率为17%,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显... HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100%,1株McAb保护率为17%,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显保护作用的5株McAb分别接种感染后不同时间的乳鼠,结果在48小时内接种保护率均达100%;但随接种时间推后,保护率逐渐下降,感染后10天接种几乎无保护作用。此5株McAb保护作用均优于多克隆的免疫血清。应用不同稀释的McAb 3D8进行保护试验,发现保护效果与接种剂量密切相关。采用固定抗体,稀释病毒方法测得McAb 3D8对HFRS病毒陈株感染乳鼠的保护指数为5.8。 展开更多
关键词 肾综合征出血热病毒 保护作用 感染乳鼠 单克隆抗体 McAb HFRS病毒 新生乳鼠 保护率 腹腔感染 死亡时间 不同时间 接种时间 免疫血清 保护效果 病毒方法 保护指数 感染后 3D8 克隆 稀释
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用微量和弱免疫原性抗原制备多克隆及单克隆抗体的新方法 被引量:3
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作者 王小宁 马贤凯 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期59-61,共3页
制备抗血清及单克隆抗体(McAb)时,最重要的是抗原(Ag)诱发所免疫动物的抗体应答强度,企图获得高效价的抗体,不但取决于Ag本身所具有的免疫原性,而且与免疫时所使用的AE量,免疫途径及佐剂形式有关。通常当抗原免疫原性较强、
关键词 单克隆抗体 弱免疫原性 制备 克隆 新方 微量 抗体应答 免疫动物 免疫途径 血清 高效价
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抗甲胎蛋白单克隆抗体的制备及其性质的研究 被引量:2
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作者 杨翰仪 李俐 +5 位作者 张培因 虞伟 石颖 麦荫养 陈远耀 亓玉民 《白求恩医科大学学报》 1984年第3期237-241,共5页
甲胎蛋白(AFP)是胎儿肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。羊水和母体血清中AFP浓度的升高,对胎儿神经管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断,具有应用价值。在大多数原发性肝细胞癌和内胚窦癌患者血清中测得血清中AFP浓度升高,有助于肿瘤的早期诊... 甲胎蛋白(AFP)是胎儿肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。羊水和母体血清中AFP浓度的升高,对胎儿神经管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断,具有应用价值。在大多数原发性肝细胞癌和内胚窦癌患者血清中测得血清中AFP浓度升高,有助于肿瘤的早期诊断,也是在治疗过程中观察疗效的一项指标。 展开更多
关键词 单克隆抗体 AFP 腹水 血清 水肿 杂交瘤技术 杂种细胞
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分泌抗人IgG重链单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
11
《中国医学科学院学报》 1984年第1期64-64,共1页
应用人IgG免疫的BALB/C小鼠脾细胞与NS-1鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇1000作用下融合,并经克隆后获得了4株抗人IgGMcAb的杂交瘤细胞(1B3,2D5,2A4,2B6)。用ELISA和被动血凝方法测定培养物上清,含有较高滴度的抗体含量。用琼脂免疫双扩散方法,... 应用人IgG免疫的BALB/C小鼠脾细胞与NS-1鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇1000作用下融合,并经克隆后获得了4株抗人IgGMcAb的杂交瘤细胞(1B3,2D5,2A4,2B6)。用ELISA和被动血凝方法测定培养物上清,含有较高滴度的抗体含量。用琼脂免疫双扩散方法,证明它仅与人IgG发生反应,产生透明沉淀线。 展开更多
关键词 杂交瘤细胞株 抗人igg 单克隆抗体
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高压液相纯化小鼠单克隆抗体及其在免疫学中应用 被引量:1
12
作者 金伯泉 刘雪松 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期37-39,共3页
