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一株Thuidium cymbifolium内生细菌的鉴定及其抑制真菌活性研究 被引量:4
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作者 谢颖 刘祎炜 +5 位作者 刘安巧 曲如梦 雷梦瑶 王新广 张莉娜 罗先群 《化学与生物工程》 CAS 2020年第12期17-21,共5页
经过表面消毒、研磨和稀释涂布,从海南大羽藓(Thuidium cymbifolium)叶片中分离得到一株对几种常见水果和作物病害的病原菌有较强抑制作用的内生细菌,通过形态观察及分子分析鉴定该菌为绿芽孢杆菌,编号为TC01。用比浊法测定TC01的生长曲... 经过表面消毒、研磨和稀释涂布,从海南大羽藓(Thuidium cymbifolium)叶片中分离得到一株对几种常见水果和作物病害的病原菌有较强抑制作用的内生细菌,通过形态观察及分子分析鉴定该菌为绿芽孢杆菌,编号为TC01。用比浊法测定TC01的生长曲线,发现其生长周期比普通细菌更长,2~6 d为稳定期;在此基础上,进行平板对峙实验和发酵液抑菌实验,对峙实验结果显示TC01对白绢病、香蕉枯萎病、立枯丝核病、芒果炭疽病等4种病原菌有不同程度的抑制作用,最大抑菌率分别是66.9%、59.7%、60.3%和83.0%;发酵液抑菌实验结果显示TC01对蔓枯病、稻瘟病、白绢病、香蕉枯萎病、立枯丝核病、芒果炭疽病等6种病原菌都有抑制作用,其中对白绢病病原菌和立枯丝核病病原菌的抑制效果最好,最大抑菌率分别高达92.8%和92.6%。内生细菌TC01具有较好的生防潜力,有深入研究和开发的价值。 展开更多
关键词 大羽藓 内生细菌 分离纯化 分子鉴定 抑制真菌活性
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水稻几丁质酶的原核表达、复性及体外抑菌活性的研究 被引量:7
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作者 刘宝业 梁国鲁 张增艳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期369-374,共6页
利用RT-PCR反应,从纹枯菌诱导的水稻叶片cDNA中克隆了1个水稻几丁质酶基因RC7的全长编码序列(ORF)。通过亚克隆方法,RC7与原核表达载体pGEX-4T-1上的GST融合,构建成GST-RC7重组蛋白的原核表达载体pGST-RC7,然后,将其转化到大肠杆菌细胞... 利用RT-PCR反应,从纹枯菌诱导的水稻叶片cDNA中克隆了1个水稻几丁质酶基因RC7的全长编码序列(ORF)。通过亚克隆方法,RC7与原核表达载体pGEX-4T-1上的GST融合,构建成GST-RC7重组蛋白的原核表达载体pGST-RC7,然后,将其转化到大肠杆菌细胞中。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式高效表达的GST-RC7。经过洗涤、溶解(变性)、复性及纯化等处理,包涵体中GST-RC7蛋白得到溶解、复性和纯化。纯化的复性GST-RC7蛋白具有几丁质酶活性。对6种重要作物病原真菌进行体外抑菌活性分析的结果表明,RC7可显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯菌、小麦赤霉菌、棉花黄萎菌、烟草赤星菌的菌丝生长,说明RC7可作为上述植物病害抗性基因育种的重要基因。 展开更多
关键词 水稻几丁质酶基因 表达 蛋白质纯化 复性 体外抑制真菌活性
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