葛根素调控SIRT1-FOXO1通路抑制成骨细胞凋亡 被引量：1

1

作者 周凡 高扬 +3 位作者 胡艳平 向超 万骐 周茹 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第5期671-675,702,共6页

目的 探讨葛根素(puerarin, PR)调节沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头状转录因子O1(FOXO1)信号通路对类固醇诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法 用浓度为0~50μmol/L的PR及10μmol/L的地塞米松(DEX)共同处理小鼠成骨细胞(MC3T3-E1),MT... 目的 探讨葛根素(puerarin, PR)调节沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头状转录因子O1(FOXO1)信号通路对类固醇诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法 用浓度为0~50μmol/L的PR及10μmol/L的地塞米松(DEX)共同处理小鼠成骨细胞(MC3T3-E1),MTT法筛选最佳PR作用浓度;将MC3T3-E1细胞分为对照组(不进行任何干预)、DEX组(10μmol/L DEX)、PR+DEX组(10μmol/L DEX+40μmol/L PR)、DEX+EX527组(10μmol/L DEX+100 nmol/L的SIRT1抑制剂EX527)、PR+DEX+EX527组(10μmol/L DEX+40μmol/L PR+100 nmol/L EX527),MTT法、流式细胞术、MDC法测定各组细胞增殖活力、凋亡率及细胞自噬数量;Western Blot检测SIRT1-FOXO1通路相关蛋白、自噬标志蛋白Beclin-1、LC3及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果 0~40μmol/L的PR可促进DEX诱导的MC3T3-E1细胞增殖活力,40μmol/L PR处理后MC3T3-E1细胞增殖活力最高,选择40μmol/L PR进行后续实验。与对照组比较,DEX组MC3T3-E1细胞增殖活力、自噬阳性率、SIRT1、FOXO1、Beclin-1、LC3、Bax蛋白表达均降低,凋亡率及Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);与DEX组对比,PR+DEX组凋亡率及Bcl-2蛋白表达降低,上述其余指标均升高(P<0.05),DEX+EX527组凋亡率及Bcl-2蛋白表达升高,上述其余指标均降低(P<0.05);与PR+DEX组对比,PR+DEX+EX527组凋亡率及Bcl-2蛋白表达升高,上述其余指标均降低(P<0.05)。结论 PR可通过激活SIRT1-FOXO1信号通路增强MC3T3-E1细胞自噬进而抑制DEX诱导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 葛根素 沉默信息调节因子1-叉头状转录因子O1 类固醇 成骨细胞 自噬

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成骨细胞特异性转录因子OSF2/CBFA1

2

作者 王伟 《国外医学（口腔医学分册）》 2000年第1期33-35,共3页

文章介绍了CBFA基因编码的OSF2/CBFA1转录因子的结构、对成骨细胞生长分化的影响、对骨基质中非胶原蛋白表达水平的调控以及OSF2/CBFA1与遗传性骨病的关系。OSF2/CBFA1作为一种成骨细胞特异性转录因子调控着骨形成过程中成骨细胞的分化... 文章介绍了CBFA基因编码的OSF2/CBFA1转录因子的结构、对成骨细胞生长分化的影响、对骨基质中非胶原蛋白表达水平的调控以及OSF2/CBFA1与遗传性骨病的关系。OSF2/CBFA1作为一种成骨细胞特异性转录因子调控着骨形成过程中成骨细胞的分化,其详细机理有待深入研究。 展开更多

关键词 OSF2/CBFa1 转录因子 成骨细胞 分化

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成骨细胞特异性转录因子Osterix对骨形成作用的研究进展 被引量：7

3

作者 吴添龙 程细高 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期557-561,共5页

骨形成是一个涉及从间充质干细胞向成骨细胞分化的复杂发育过程,研究骨形成过程中的关键因子并阐明其作用的具体分子机制对骨代谢性疾病的治疗具有重要意义。Osterix(Osx)是迄今为止发现的唯一一个成骨细胞特异性转录因子,Osx只在骨组... 骨形成是一个涉及从间充质干细胞向成骨细胞分化的复杂发育过程,研究骨形成过程中的关键因子并阐明其作用的具体分子机制对骨代谢性疾病的治疗具有重要意义。Osterix(Osx)是迄今为止发现的唯一一个成骨细胞特异性转录因子,Osx只在骨组织细胞中表达,在干细胞向成骨细胞分化过程中起决定性作用,没有Oxs就没有骨形成和骨再生。Osx的发现为整个骨形成领域的研究开启了新的窗口。基于Osx在骨形成过程中的重要地位,研究者们迫切希望开发出作用于Osx的合成代谢分子,这对骨代谢性疾病的治疗将起到革命性的进步,因此对Osx的上下游因子及信号通路之间具体作用机制的进一步研究和阐明显得尤其重要。笔者对其研究进展做一综述。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性转录因子 骨形成