本文采用Deschamps方法加以修改,40%饱和硫酸铵沉淀小鼠腹水中免疫球蛋白,然后用TSK-DEAE 5PW高压液相离子交换层析柱,应用线性梯度洗脱条件,纯化TLiSAl IgG1单克隆抗体,回收率为50~60%、纯度>90%。纯化后的单克隆抗体在荧光细... 本文采用Deschamps方法加以修改,40%饱和硫酸铵沉淀小鼠腹水中免疫球蛋白,然后用TSK-DEAE 5PW高压液相离子交换层析柱,应用线性梯度洗脱条件,纯化TLiSAl IgG1单克隆抗体,回收率为50~60%、纯度>90%。纯化后的单克隆抗体在荧光细胞激活分类仪分析、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶染色、^(125)I标记单抗进行竞争结合试验、功能性实验以及制备Sephorose CL-4B亲和层析柱纯化相应抗原进行氨基酸列序分析中均显示良好的生物学活性。 展开更多
关键词 高压液相 单克隆抗体 免疫学 碱性磷酸酶染色 免疫球蛋白 生物学活性 离子交换 洗脱条件 igg1 细胞激活 结合试验 标记单 回收率 功能性 氨基酸 柱纯化
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用单克隆抗独特型抗体检测肾综合征出血热(HFRS)病人外周血淋巴细胞表面特异抗原受体的临床意义
13
作者 许辉 刘俊彬 +2 位作者 汪美先 薛采芳 安献禄 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第4期36-36,共1页
用抗独特型抗体(Ab2)检测细胞表面抗原受体是将Ab2作为探针用于免疫学检测而出现的新的研究方法。本文在制备了HFRS病毒抗独特型抗体的基础上应用单克隆抗独特型抗体(1B1)作间接免疫荧光试验,检测了HFRS病人外周血淋巴细胞表面特异抗... 用抗独特型抗体(Ab2)检测细胞表面抗原受体是将Ab2作为探针用于免疫学检测而出现的新的研究方法。本文在制备了HFRS病毒抗独特型抗体的基础上应用单克隆抗独特型抗体(1B1)作间接免疫荧光试验,检测了HFRS病人外周血淋巴细胞表面特异抗原受体。首先,采取病人外周肝素抗凝血用淋巴细胞分离液按常规方法分离淋巴细胞,将淋巴细胞用RPMI 1640不完全培养液离心洗一次后弃上清,将沉降细胞重新悬浮后调至0.1ml并加入5%小牛血清.混匀,取约10—30μl加在预置于离心细胞沉淀器的玻片上,800rpm离心5分钟,取下玻片待干燥后加丙酮-福尔马林固定液固定30秒,水洗,吹干。 展开更多
关键词 外周血淋巴 细胞表面 肾综合征出血热 临床意义 病人 抗体检测 特异 单克隆独特型抗体 间接免疫荧光试验 淋巴细胞分离液 表面原受体 HFRS病毒 免疫学检测 细胞沉淀器 常规方法 小牛血清 福尔马林 凝血 离心 培养液
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一株高滴度广谱抗HFRS病毒单克隆抗体的建立
14
作者 李荔 陈伯权 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期44-44,共1页
本文用抗原上有些不同的肾综合征出血热(HFRS)病毒湖北毒株HA1018免疫BALB/c小鼠,与Sp2/0细胞融合,获得分泌抗HFRS单克隆抗体(MCAb)的杂交瘤E5细胞株。McAbE5为IgG1亚类,间接免疫荧光(IFA)测定腹水抗体滴度可达1:100万。
关键词 HFRS病毒单克隆抗体 高滴度 BALB/c小鼠 肾综合征出血热 广谱 igg1亚类 间接免疫荧光 Sp2/0 细胞融合 抗体滴度 细胞株 杂交瘤
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SPA单克隆抗体酶免法(EIA)检测弓形虫病
15
作者 计浩 吴叙苏 《畜牧兽医科技信息》 1995年第7期2-2,共1页
SPA酶标法ELISA诊断弓形虫病的主要缺点是对弓形虫病的隐性感染激发抗体水平较低,敏感性差易漏检。本试验采用生物技术SPA+HRP—SPA McAb搭桥法再放大原理检测弓形虫病微量血清IgG型抗体阳性率平均提高20%。SPA是一种广普的它能与人和... SPA酶标法ELISA诊断弓形虫病的主要缺点是对弓形虫病的隐性感染激发抗体水平较低,敏感性差易漏检。本试验采用生物技术SPA+HRP—SPA McAb搭桥法再放大原理检测弓形虫病微量血清IgG型抗体阳性率平均提高20%。SPA是一种广普的它能与人和多种哺乳动物的血清IgG Fc段发生非特异性的结合。 展开更多
关键词 单克隆抗体 弓形虫病 酶免法 血清igg 哺乳动物 ELISA诊断 抗体阳性率 抗体水平 放大原理 生物技术
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丙型肝炎病毒IgG抗体阳性患者血清抗HCV IgM、ALT及HCV RNA的对比分析 被引量:3
16
作者 夏勇 唐希才 李德华 《实用医学杂志》 CAS 2005年第7期745-746,共2页
目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚... 目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚合酶链反应(R T-PC R)方法检测H C V R N A,并进行比较。结果:在丙型肝炎IgG阳性患者中,抗-H C V IgM阳性率为8.3%,H C V R N A阳性率为41.7%。H C V R N A的检出在A LT异常情况下较正常明显高(P<0.05),但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性(r=0.346,P>0.05)。结论:抗-H C V IgM不能反映病毒复制,A LT异常情况下H C V R N A检出率高,但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性,H C V R N A仍是反映H C V复制的可靠指标。 展开更多
