双抗体夹心ELISA法测定猪α-干扰素的浓度 被引量：6

1

作者 蒋佳颖 王一成 +3 位作者 杨孝朴 袁秀芳 李军星 徐丽华 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期740-745,共6页

为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素（Po IFN-α）含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素... 为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素（Po IFN-α）含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法（DAS-ELISA）。通过条件优化,最佳兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆纯化抗体包被浓度为12.5μg·m L^-1,最佳鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为6.25μg·m L^-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α-干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α-干扰素浓度范围为0.0781-2.50μg·m L^-1。与Lowry法、冻干称量法测定猪α-干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α-干扰素浓度,且方法简便。 展开更多

关键词 猪α-干扰素 双抗体夹心elisa 定量检测

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牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立 被引量：3

2

作者 李超 林祥梅 +2 位作者 梅琳 李全芬 韩雪清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第1期72-76,共5页

建立牛结核病的γ-干扰素(BovIFN-γ)免疫学检测方法。本研究利用rBovIFN-γ抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,通过淋巴细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备抗BovIFN-γ的单克隆抗体,在McAb及多克隆抗体的基础上建立双抗体夹心ELISA,并进... 建立牛结核病的γ-干扰素(BovIFN-γ)免疫学检测方法。本研究利用rBovIFN-γ抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,通过淋巴细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备抗BovIFN-γ的单克隆抗体,在McAb及多克隆抗体的基础上建立双抗体夹心ELISA,并进一步优化ELISA反应条件。结果表明,获得一株能稳定分泌抗BovIFN-γMcAb的杂交瘤细胞株A12E9,分泌单克隆抗体腹水效价为1∶107,属于IgG1亚类,具有良好的特异性;所建立的双抗体夹心ELISA方法,BovIFN-γ最低检测限为40 ng/mL,与其他蛋白不发生交叉反应,表现出良好的特异性。该方法为建立牛结核病的γ-干扰素诊断方法奠定了基础。 展开更多

关键词 牛γ-干扰素 单克隆抗体 双抗体夹心elisa

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诊断抗原的纯化在牛γ-干扰素ELISA法中的应用 被引量：1

3

作者 邱美珍 周望平 +4 位作者 肖兵南 杜丽飞 胡述光 刘毅 陈江 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期82-85,共4页

比较皮内变态反应(TST)、抗酸染色、牛结核ELISA(PPD-ELISA)和γ-干扰素ELISA法(IFN-γ-ELISA)对牛结核的检测结果,并通过比较牛PPD、禽PPD、亲和层析牛PPD(牛PPD’)的IFN-γ-ELISA检测结果,探索诊断抗原的纯化在牛IFN-γ-ELISA法中的应... 比较皮内变态反应(TST)、抗酸染色、牛结核ELISA(PPD-ELISA)和γ-干扰素ELISA法(IFN-γ-ELISA)对牛结核的检测结果,并通过比较牛PPD、禽PPD、亲和层析牛PPD(牛PPD’)的IFN-γ-ELISA检测结果,探索诊断抗原的纯化在牛IFN-γ-ELISA法中的应用.结果表明,与抗酸染色相比,IFN-γ-ELISA的敏感性、特异性和符合率都比较高,分别为83.33%(5/6),98.14%(53/54),98.33%(58/60);牛PPD、禽PPD、牛PPD’3种特异性抗原刺激产生IFN-γ释放反应的结果表明,1例抗酸染色阳性的牛,未经亲和层析处理牛PPD的IFN-γ-ELISA检测OD值偏高,判为牛结核阳性,亲和层析纯化牛PPD的IFN-γ-ELISA检测OD值较低,判为牛结核阴性,表明亲和层析处理能排除环境分支杆菌对试验的干扰,IFN-γ-ELISA法有望替代TST法在中国推广使用。 展开更多

关键词 牛结核 皮内变态反应 抗酸染色 牛结核elisa γ-干扰素elisa法 亲和纯化

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猪β-干扰素的基因改造表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测定 被引量：4

