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microRNA-223过表达与抑制表达慢病毒载体的构建及鉴定被引量：3: 1; 作者王韵吉宁 +2 位作者周敏江潞陈谦明《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期451-455,共5页; 目的构建microRNA-223过表达慢病毒载体及抑制表达慢病毒载体,并验证其过表达或抑制表达microRNA-223的效率。方法设计针对microRNA-223前体的过表达基因片段及针对microRNA-223成熟体的反义片段,应用聚合酶链反应(PCR)调取目的基因及... 展开更多; 关键词 microRNA-223 慢病毒过表达载体抑制表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建被引量：3: 2; 作者常利红黄子真 +4 位作者黄健聪王君陈晓红赖晓萍张革化《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期119-129,共11页; 【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获... 展开更多; 关键词 miR-18a 慢病毒过表达载体抑制载体鼻咽癌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制被引量：4: 3; 作者李木楠李双双 +3 位作者孟凡爽韩鹏张文慧张林波《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期64-69,共6页; 【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率... 展开更多; 关键词 miR-29a-3p 抑制载体巨噬细胞细胞凋亡靶基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究: 4; 作者刘雅琳周艳 +4 位作者耿盼盼解裕萍乔洪图孙茂盛李鸿钧《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期1-5,共5页; 构建携带miR-125a-3p过表达与抑制表达shRNA的慢病毒,研究miR-125a-3p对轮状病毒感染乳鼠导致的腹泻的影响,为进一步研究miR-125a-3p对轮状病毒增殖过程中的影响及探究其机制提供前期研究基础。设计miR-125a-3p前体序列及其反向互补序列... 展开更多; 关键词 miR-125a-3p 慢病毒过表达载体抑制表达载体乳鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名microRNA-223过表达与抑制表达慢病毒载体的构建及鉴定被引量：3: 1; 作者王韵吉宁周敏江潞陈谦明; 机构口腔疾病研究国家重点实验室华西口腔医院口腔黏膜病科(四川大学); 出处《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期451-455,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(81321002 81270040) 新世纪优秀人才支持计划资助项目(NCET-12-0378); 文摘目的构建microRNA-223过表达慢病毒载体及抑制表达慢病毒载体,并验证其过表达或抑制表达microRNA-223的效率。方法设计针对microRNA-223前体的过表达基因片段及针对microRNA-223成熟体的反义片段,应用聚合酶链反应(PCR)调取目的基因及通过退火反应获得双链DNA寡聚核苷酸片段。并通过基因重组技术将目的基因片段及反义片段分别克隆到GV229及GV232慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序比对分析,构建相应的microRNA-223过表达慢病毒载体及抑制表达慢病毒载体。利用荧光定量PCR法检测microRNA-223表达水平。结果对阳性克隆进行PCR鉴定及DNA测序证明,microRNA-223过表达慢病毒载体及抑制表达慢病毒载体构建成功。microRNA-223过表达慢病毒载体能显著提高细胞中microRNA-223表达水平,microRNA-223抑制表达慢病毒载体能明显抑制细胞中microRNA-223表达水平。结论成功构建microRNA-223过表达慢病毒载体及抑制表达慢病毒载体,为进一步研究microRNA-223对口腔癌发生发展的影响及其机制提供了稳定的细胞转染载体。; 关键词 microRNA-223 慢病毒过表达载体抑制表达载体; Keywords micorRNA-223 lentivirus vector overexpression vector suppression vector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建被引量：3: 2; 作者常利红黄子真黄健聪王君陈晓红赖晓萍张革化; 机构中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科; 出处《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期119-129,共11页; 基金广东省科技计划项目(2014A020212619) 广东省自然科学基金博士启动项目(2015A030310073) 广东省自然科学基金(2014A030313142); 文摘【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×10~8TU/mL;转染miR-18a抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调。【结论】成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株。; 关键词 miR-18a 慢病毒过表达载体抑制载体鼻咽癌细胞; Keywords miR-18a lentivirus vectors overexpression vectors siRNA human nasophayngeal cancer cells; 分类号 R766.3 [医药卫生—耳鼻咽喉科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制被引量：4: 3; 作者李木楠李双双孟凡爽韩鹏张文慧张林波; 机构吉林农业大学生命科学学院生物反应器与药物开发教育部工程研究中心; 出处《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期64-69,共6页; 基金吉林省科技发展计划项目(20130101105JC 20140204018YY) +1 种基金吉林农业大学博士科研启动基金(2015015); 文摘【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率,Real time-PCR法检测miR-29a-3p及凋亡相关基因caspase3、caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax的表达水平,流式细胞术检测RAW264.7细胞的凋亡率。【结果】重组抑制载体转染后,细胞内miR-29a-3p表达水平明显下降;而caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax等基因的表达出现不同程度的上调;流式细胞术分析发现随着转染时间延长,细胞凋亡率增加,且36 h凋亡率最高。【结论】p EZX-AM02-miR-29a-3p重组载体可抑制小鼠巨噬细胞中miR-29a-3p的表达,通过靶向上调caspase7、caspase8、Bcl-2和Mcl-1等基因的表达促进巨噬细胞的凋亡。; 关键词 miR-29a-3p 抑制载体巨噬细胞细胞凋亡靶基因; Keywords miR-29a-3p inhibitor vector macrophage cell apoptosis target gene; 分类号 S854.4 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究: 4; 作者刘雅琳周艳耿盼盼解裕萍乔洪图孙茂盛李鸿钧; 机构中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室; 出处《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期1-5,共5页; 基金十二五重大新药创制(2014ZX09102041004) 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2016-I2M) +1 种基金云南省科技计划项目(2014BC008); 文摘构建携带miR-125a-3p过表达与抑制表达shRNA的慢病毒,研究miR-125a-3p对轮状病毒感染乳鼠导致的腹泻的影响,为进一步研究miR-125a-3p对轮状病毒增殖过程中的影响及探究其机制提供前期研究基础。设计miR-125a-3p前体序列及其反向互补序列,与慢病毒骨架质p LVshRNA-EGFP(2A)Puro载体进行酶切连接,构建过表达与抑制表达miR-125a-3p的慢病毒表达载体。利用HEK293Ta细胞包装慢病毒颗粒,测定病毒滴度后,将获得的miR-125a-3p过表达慢病毒颗粒感染MA104细胞和灌胃感染乳鼠,检测miR-125a-3p的表达。同时对乳鼠进行轮状病毒攻毒试验,观察腹泻情况。研究成功构建了过表达及抑制miR-125a-3p表达的慢病毒载体,获得高效的过表达及抑制miR-125a-3p的慢病毒颗粒,成功感染MA104细胞,以及在乳鼠小肠组织有表达。同时发现miR-125a-3p过表达慢病毒感染乳鼠后对轮状病毒引起的腹泻有明显的抑制作用。; 关键词 miR-125a-3p 慢病毒过表达载体抑制表达载体乳鼠; Keywords miR-125a-3p lentivirus vector overexpression vector suppression vector suckling mice; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	microRNA-223过表达与抑制表达慢病毒载体的构建及鉴定	王韵吉宁周敏江潞陈谦明	《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建	常利红黄子真黄健聪王君陈晓红赖晓萍张革化	《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制	李木楠李双双孟凡爽韩鹏张文慧张林波	《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究	刘雅琳周艳耿盼盼解裕萍乔洪图孙茂盛李鸿钧	《生物学杂志》 CAS CSCD	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料