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成骨特异性转录因子——核心结合因子Cbfa1在骨改建中的作用 被引量：6

4

作者 杨瑛 张方明 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期912-914,共3页

成骨细胞由具有多向分化潜能的间充质细胞经骨原细胞、前成骨细胞分化而来,它一旦终末分化以后就分泌产生各种细胞外基质蛋白,如I型胶原、骨桥蛋白（osteopontin）和骨钙素（osteocalcin），并参与骨基质的钙化．

关键词 成骨细胞分化 特异性转录因子 核心结合因子 CBFa1 骨改建 细胞外基质蛋白 多向分化潜能 间充质细胞

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1,25二羟基维生素D_3对大鼠脾调节性T细胞及其特异性转录因子表达的影响 被引量：2

5

作者 李培 祁晓平 +1 位作者 李刚 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 2007年第3期129-131,136,共4页

目的:探讨用1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]预干预对大鼠辅助性T细胞(Th1)免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响。方法:采用近交系大鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和VitD3组。分别给予对照... 目的:探讨用1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]预干预对大鼠辅助性T细胞(Th1)免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响。方法:采用近交系大鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和VitD3组。分别给予对照组和LPS组赋形剂,VitD3组用1,25(OH)2VitD3(0.25μg/只.d-1),连续灌胃14 d。第15天LPS组和VitD3组腹腔注射致死剂量LPS(10 mg/kg)。6 h后处死,用流式细胞仪检测脾CD4+CD25+调节性T细胞比例,用Realtime RT-PCR检测脾中Foxp3 mRNA的表达。结果:1,25(OH)2VitD3明显上调大鼠Th1免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞的比例及其特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达。结论:1,25(OH)2VitD3预干预对大鼠Th1免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3的基因表达有显著影响。1,25(OH)2VitD3有可能通过促进CD4+CD25+调节性T细胞的发育,发挥其免疫调节作用。 展开更多

关键词 1 25二羟基维生素D3 CD4+CD25+调节性T细胞 特异性转录因子Foxp3

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成骨细胞特异性因子-2在病理性瘢痕形成中的作用 被引量：2

6

作者 尹诗璐 秦泽莲 《中国微创外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1137-1139,共3页

病理性瘢痕过度增生不仅影响外形,所带来的瘙痒和疼痛等困扰患者,并且影响重要功能部位的手术效果。对于微创手术而言,皮肤病理性瘢痕异常增生给患者带来新的病痛,往往掩盖“微创”手术本身的优势,过度增生性瘢痕对于微创美容外科更是... 病理性瘢痕过度增生不仅影响外形,所带来的瘙痒和疼痛等困扰患者,并且影响重要功能部位的手术效果。对于微创手术而言,皮肤病理性瘢痕异常增生给患者带来新的病痛,往往掩盖“微创”手术本身的优势,过度增生性瘢痕对于微创美容外科更是不可接受的。目前,病理性瘢痕形成的病理机制尚未阐明, 展开更多

关键词 病理性瘢痕形成 成骨细胞特异性因子 瘢痕过度增生 “微创”手术 微创手术 增生性瘢痕 手术效果 功能部位

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巢湖鸭生长素基因和垂体特异性转录因子1基因的PCR-SSCP检测 被引量：3

7

作者 李俊营 詹凯 +3 位作者 许月英 王德圣 赵瑞宏 唐中节 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第5期107-111,共5页