4

作者 张显浩 苏丹萍 +2 位作者 张艳萍 蒋爱翔 贺东生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期63-67,共5页

本研究根据GenBank上登录的猪β-干扰素基因成熟肽核苷酸序列(mPoIFNβ),在保持原猪β-干扰素蛋白序列不变的基础上,对猪β-干扰素基因进行了毕赤酵母偏嗜性改造,并构建了毕赤酵母重组表达质粒pPICZαC-PoIFNβ。pPICZαC-PoIFNβ经Sac... 本研究根据GenBank上登录的猪β-干扰素基因成熟肽核苷酸序列(mPoIFNβ),在保持原猪β-干扰素蛋白序列不变的基础上,对猪β-干扰素基因进行了毕赤酵母偏嗜性改造,并构建了毕赤酵母重组表达质粒pPICZαC-PoIFNβ。pPICZαC-PoIFNβ经SacⅠ酶切线性化后,电击转化导入感受态的毕赤酵母菌株X-33中,转化子经YPDS+Zeocin抗性平板筛选和PCR鉴定后获得多株阳性菌株。阳性酵母菌株经甲醇诱导分泌表达了重组PoIFNβ,其表达量约为127.9mg/L。表达产物经SDS-PAGE和Western blotting检测,结果表明,表达产物为分子质量约25和28ku的混合物,并且二者都可与PoIFNβ阳性血清结合。以细胞病变抑制法测定重组β-干扰素在BHK-21细胞上的抗水泡性口炎病毒活性为2.8×103 IU/mL;对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在Marc-145细胞上抗病毒活性达到1.6×103 IU/mL。 展开更多

关键词 猪β-干扰素 毕赤酵母 分泌表达 抗病毒活性 猪繁殖与呼吸综合征病毒

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重组人干扰素α-2b体外抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究 被引量：5

5

作者 刁慧敏 江杨帆 +2 位作者 周秀红 蔡标 吴亦伦 《安徽医学》 2009年第5期502-503,共2页

目的观察重组人干扰素α-2b在体外的抗呼吸道合胞病毒作用。方法观察不同浓度重组人干扰素α-2b抑制呼吸道合胞病毒对Hela细胞产生细胞病变(CPE)的作用,并与利巴韦林比较。结果实验表明重组人干扰素α-2b抗呼吸道合胞病毒的最低有效浓度... 目的观察重组人干扰素α-2b在体外的抗呼吸道合胞病毒作用。方法观察不同浓度重组人干扰素α-2b抑制呼吸道合胞病毒对Hela细胞产生细胞病变(CPE)的作用,并与利巴韦林比较。结果实验表明重组人干扰素α-2b抗呼吸道合胞病毒的最低有效浓度为25IU/ml。结论重组人干扰素α-2b具有明显的抗呼吸道合胞病毒作用。 展开更多

关键词 重组人干扰素Α-2B 呼吸道合胞病毒 抗病毒

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鸡α-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及其抗病毒活性测定 被引量：3

6

作者 吴静 李玉峰 +3 位作者 宋敏训 黄兵 马秀丽 李峰 《山东农业科学》 2006年第1期61-64,共4页

本试验将已构建的鸡α-干扰素重组酵母表达质粒pPIC-ChIFNα克隆至Pichia pastorisGS115基因组中,从阳性转化子中筛选出2株能高效表达鸡α-干扰素的重组酵母菌株,并对表达产物进行了纯化和抗病毒活性的测定。结果表明,Pichia pastoris... 本试验将已构建的鸡α-干扰素重组酵母表达质粒pPIC-ChIFNα克隆至Pichia pastorisGS115基因组中,从阳性转化子中筛选出2株能高效表达鸡α-干扰素的重组酵母菌株,并对表达产物进行了纯化和抗病毒活性的测定。结果表明,Pichia pastoris表达的重组ChIFNα具有较高的抗病毒活性,其活性单位为570×104U/ml,结合蛋白定量计算其比活性为2 980×104U/mg。 展开更多