关键词 阳性患者 丙型肝炎病毒 igg抗体 荧光定量逆转录聚合酶链反应 HCV 对比分析 HCVRNA -HCVIgM ALT水平 血清-HCV RNA含量 丙氨酸转移酶 丙型肝炎患者 异常情况 试剂盒检测 分析仪检测 HCV复制 病毒复制 阳性率 相关性
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大阪红十字会利用细胞培养装置高效地生产单克隆抗体
17
作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第7期24-25,共2页
大阪府红十字会血液中心笫二检查课课长山野孟等成功地利用空心纤维细胞培养装置,高效地生产了用于判断 Rh 型血型的人单克隆抗体。连续运转131天,获得了5.1克单克隆抗件(IgG)。产生的单克隆抗体蓄积在空心纤维筒内,从细胞培养装置中取... 大阪府红十字会血液中心笫二检查课课长山野孟等成功地利用空心纤维细胞培养装置,高效地生产了用于判断 Rh 型血型的人单克隆抗体。连续运转131天,获得了5.1克单克隆抗件(IgG)。产生的单克隆抗体蓄积在空心纤维筒内,从细胞培养装置中取出后,即可得到效价8万单位的高浓度溶液。将第131天抽取出的总量为8.1升溶液浓缩10倍,去除白蛋白后 IgG 浓度平均为6. 展开更多
关键词 单克隆抗体 细胞培养 纤维细胞 大阪府 igg 胎牛血清 抗体 培养瓶 病毒转化 大鼠
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一株人单克隆抗体在快速竞争抗HIV ELISA中的应用
18
作者 Dpel.SH 欧阳笑梅 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第3期65-66,共2页
建立了直接检测抗HIV抗体的ELISA筛选技术。第一代测定法主要是根据夹心法的原理,利用从细胞培养中纯化的病毒,但这样会出现假阳性和假阴性的结果。先前应用的夹心法需要高倍稀释的血清和两步程序,而且只能检出IgG抗体。为了尽早地在感... 建立了直接检测抗HIV抗体的ELISA筛选技术。第一代测定法主要是根据夹心法的原理,利用从细胞培养中纯化的病毒,但这样会出现假阳性和假阴性的结果。先前应用的夹心法需要高倍稀释的血清和两步程序,而且只能检出IgG抗体。为了尽早地在感染后测定IgM抗体,以检出抗HIV的免疫应答,因此;利用吸附在固相的重组HIV囊膜蛋白和酶标人单克隆抗体,建立了一种竞争ELISA法。该法既可检测IgM又能检测IgG抗体,而且不需要预先释稀血清,1小时内可得出结果。 展开更多
关键词 单克隆抗体 竞争ELISA法 igg抗体 HIV抗体 IGM抗体 重组HIV 筛选技术 直接检测 免疫应答 囊膜蛋白 测定法 第一代 假阳性 感染后 心法 血清 检出
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重组多克隆抗体——一类新的治疗制剂 被引量:1
19
作者 乔春霞 沈倍奋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期24-26,共3页
关键词 重组多克隆抗体 治疗制剂 多表位 临床应用前景 疾病治疗 单克隆抗体 血清 基因改造
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双峰驼血清IgG纯化及其抗血清制备
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作者 贾存瑜 韩熙梦 +5 位作者 聂佳琪 张欣 焦韵洁 刘宝元 周恩民 穆杨 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1584-1590,共7页
纯化双峰驼血清IgG并制备兔抗骆驼IgG抗血清,为制备针对特定蛋白的特异性纳米抗体储备材料,利用Protein G纯化双峰驼血清IgG,并用纯化的IgG免疫成年家兔后采用ELISA方法检测抗血清效价;采用间接ELISA方法,利用制备的抗血清检测PCV2 Cap... 纯化双峰驼血清IgG并制备兔抗骆驼IgG抗血清,为制备针对特定蛋白的特异性纳米抗体储备材料,利用Protein G纯化双峰驼血清IgG,并用纯化的IgG免疫成年家兔后采用ELISA方法检测抗血清效价;采用间接ELISA方法,利用制备的抗血清检测PCV2 Cap蛋白免疫双峰驼血清中抗Cap蛋白的抗体水平,Western blot技术检测制备的抗血清与从噬菌体纳米抗体库中筛选到的针对不同蛋白的纳米抗体的反应性,以确定抗血清的适用性。结果显示,从双峰驼血清中纯化到骆驼IgG,SDS-PAGE分析显示纯化的骆驼IgG包括3条链,约50ku的传统重链IgG1,约43ku缺失CH1的重链IgG3和约30ku的传统轻链;3次免疫后兔抗骆驼IgG抗血清效价达1∶512 000;应用制备的抗血清检测PCV2 Cap蛋白免疫5次的双峰驼血清中抗Cap蛋白的抗体效价达1∶1 024 000;制备的抗血清可以与原核表达的针对不同病毒蛋白的纳米抗体反应;说明制备的兔抗骆驼IgG抗血清可用于免疫骆驼血清和表达的纳米抗体的检测。研究结果为目标蛋白免疫骆驼后抗体效价检测及纳米抗体文库构建提供关键材料。 展开更多
关键词 骆驼 亲和层析 igg 血清 纳米抗体
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