以生长素基因Ghrelin和垂体特异性转录因子1Pit-1基因为候选基因,采用PCR-SSCP和DNA测序技术检测2个候选基因在巢湖鸭群体中的单核苷酸多态性(SNPs)。结果表明,Ghrelin基因exon 3第54 bp位置有G→A碱基的点突变,在巢湖鸭群体中检测到AA... 以生长素基因Ghrelin和垂体特异性转录因子1Pit-1基因为候选基因,采用PCR-SSCP和DNA测序技术检测2个候选基因在巢湖鸭群体中的单核苷酸多态性(SNPs)。结果表明,Ghrelin基因exon 3第54 bp位置有G→A碱基的点突变,在巢湖鸭群体中检测到AA、AB、BB 3种基因型,A等位基因频率为0.49,B等位基因频率为0.51;在exon 5第149位和166位发生了C→A和G→T的突变,检测到MM、MN、NN 3种基因型,M等位基因频率为0.19,N等位基因频率为0.81。Pit-1基因的2对引物的扩增片段均未检测到多态性,说明所检测的Pit-1基因外显子3和4序列比较保守。 展开更多

关键词 巢湖鸭 生长素基因 垂体特异性转录因子1 SNPS

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在成骨细胞分化过程中调节Osterix转录因子表达和肿瘤坏死因子活性的同源异形盒蛋白Prx1的表达

8

作者 李丽娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期995-995,共1页

肿瘤坏死因子（TNF-α）具有促使骨质疏松发生和抑制骨形成的作用,是骨节炎症中导致骨骼损伤的重要因子。成骨细胞（osteoblast,OB）来源于多能间充质细胞系,是骨形成的主要功能细胞,其按一定的路径分化为成熟骨细胞。Osterix（Osx,SP7... 肿瘤坏死因子（TNF-α）具有促使骨质疏松发生和抑制骨形成的作用,是骨节炎症中导致骨骼损伤的重要因子。成骨细胞（osteoblast,OB）来源于多能间充质细胞系,是骨形成的主要功能细胞,其按一定的路径分化为成熟骨细胞。Osterix（Osx,SP7）是一种OB分化所必需的转录因子。有实验证明如果机体缺乏该转录因子会导致骨骼软骨化。美国科学家的研究曾经报道过一种位于0sx启动子内的TNF抑制元件，这种抑制元件可以用于分离核蛋白，从而介导TNF-α发挥抑制OB分化的作用。 展开更多

关键词 成骨细胞 分化过程 Osterix转录因子表达 肿瘤坏死因子活性 同源异形盒蛋白Prx1

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成骨细胞分化相关转录因子及其调控机制 被引量：1

9

作者 胡铁霞 李祖兵 《国外医学（口腔医学分册）》 2005年第3期178-180,共3页

成骨细胞的分化成熟是骨形成的前提,在该过程中需要多种因素的参与和调控。骨形成相关转录因子是其他因素如生长因子、细胞因子和动力传导的中枢和靶向,在促使间充质祖细胞向功能性成骨细胞的转化过程中起着关键作用。本文将介绍几个常... 成骨细胞的分化成熟是骨形成的前提,在该过程中需要多种因素的参与和调控。骨形成相关转录因子是其他因素如生长因子、细胞因子和动力传导的中枢和靶向,在促使间充质祖细胞向功能性成骨细胞的转化过程中起着关键作用。本文将介绍几个常见的成骨相关转录因子:R unx2、O sterix、M sx1/2和D lx5/6。 展开更多

关键词 相关转录因子 成骨细胞分化 调控机制 OSTERIX RUNX2 生长因子 细胞因子 MSX1 骨形成 功能性 祖细胞 间充质

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体外诱导C2C12细胞向成骨细胞的分化 被引量：4

10

作者 张勇 杨彤涛 +3 位作者 胡运生 廖博 文艳华 范清宇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第5期473-477,共5页

目的成骨细胞特异性转录因子a1(core binding factor a1,Cbfa1)通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。文中构建成Cbfa1,以腺病毒载体转染成肌细胞C2C12,为种子细胞构建组织工程化骨。... 目的成骨细胞特异性转录因子a1(core binding factor a1,Cbfa1)通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。文中构建成Cbfa1,以腺病毒载体转染成肌细胞C2C12,为种子细胞构建组织工程化骨。方法体外培养小鼠成肌细胞C2C12,用重组腺病毒质粒pAd-IL-31介导Cbfa1/Osf2基因瞬时转染小鼠成肌C2C12细胞,Western blot检测Cbfa1蛋白表达。结果 Cbfa1蛋白表达、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定、骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量以及茜素红染色感染组明显高于对照组。结论成肌细胞C2C12可以作为种子细胞构建组织工程化骨。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性转录因子a1 成肌细胞C2C12 Western BLOT