关键词 鸡α-干扰素成熟蛋白 PICHIA PASTORIS 基因表达 分离纯化 抗病毒活性

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重组干扰素α-2b栓的抗疱疹病毒作用 被引量：1

7

作者 刘苗 刘海文 +1 位作者 刘铮 王思玲 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期310-315,共6页

目的探讨重组干扰素α-2b栓(IFNα-2b栓)的体外、体内抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型作用。方法应用细胞病变抑制法,观察IFNα-2b栓的体外抗病毒作用。建立HSV-2豚鼠阴道炎模型和HSV-1型豚鼠皮肤感染模型,分别用0.75、2.25、6.75 mg.kg-1的IF... 目的探讨重组干扰素α-2b栓(IFNα-2b栓)的体外、体内抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型作用。方法应用细胞病变抑制法,观察IFNα-2b栓的体外抗病毒作用。建立HSV-2豚鼠阴道炎模型和HSV-1型豚鼠皮肤感染模型,分别用0.75、2.25、6.75 mg.kg-1的IFNα-2b栓治疗,进行豚鼠阴道分泌物的病毒毒力检测及阴道组织的病理组织学等检查,每天记录豚鼠皮肤损伤病变分值情况,观察IFNα-2b栓的体内抗病毒作用。结果体外实验,IFNα-2b栓、重组人干扰素α-2b注射液和阿昔洛韦对单纯疱疹病毒Ⅱ型的IC50分别是(0.59±0.11)、(0.56±0.08)、(21.20±1.90)mg.L-1。体内实验,各给药组中,IFNα-2b栓6.75 mg.kg-1剂量抗病毒作用最强,豚鼠阴道分泌物中病毒毒力显著低于模型组(P<0.01)。阴道组织切片病理结果也表明IFNα-2b栓对豚鼠阴道损伤具有较好的治疗作用。IFNα-2b栓能显著的减轻单纯疱疹I型病毒感染豚鼠的皮肤损伤程度(P<0.01),在相同剂量下,干扰素α-2b栓剂与干扰素α-2b注射液的抗单纯疱疹病毒活性相比较,2.25 mg.kg-1的干扰素α-2b栓剂组与其注射液组的治疗作用相当。结论 IFNα-2b栓在体外及体内均有一定的病毒抑制作用。 展开更多

关键词 重组干扰素α-2b栓 单纯疱疹病毒 抗病毒

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吉兰-巴雷综合征患者外周血清白介素2、干扰素α及抗体水平的检测

8

作者 李中春 陈怀红 闻树群 《江南大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第4期438-440,共3页

目的探讨白介素2(IL-2)、抗白介素2抗体(IL-2Ab)、干扰素α(IFN-α)和抗干扰素α抗体(IFN-αAb)在吉兰-巴雷综合征(GBS)患者病理免疫机制中的作用和意义.方法采用ELISA检测了50例GBS病人和30名健康人血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb... 目的探讨白介素2(IL-2)、抗白介素2抗体(IL-2Ab)、干扰素α(IFN-α)和抗干扰素α抗体(IFN-αAb)在吉兰-巴雷综合征(GBS)患者病理免疫机制中的作用和意义.方法采用ELISA检测了50例GBS病人和30名健康人血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb,并进行比较.结果GBS患者血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb均比正常对照组明显升高.结论IL-2、IFN-α及其相应抗体可能参与了GBS的免疫病理过程,IL-2Ab和IFN-αAb可能作为中和性抗体对IL-2和IFN-α起负调节作用,且可能与疾病的自限有关. 展开更多

关键词 吉兰-巴雷综合征 白介素2 抗白介素2抗体 干扰素Α 抗干扰素α抗体

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γ-干扰素抗肝纤维化临床疗效观察

9

作者 张明侠 胡丽佳 +3 位作者 张菁 杨汉青 丁蔚茅 丁琦 《抗感染药学》 2002年第1期15-16,共2页

重组γ-干扰素(IFN-γ)经动物实验具有抗肝纤维化作用。临床血清学观察也初步证明IFN-γ有一定的抗肝纤维化的疗效。我院应用IFN-γ治疗肝纤维化30例患者,以肝活检病理指标为主评价疗效,现将结果报告如下。

