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溶血血小板活化因子乙酰基转移酶(LPAFAT)活性检测方法的比较
被引量:
3
1
作者
胡傢椿
董继斌
+3 位作者
楼滨
李英霞
蒋宪成
丁庭波
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期488-495,共8页
目的通过3种方法检测溶血血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)乙酰基转移酶(Lyso-PAF acetyl transferase,LPAFAT)的活性并测定抑制剂对酶活性的抑制作用,比较这些方法的优劣。方法分别采用LC/MS/MS检测产物PAF,巯基反应探...
目的通过3种方法检测溶血血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)乙酰基转移酶(Lyso-PAF acetyl transferase,LPAFAT)的活性并测定抑制剂对酶活性的抑制作用,比较这些方法的优劣。方法分别采用LC/MS/MS检测产物PAF,巯基反应探针结合分光光度法检测产物CoA-SH,TLC检测荧光标记产物法鉴定阳性和假阳性两种不同化合物对LPAFAT酶活性的抑制作用。结果LC/MS/MS方法通过检测天然产物PAF的含量测定酶活性,抑制剂筛选结果准确可靠。巯基反应探针结合分光光度法虽然可以监测产物CoA-SH的含量,但反应体系中产生了大量干扰性的CoA-SH,因此并不能真实反映LPAFAT酶活性,亦不适于抑制剂活性筛选。TLC检测荧光标记产物法因底物NBD-Lyso PC结构已被修饰,不能代表天然底物的真实反应情况,可能存在错筛和漏筛。结论LC/MS/MS检测产物PAF测定LPAFAT活性以及筛选抑制剂,方法灵敏,数据结果可靠,但成本较高。监测产物CoA-SH的含量不适合于测定LPAFAT酶活性。TLC检测荧光标记产物,操作简便,灵敏度高,但筛选抑制剂时存在假阳性的可能,只适用于抑制剂活性的初筛。
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关键词
血小板活化因子(PAF)
Lyso-PAF乙酰基转移酶(LPAFAT)
抑制活性测定
LC/MS/MS
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职称材料
题名
溶血血小板活化因子乙酰基转移酶(LPAFAT)活性检测方法的比较
被引量:
3
1
作者
胡傢椿
董继斌
楼滨
李英霞
蒋宪成
丁庭波
机构
复旦大学药学院药理与生化教研室
复旦大学合成药物化学教研室
复旦大学药学实验教学中心
出处
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期488-495,共8页
基金
国家自然科学基金(31371190,81172975)。
文摘
目的通过3种方法检测溶血血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)乙酰基转移酶(Lyso-PAF acetyl transferase,LPAFAT)的活性并测定抑制剂对酶活性的抑制作用,比较这些方法的优劣。方法分别采用LC/MS/MS检测产物PAF,巯基反应探针结合分光光度法检测产物CoA-SH,TLC检测荧光标记产物法鉴定阳性和假阳性两种不同化合物对LPAFAT酶活性的抑制作用。结果LC/MS/MS方法通过检测天然产物PAF的含量测定酶活性,抑制剂筛选结果准确可靠。巯基反应探针结合分光光度法虽然可以监测产物CoA-SH的含量,但反应体系中产生了大量干扰性的CoA-SH,因此并不能真实反映LPAFAT酶活性,亦不适于抑制剂活性筛选。TLC检测荧光标记产物法因底物NBD-Lyso PC结构已被修饰,不能代表天然底物的真实反应情况,可能存在错筛和漏筛。结论LC/MS/MS检测产物PAF测定LPAFAT活性以及筛选抑制剂,方法灵敏,数据结果可靠,但成本较高。监测产物CoA-SH的含量不适合于测定LPAFAT酶活性。TLC检测荧光标记产物,操作简便,灵敏度高,但筛选抑制剂时存在假阳性的可能,只适用于抑制剂活性的初筛。
关键词
血小板活化因子(PAF)
Lyso-PAF乙酰基转移酶(LPAFAT)
抑制活性测定
LC/MS/MS
Keywords
platelet activating factor(PAF)
Lyso-PAF acetyl transferase(LPAFAT)
inhibitor activity assay
LC/MS/MS
分类号
R963 [医药卫生—微生物与生化药学]
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作者
出处
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1
溶血血小板活化因子乙酰基转移酶(LPAFAT)活性检测方法的比较
胡傢椿
董继斌
楼滨
李英霞
蒋宪成
丁庭波
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
3
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