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比较浓缩生长因子提取液和富血小板纤维蛋白提取液对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响 被引量：7

11

作者 魏中武 刘双喜 +1 位作者 陈灼庚 黄谢山 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期901-908,共8页

目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,2... 目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,20%,30%)的DMEM培养基培养MC3T3-E1。分别于培养的第1,3,5,7天,采用MTT法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法检测细胞中ALP的活性;采用定量RTPCR(quantitative RT-PCR,RT-qPCR)检测培养第3和7天细胞中核心结合蛋白因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix,Osx)mRNA表达水平。结果:在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe与PRFe均能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe与PRFe比较,CGFe组细胞的增殖活性高于PRFe组,差异有统计学差异(均P<0.05)。在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组的ALP活性均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组的ALP活性高于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在3,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组Osx和Runx2 mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组Osx mRNA表达水平明显高于PRFe组,Runx2 mRNA表达水平明显低于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:CGFe比PRFe更能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,这可能与其增加ALP活性及上调成骨相关基因Osx的表达有关。 展开更多

关键词 浓缩生长因子提取液 富血小板纤维蛋白提取液 MC3T3-E1 增殖 成骨细胞特异性转录因子 核心结合蛋白因子2

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白藜芦醇介导SIRT1干预地塞米松诱导成骨细胞线粒体自噬的研究 被引量：5

12

作者 王帆 王鹏皓 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第2期97-102,共6页

目的研究白藜芦醇(RES)参与糖皮质激素诱导的成骨细胞线粒体自噬的作用机制。方法体外培养人成骨细胞hFob1.19,地塞米松(DEX)诱导细胞线粒体自噬,使用不同浓度的RES(10^(-8)~10^(-6)mol/L)处理成骨细胞5~120 min,CCK-8法检测成骨细胞的... 目的研究白藜芦醇(RES)参与糖皮质激素诱导的成骨细胞线粒体自噬的作用机制。方法体外培养人成骨细胞hFob1.19,地塞米松(DEX)诱导细胞线粒体自噬,使用不同浓度的RES(10^(-8)~10^(-6)mol/L)处理成骨细胞5~120 min,CCK-8法检测成骨细胞的增殖,透射电镜检测成骨细胞内的自噬小体,酶联免疫吸附实验、实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)、caspase 3、转录沉默信息调节因子1(SIRT1)、细胞自噬标志蛋白(LC3和Beclin1)和细胞线粒体自噬标志蛋白(TOM20和Hsp60)的活性表达。结果DEX和RES作用成骨细胞2 h后,RES可明显减弱DEX对细胞增殖的抑制作用(P<0.05);透射电镜显示,DEX+RES组自噬小体明显少于DEX组(P<0.05);DEX可明显抑制成骨细胞内ALP活性,而RES明显改善了DEX对ALP蛋白活性的抑制作用(P<0.05);RES可导致成骨细胞内caspase 3的蛋白活性明显降低(P<0.05);RES以剂量依赖性和时间依赖性的方式增强成骨细胞中SIRT1的活性表达;RES单独作用成骨细胞,可显著抑制LC3和Beclin1 mRNA表达(P<0.05),并降低细胞内TOM20(线粒体自噬标记蛋白)和Hsp60(线粒体基质自噬标记蛋白)的蛋白活性;RES可部分抑制DEX对成骨细胞线粒体自噬的激活效应。结论RES通过上调SIRT1而增强成骨细胞的增殖活性,并抑制DEX诱导的成骨细胞线粒体自噬的发生。 展开更多

关键词 转录沉默信息调节因子1 白藜芦醇 成骨细胞 线粒体自噬 骨质疏松症 糖皮质激素

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ETS1转录上调FBXO45通过EMT而促进肝癌的侵袭迁移

13

作者 朱贞宝 吴飞繁 +2 位作者 顾永鹏 谢传明 张雷达 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第12期1332-1341,共10页