关键词 抗肝纤维化 临床疗效 肝活检病理 γ-干扰素 临床血清 动物实验 血清学指标 层粘蛋白 肝功能变化 肝星状细胞

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重组人干扰素α-2b中残余假单胞菌菌体蛋白定量ELISA检测方法的建立 被引量：2

10

作者 刘春琴 江昕 +1 位作者 尉然 钱晓露 《生物医学工程与临床》 CAS 2015年第5期511-514,共4页

目的 建立假单胞菌菌体蛋白的双抗体夹心酶联免疫吸附分析（ELISA）定量检测方法，用于重组人干扰素α-2b中残余宿主菌菌体蛋白（HCP）含量的检测。方法 采用带有不含干扰素基因空质粒的假单胞菌，按既定工艺发酵纯化并制备HCP，免疫... 目的 建立假单胞菌菌体蛋白的双抗体夹心酶联免疫吸附分析（ELISA）定量检测方法，用于重组人干扰素α-2b中残余宿主菌菌体蛋白（HCP）含量的检测。方法 采用带有不含干扰素基因空质粒的假单胞菌，按既定工艺发酵纯化并制备HCP，免疫小鼠和白兔后制备抗HCP多抗体，以抗HCP兔抗体为包被抗体，将抗HCP鼠抗体标记辣根过氧化物酶（HRP）为酶联抗体，建立双抗体夹心ELISA法，并对该方法进行验证及应用。结果 所建立的方法线性范围为2.5 - 80.0 ng/mL，相关系数R2 〉 0.98，定量限为2.5 ng/mL；检测不同浓度的加样回收样品，回收率为85 % - 115 %，变异系数均 〈 10 %；与重组人干扰素α-2b和牛血清白蛋白（BSA）均无交叉反应；检测3批供试品，准确度及重现性良好。结论 已建立假单胞菌菌体蛋白的双抗体夹心ELISA定量检测方法，该方法线性好，专属性强，灵敏度高，准确度和精密度较高，可用于重组人干扰素α-2b中HCP的质量控制。 展开更多

关键词 elisa 假单胞菌 宿主菌体蛋白 重组人干扰素Α-2B 质量控制

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γ-干扰素ELISA检测方法在牛结核病流行病学调查中的应用 被引量：2

11

作者 吴亚文 王晓亮 +3 位作者 张玉玲 王玉梅 李志红 张学军 《中国动物检疫》 CAS 2016年第9期78-80,共3页

[目的 ]了解宁夏贺兰县奶牛结核病的流行情况,为制定宁夏地区牛结核病净化方案提供参考。[方法 ]2015年采用皮内变态反应和γ-干扰素ELISA检测方法,对宁夏贺兰县2个规模化奶牛场开展牛结核病流行病学调查,共检测奶牛2 230头。[结果 ]在... [目的 ]了解宁夏贺兰县奶牛结核病的流行情况,为制定宁夏地区牛结核病净化方案提供参考。[方法 ]2015年采用皮内变态反应和γ-干扰素ELISA检测方法,对宁夏贺兰县2个规模化奶牛场开展牛结核病流行病学调查,共检测奶牛2 230头。[结果 ]在2个规模化奶牛场累计检测出皮内变态反应阳性奶牛79头,皮内变态反应和γ-干扰素ELISA双阳性奶牛72头,双阳性率为3.23%(72/2 230)。[结论 ]γ-干扰素ELISA检测方法准确度较高;在对牛群进行结核病检测时,先以皮内变态反应方法筛测,再结合γ-干扰素ELISA检测结果确诊,更有利于牛结核病的检测与净化。 展开更多

关键词 牛结核病 γ-干扰素elisa 皮内变态反应 流行病学调查

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高危型HPV感染患者应用抗HPV生物蛋白敷料与重组人干扰素α-2b凝胶治疗的效果分析 被引量：3

