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重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义
被引量：
2
1
作者
陈巧林
李晶
+2 位作者
张翠华
何菁
栗占国
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1146-1149,共4页
目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转...
目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose4B亲和层析及Sephacryl-S100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定。最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体。结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致。用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体。原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63·75%(51/80),明显高于正常人的21·67%(8/37)(P<0·01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者。其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33·33%(13/39)、25·71%(9/35)及33·33%(4/12)。结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义。
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关键词
α-
胞衬蛋白
干燥综合征
抗α-胞衬蛋白抗体
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职称材料
题名
重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义
被引量：
2
1
作者
陈巧林
李晶
张翠华
何菁
栗占国
机构
中国科学院广州生物医药与健康研究院分子诊断研究室
北京大学人民医院风湿免疫科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1146-1149,共4页
文摘
目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose4B亲和层析及Sephacryl-S100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定。最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体。结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致。用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体。原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63·75%(51/80),明显高于正常人的21·67%(8/37)(P<0·01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者。其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33·33%(13/39)、25·71%(9/35)及33·33%(4/12)。结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义。
关键词
α-
胞衬蛋白
干燥综合征
抗α-胞衬蛋白抗体
Keywords
α-
Fodrin
Sjogren＇s syndrome
Anti
-
α-
Fodrin antibody
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义
陈巧林
李晶
张翠华
何菁
栗占国
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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