目的探究E26转化特异性转录因子1(E26 transformation-specific 1,ETS1)和F-盒蛋白45(F-box protein 45,FBXO45)在人肝癌细胞中侵袭转移的影响和潜在的分子机制。方法采用Jaspar、hTFtarget、Cistrome转录因子数据库预测网站预测FBXO45... 目的探究E26转化特异性转录因子1(E26 transformation-specific 1,ETS1)和F-盒蛋白45(F-box protein 45,FBXO45)在人肝癌细胞中侵袭转移的影响和潜在的分子机制。方法采用Jaspar、hTFtarget、Cistrome转录因子数据库预测网站预测FBXO45的转录因子。根据各个数据库预测的结果取交集,对筛选出的候选转录因子分别在高转移人肝癌细胞(highmetastatichumanhepatocellular carcinoma cell line,HCCLM3)和人肝癌细胞(human hepatocellular carcinoma cell line,Huh7)中敲低各个的基因表达后检测FBXO45的表达情况,选出对FBXO45表达影响最显著的一个分析并采用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验验证与FBXO45启动子的结合情况,确定FBXO45潜在的转录因子。在肝癌细胞HCCLM3和Huh7中过表达ETS1后通过Transwell实验检测其对肝癌细胞侵袭迁移的影响和通过Western blot检测上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达变化情况。在过表达ETS1情况下敲低FBXO45检测对其侵袭迁移能力的影响。结果通过预测FBXO45转录因子后取交集筛选出3个候选转录因子,分别是ETS1、SPI1和YY1)。在HCCLM3和huh7细胞中分别敲低ETS1、SPI1和YY1,结果发现ETS1敲低后显著导致了FBXO45的表达降低(P<0.05)。根据癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据和基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)数据的分析显示,ETS1和FBXO45表达水平呈显著正相关(R=0.31,P<0.0001;R=0.40,P=0.0219)。ChIP实验结果提示,ETS1可以和FBXO45启动子序列特异性结合而调控其表达,证实了ETS1为FBXO45潜在的转录因子。然后在肝癌细胞HCCLM3和Huh7中过表达ETS1后发现细胞侵袭迁移能力明显增加,并上调了N-cadherin、Snail蛋白的表达(P<0.01)。此外,在ETS1过表达的情况下敲低FBXO45后可以显著抑制其侵袭迁移能力(P<0.01)。结论ETS1激活FBXO45的转录使其高表达而通过EMT途径增强肝癌细胞的侵袭和迁移,促进肝癌进展。 展开更多

关键词 肝癌 E26转化特异性转录因子1 上皮间充质转化 侵袭转移

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猪垂体特异性转录因子的研究进展 被引量：2

14

作者 王政坤 王钦德 《畜牧兽医科技信息》 2006年第9期11-12,共2页

垂体特异性转录因子(PIT-1)是POU结构域因子家族的一员,POU结构域因子家族是一类转录调节基因.Pit～1发挥生物学功能的关键在于识别特异的基因顺序并与之结合,从而引起细胞内基因转录,促进垂体前叶促生长素细胞(S.Matotraphs)、催乳细胞... 垂体特异性转录因子(PIT-1)是POU结构域因子家族的一员,POU结构域因子家族是一类转录调节基因.Pit～1发挥生物学功能的关键在于识别特异的基因顺序并与之结合,从而引起细胞内基因转录,促进垂体前叶促生长素细胞(S.Matotraphs)、催乳细胞(1actot.oph)和促甲状腺素细胞(thyvotroph)基因的转录,其生物学活性由它特有的分子结构决定。随着生物技术的发展与应用,该基因在人、猪和牛已被定位标记。本文对猪的垂体特异性转录因子的研究作一简要综述。 展开更多

关键词 猪 垂体特异性转录因子(PIT-1) 表达

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转录因子IRF8和PU.1负调控浆细胞分化

15

作者 邓嘉成 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-16,共1页

B细胞激活后会经过免疫球蛋白类型转换重组并分化为分泌抗体的浆细胞。已知两组转录因子拮抗调控着B细胞和浆细胞的转录组：BCL6和PAX5维持着B细胞的形态;IRF4和BLIMP-1则促进浆细胞化的过程。尽管之前许多报道都提示,IRF8和PU.1这两种... B细胞激活后会经过免疫球蛋白类型转换重组并分化为分泌抗体的浆细胞。已知两组转录因子拮抗调控着B细胞和浆细胞的转录组：BCL6和PAX5维持着B细胞的形态;IRF4和BLIMP-1则促进浆细胞化的过程。尽管之前许多报道都提示,IRF8和PU.1这两种转录因子在B细胞的发育和功能中起着作用,但在B细胞特异性敲除了任意一个转录因子后,B细胞的发育和功能都没有受到影响。 展开更多