12

作者 陈程 《北方药学》 2023年第5期37-40,共4页

目的:分析抗人类乳头状瘤病毒(HPV)生物蛋白敷料与重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)凝胶在治疗高危型HPV(hr-HPV)感染中的应用效果。方法:选取2020年5月至2021年11月于本院接受治疗的hr-HPV感染患者90例,采用随机数表法分为抗HPV组(45例)... 目的:分析抗人类乳头状瘤病毒(HPV)生物蛋白敷料与重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)凝胶在治疗高危型HPV(hr-HPV)感染中的应用效果。方法:选取2020年5月至2021年11月于本院接受治疗的hr-HPV感染患者90例,采用随机数表法分为抗HPV组(45例)和rhIFNα-2b组(45例)。rhIFNα-2b组患者予以rhIFNα-2b凝胶治疗,抗HPV组患者给予抗HPV生物蛋白敷料治疗,两组患者均连续治疗3个疗程。观察两组患者接受治疗后的HPV清除效果,检测抗HPV组和rhIFNα-2b组患者治疗前、治疗3个疗程后体内炎症水平,统计抗HPV组和rhIFNα-2b组患者在用药期间出现瘙痒、灼热等症状的发生情况,并比较用药后3个月、6个月时抗HPV组和rhIFNα-2b组患者的临床疗效。结果:治疗3个疗程后,抗HPV组hr-HPV感染患者HPV清除的总有效率84.44%,高于rhIFNα-2b组的总有效率64.44%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗3个疗程后,抗HPV组hr-HPV感染患者肿瘤坏死因子(TNF-α)、转化生长因子(TGF-β1)、白细胞介素(IL-6)与rhIFNα-2b组相比均有所降低,干扰素(IFN-γ)水平与rhIFNα-2b组相比均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05);用药期间,抗HPV组患者瘙痒、灼热等症状的发生率为4.44%,rhIFNα-2b组患者瘙痒、灼热等症状的发生率为6.67%,两组患者瘙痒、灼热等症状的发生率比较,差异无统计学意义(P=0.645);抗HPV组用药后3个月、6个月的总有效率均高于rhIFNα-2b组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抗HPV生物蛋白敷料对于治疗hr-HPV感染比rhIFNα-2b凝胶疗效更好,具有降低患者炎症介质水平的作用,安全性好。 展开更多

关键词 高危型HPV感染 抗HPV生物蛋白敷料 重组人干扰素Α-2B凝胶 HPV转阴

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ELISA法检测γ-干扰素

13

作者 王艾丽 武建国 《医学研究生学报》 CAS 1993年第3期259-261,共3页

提要用高纯度重组人IFN-Y免疫家兔,制成抗IFN-Y多克隆抗体,建立了双抗体夹心ELISA法。本法最小检出量为1.56IU/ml,特异性好,不精密度批内CV4.6％～7.2％,批间CV6.9％～10.1％,回收率96.7％～105.3％。30名健康成人外周血细胞经PHA诱导... 提要用高纯度重组人IFN-Y免疫家兔,制成抗IFN-Y多克隆抗体,建立了双抗体夹心ELISA法。本法最小检出量为1.56IU/ml,特异性好,不精密度批内CV4.6％～7.2％,批间CV6.9％～10.1％,回收率96.7％～105.3％。30名健康成人外周血细胞经PHA诱导后上清中IFN-Y活性为7.1士4.2IU/ml。 展开更多

关键词 干扰素 抗干扰素抗体 elisa

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重组人干扰素α-2b栓联合活性银离子抗菌液治疗老年性阴道炎的临床效果