关键词 IRF8 PU.1 转录因子 细胞特异性 免疫球蛋白类型 负调控 分泌抗体 启动子 髓系 模体

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神经肽P物质通过诱导RUNX2表达对小鼠成骨细胞增殖能力的影响 被引量：10

16

作者 余炜 朱超 +3 位作者 茅伟伟 赵恩典 孟胜伟 蒋盛旦 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期15-20,共6页

目的·探讨神经肽P物质(SP)对转录因子RUNX2表达的调控及其对成骨细胞增殖能力的影响。方法·体外分离C57BL/6J小鼠颅骨来源的原代成骨细胞,通过转染si RNA沉默成骨细胞RUNX2基因的表达。将SP、Spantide(SP抑制剂)、L703606(NK-... 目的·探讨神经肽P物质(SP)对转录因子RUNX2表达的调控及其对成骨细胞增殖能力的影响。方法·体外分离C57BL/6J小鼠颅骨来源的原代成骨细胞,通过转染si RNA沉默成骨细胞RUNX2基因的表达。将SP、Spantide(SP抑制剂)、L703606(NK-1受体抑制剂)以及RUNX2 si RNA进行配伍作用于成骨细胞,观察SP对成骨细胞RUNX2表达的调控及对成骨细胞增殖能力的影响。成骨细胞增殖活性的检测采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8法)。通过real-time PCR和Western blotting技术检测SP对RUNX2在m RNA和蛋白表达水平的调控。结果·CCK-8法检测结果显示,浓度为10^(-12)~10^(-6) mol/L的SP促进小鼠成骨细胞增殖,10^(-8) mol/L为其最佳浓度。10^(-8) mol/L SP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2的m RNA和蛋白表达水平较对照组明显升高,Spantide和L703606抑制SP对RUNX2表达的诱导。RUNX2 si RNA降低成骨细胞基础增殖水平,同时也抑制了SP对成骨细胞的促增殖作用。结论·SP通过与NK-1受体结合诱导转录因子RUNX2的表达,进而增强成骨细胞增殖能力。 展开更多

关键词 神经肽P物质 成骨细胞 转录因子RUNX2 NK-1受体

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SENP3对大鼠成骨细胞端粒酶活性及端粒长度的影响 被引量：1

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作者 史素琴 潘研 +1 位作者 岳新 赵璐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2043-2048,共6页

目的:研究sentrin特异性蛋白酶3(SENP3)对大鼠成骨细胞端粒酶活性及端粒长度的影响。方法:首先0.2 mmol/L H_2O_2处理体外培养的大鼠成骨细胞后,Western blotting法检测SENP3及特异性蛋白1(Sp1)的表达。pc DNA3.0-SENP3转染成骨细胞,分... 目的:研究sentrin特异性蛋白酶3(SENP3)对大鼠成骨细胞端粒酶活性及端粒长度的影响。方法:首先0.2 mmol/L H_2O_2处理体外培养的大鼠成骨细胞后,Western blotting法检测SENP3及特异性蛋白1(Sp1)的表达。pc DNA3.0-SENP3转染成骨细胞,分别于24 h、48 h、72 h后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力的变化。转染48 h后,Western blotting法检测Sp1和端粒酶逆转录酶(TERT)的表达,PCR-TRAP法及PCR法检测端粒酶活性及端粒长度;ELISA检测上清中碱性磷酸酶(ALP)和骨桥蛋白(OPN)的含量;放射免疫法(RIA)检测骨钙蛋白(OCN)的含量。最后将pc DNA3.0-SENP3与siRNA-Sp1共转染成骨细胞,并检测以上指标。结果:H_2O_2处理成骨细胞后,SENP3和Sp1的表达显著上升。pc DNA3.0-SENP3转染成骨细胞后,Sp1和TERT的表达显著上升,细胞活力、ALP、OPN及OCN含量也都显著上升;端粒酶活性显著增加及端粒长度缩短显著延缓。而当pc DNA3.0-SENP3与siRNA-Sp1共转染成骨细胞后,细胞活力,ALP、OPN及OCN含量,端粒酶活性及端粒长度均未发生显著变化。结论:SENP1通过上调Sp1的表达促进TERT的表达,增加端粒酶活性上升及延缓端粒长度缩短,从而增强成骨细胞增殖能力。 展开更多

关键词 Sentrin特异性蛋白酶3 特异性蛋白1 端粒酶逆转录酶 成骨细胞 端粒酶

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新生儿脐血单个核细胞ICOS与转录因子表达的观察

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作者 闫莉 刘恩梅 黄英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期149-149,156,共2页

关键词 特异性转录因子 脐血单个核细胞 新生儿脐血 CD4+CD25+调节性T细胞 因子表达 ICOS Th1/Th2 可诱导共刺激因子

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FoxO1在持续张应力促MC3T3-E1细胞成骨向分化中的表达变化 被引量：5

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作者 欧阳宁鹃 张鹏 +3 位作者 傅润卿 王洁 房兵 江凌勇 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期154-158,166,共6页

目的研究体外持续张应力对MC3T3-E1细胞成骨向分化过程中Forkhead转录因子1(Forkhead box protein O1,Fox O1)表达的影响,探讨Fox O1在持续张应力促进骨向分化机制中的作用。方法 MC3T3-E1细胞接种,应用FX-4000TTM细胞应力加载系统予以... 目的研究体外持续张应力对MC3T3-E1细胞成骨向分化过程中Forkhead转录因子1(Forkhead box protein O1,Fox O1)表达的影响,探讨Fox O1在持续张应力促进骨向分化机制中的作用。方法 MC3T3-E1细胞接种,应用FX-4000TTM细胞应力加载系统予以体外力学干预。施加频率1 Hz、幅度10%的张应力,按照加力时间长短分为对照和1、4、6、12、24、48、72 h组。运用酶化学染色、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、细胞免疫荧光等方法观察持续张应力对MC3T3-E1成骨能力变化的影响及Fox O1基因、蛋白表达和细胞定位情况。结果 (1)持续张应力能够促进MC3T3-E1骨向分化。细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达量在24、48 h显著高于对照组,骨钙素(osteocalcin,OCN)表达水平于72 h达峰值并显著高于对照组,骨特异性转录因子(runt-related transcription factor-2,Runx2)表达量在4 h与对照组相比显著升高,其蛋白表达量也随加力时间而改变。加力组ALP染色结果与对照组有显著差异。(2)持续张应力促进Fox O1的基因和蛋白表达。Fox O1基因表达水平24 h增高最明显,其蛋白表达量于12 h显著上升。(3)加力6 h Fox O1胞核聚集,胞浆可见,但于24 h转位在胞浆大量表达。结论 10%持续张应力可以促进MC3T3-E1的成骨向分化,同时Fox O1基因和蛋白表达上调、蛋白定位改变。探寻Fox O1表达水平和定位情况在力学刺激下的变化规律,可为研究其在力学刺激中发挥的作用提供实验基础。 展开更多

关键词 Forkhead转录因子1 持续张应力 骨向分化 成骨细胞

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类转录激活因子效应物核酸酶介导的E-cad和Bmi-1基因联合干预鼻咽癌的体外研究 被引量：8

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作者 罗婷婷 严爱芬 +6 位作者 刘连 蒋泓 冯翠兰 刘冠男 刘芳 唐冬生 周天鸿 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期229-239,共11页

目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion regi... 目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi-1)基因联合干预对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法:构建多位点基因打靶载体p UC-DS1-E-cad-2ANeo-DS2(以下简称E-cad打靶载体)和p UC-DS1-Bmi-1 sh RNA-Zeo-DS2(以下简称Bmi-1打靶载体),将E-cad打靶载体、Bmi-1打靶载体及佛山科学技术学院分子医学研究院前期构建的TALEN载体以不同组合转染鼻咽癌CNE-2细胞。采用PCR检测靶基因的整合,Western印迹检测靶基因蛋白表达水平变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力变化。结果:靶基因E-cad和Bmi-1 sh RNA表达元件成功整合到鼻咽癌CNE-2细胞的基因组中;转染后鼻咽癌CNE-2细胞中E-cad的蛋白表达水平明显上升,Bmi-1的蛋白表达水平明显下降;干预E-cad及Bmi-1不影响细胞的增殖、周期和凋亡,但显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,且E-cad和Bmi-1联合干预比单独干预更能显著抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外迁移能力(均P<0.01)。结论:TALEN介导的E-cad和Bmi-1联合干预能有效抑制鼻咽癌CNE-2细胞的体外迁移和侵袭,可为人类癌症的基因治疗建立前期的实验基础。 展开更多

关键词 类转录激活因子效应物核酸酶 E-钙黏蛋白 B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1 基因打靶 鼻咽癌

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