14

作者 刘慧华 《河南医学研究》 CAS 2021年第25期4744-4746,共3页

目的探讨重组人干扰素(rhIFN)α-2b栓联合活性银离子抗菌液治疗老年性阴道炎的临床效果。方法选取2019年1月至2020年12月于柘城县人民医院接受治疗的86例老年性阴道炎患者为研究对象,根据随机数字表法分为对照组(43例,rhIFNα-2b栓)与... 目的探讨重组人干扰素(rhIFN)α-2b栓联合活性银离子抗菌液治疗老年性阴道炎的临床效果。方法选取2019年1月至2020年12月于柘城县人民医院接受治疗的86例老年性阴道炎患者为研究对象,根据随机数字表法分为对照组(43例,rhIFNα-2b栓)与观察组(43例,rhIFNα-2b栓联合活性银离子抗菌液),两组均连续治疗2个月。观察两组临床疗效,对比两组治疗前、治疗2个月后阴道pH值及炎症因子[干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-12]水平;随访6个月,统计两组复发情况。结果观察组临床总有效率(93.02%)高于对照组(74.42%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗2个月后,两组阴道pH值、IL-4水平低于治疗前,IFN-γ、IL-12水平高于治疗前,且观察组阴道pH值、IL-4水平低于对照组,IFN-γ、IL-12水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组复发率(6.45%)低于对照组(33.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论rhIFN-α-2b栓联合活性银离子抗菌液治疗可降低老年性阴道炎患者阴道pH值,减轻炎症反应,提高临床效果,降低复发率。 展开更多

关键词 老年性阴道炎 重组人干扰素Α-2B栓 活性银离子抗菌液 阴道PH值 炎症因子

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猪β-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其活性 被引量：8

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作者 姚清侠 曹毅 +4 位作者 钱平 徐卓菲 何雁南 司有辉 陈焕春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期506-512,共7页

为了高效表达分泌型的猪β-干扰素,将去除信号肽的编码梅山猪β-干扰素成熟多肽基因（mPoIFNβ）插入酵母-大肠杆菌穿梭载体pPIC9K,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-mPoIFNβ。将以SalⅠ线性化的pPIC9K-mPoIFNβ用化学方法（LiCl）,与... 为了高效表达分泌型的猪β-干扰素,将去除信号肽的编码梅山猪β-干扰素成熟多肽基因（mPoIFNβ）插入酵母-大肠杆菌穿梭载体pPIC9K,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-mPoIFNβ。将以SalⅠ线性化的pPIC9K-mPoIFNβ用化学方法（LiCl）,与鲑鱼精DNA（ssDNA）共转化入毕赤酵母菌株GS115,转化子经MD平板筛选和PCR鉴定后获得阳性菌株,再经高浓度G418筛选到多拷贝菌株。以1%甲醇连续诱导4 d,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明：表达产物为22 ku和26 ku的混合物,在GS115中的表达量约为80 mg/L,占分泌型总蛋白的29.4%-30.8%,表明猪β-干扰素基因在毕赤酵母中获得了高效分泌表达。对表达产物进行理化分析发现,重组酵母菌表达的蛋白耐酸（pH2）,对热（56℃）部分敏感,并能被特异性的抗猪β-干扰素抗体中和而不与抗猪γ-干扰素抗体反应。以细胞病变抑制法（CPE50）测定干扰素抗病毒活性,在MDBK（牛肾细胞系）中表达的猪β-干扰素的抗VSV比活性达到2.0×10^6U/mg;对口蹄疫病毒在IBRS-2细胞中的增殖也有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 猪β-干扰素 毕赤酵母 分泌表达 抗病毒活性 口蹄疫病毒

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转Hu-IFN-α基因草鱼F_1代人α-干扰素表达水平的研究 被引量：4

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作者 王红权 章怀云 +3 位作者 张学文 肖调义 苏建明 唐湘北 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期60-62,共3页

为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草... 为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草鱼F1代表达率为52.1%,表达水平偏低,其表达水平受外界因素影响. 展开更多

关键词 人α-干扰素基因 转基因草鱼 酶联免疫吸附法(elisa)

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拉米夫定联合干扰素α-1b用于HBeAg阳性慢乙肝患者效果观察 被引量：4

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作者 李志勤 孙长宇 +1 位作者 余祖江 武淑环 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第7期67-67,共1页

关键词 HBEAG阳性 干扰素Α-1B 拉米夫定 乙肝患者 慢性乙型肝炎 抗病毒治疗

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奶牛β-干扰素在大肠杆菌中高效表达和生物活性分析 被引量：2

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作者 刘颖 刘华兰 +2 位作者 杨利国 陈焕春 郭爱珍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期123-128,共6页

提取经植物血凝素诱导培养的中国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100... 提取经植物血凝素诱导培养的中国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达。表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的40%。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛β-干扰素抗病毒活性分别约3.16×105U/mL,7.5×104U/mL。结果表明,重组奶牛β-干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。本研究为研制和开发重组奶牛β-干扰素类生物制品研发奠定了基础。 展开更多

关键词 奶牛 Β-干扰素 融合蛋白 抗病毒活性

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白介素12、白介素4及γ-干扰素在过敏性紫癜儿童中的表达及意义 被引量：23

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作者 曾巧慧 梅志勇 +2 位作者 钟凤仪 梁少军 陈环 《中国小儿血液》 2005年第6期247-249,266,共4页

目的探讨血清白介素12、白介素4及γ-干扰素在过敏性紫癜患儿中的表达及其临床意义。方法本研究采用ELISA方法检测了35例过敏性紫癜患儿(其中13例合并肾脏损害,并随访8例患儿急性期和缓解期血清细胞因子变化)以及20例正常健康儿童的血... 目的探讨血清白介素12、白介素4及γ-干扰素在过敏性紫癜患儿中的表达及其临床意义。方法本研究采用ELISA方法检测了35例过敏性紫癜患儿(其中13例合并肾脏损害,并随访8例患儿急性期和缓解期血清细胞因子变化)以及20例正常健康儿童的血清白介素12、白介素4及γ-干扰素水平,分别比较急性期和缓解期以及有和无合并肾损害的过敏性紫癜患儿的细胞因子水平;分析白介素12水平与白介素4及γ-干扰素是否存在相关关系。结果1.HSP患儿的血清IL-12及IFN-γ水平低于正常对照组,而IL-4水平高于正常对照组(p值<0.01);2.无肾损害HSP组与HSPN组的血清IL-12、IL-4、IFN-γ水平均无统计学差异;3.HSP患儿急性期的血清IL-12和IFN-γ低于缓解期,p值分别为0.041和0.038;而IL-4高于缓解期,p值<0.01。4.HSP患儿的血清IL-12水平与IFN-γ存在中等程序正相关关系(r=0.437,p<0.01)。结论血清IL-12、IL-4和IFN-γ可能参与HSP的发病过程,但HSPN的发生与其异常并无相关性,造成HSP肾损害的原因尚需进一步探讨。 展开更多

关键词 过敏性紫癜 肾炎 白介素-12 白介素-4 γ-干扰素 细胞因子 白介素12 过敏性紫癜 γ-干扰素 白介素4 健康儿童 IFN-Γ水平 干扰素水平 IL-12 elisa方法

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人源抗HBsAg单链抗体与干扰素嵌合基因的构建及表达 被引量：1

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作者 周世水 粟宽源 +2 位作者 朱明军 姚汝华 余宙耀 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期27-30,41,共5页

采用重叠PCR技术 ,将人源性抗HBsAg单链抗体基因与干扰素 γ 基因用柔性肽段碱基连接成单一基因 .序列测定结果表明 ,克隆的基因与理论上的一致 ,并将此基因成功构建到酵母表达载体pPICZαA上 ,进而转化到巴斯德毕赤酵母 (PichiaPastori... 采用重叠PCR技术 ,将人源性抗HBsAg单链抗体基因与干扰素 γ 基因用柔性肽段碱基连接成单一基因 .序列测定结果表明 ,克隆的基因与理论上的一致 ,并将此基因成功构建到酵母表达载体pPICZαA上 ,进而转化到巴斯德毕赤酵母 (PichiaPastoris)X33中 .筛选出的菌落经甲醇诱导培养 ,对上清液进行SDS PAGE和WESTERNBLOT分析 ,在 4 20 0 0处可见蛋白表达带 。 展开更多

关键词 重叠PCR 人源抗HBsAg单链抗体-干扰素γ嵌合基因 巴斯德毕赤酵母 分泌表达

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