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MC3T3E1细胞分化过程中Cbfα1及相关基因的表达
1
作者
刘敏
周后德
+2 位作者
何玉玲
谢辉
廖二元
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期118-123,共6页
目的研究在小鼠前成骨细胞MC3T3E1诱导成骨过程中,总Cbfα1、Cbfα1两种亚型Cbfα1P56、Cbfα1P57及碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白和骨桥素在前成骨细胞成熟过程中的变化。明确Cbfα1、Cbfα1亚型及相关基因表达与成骨细胞分...
目的研究在小鼠前成骨细胞MC3T3E1诱导成骨过程中,总Cbfα1、Cbfα1两种亚型Cbfα1P56、Cbfα1P57及碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白和骨桥素在前成骨细胞成熟过程中的变化。明确Cbfα1、Cbfα1亚型及相关基因表达与成骨细胞分化的关系,探求与成骨细胞成熟更密切相关的Cbfα1亚型,为进一步的Cbfα1亚型研究提供基础。方法MC3T3E1细胞在含β甘油磷酸钠,抗坏血酸的培养基中培养22d,在细胞培养的不同时间(0,4,10,14,18,22d),用α磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;VanGieSon苦味酸酸性复红染色法染色细胞Ⅰ型胶原;茜素红染色观察矿化结节形成;半定量RTPCR检测总Cbfα1mRNA及Cbfα1P56、Cbfα1P57mRNA和Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白、骨桥素mRNA的表达;用Westernblot检测Cbfα1蛋白的表达。结果MC3T3E1细胞在β甘油磷酸钠存在的情况下,培养第18d开始出现矿化,第22dⅠ型胶原染色及茜素红染色均观察到明显矿化结节形成。随MC3T3E1细胞的分化,Cbfα1mRNA的表达量逐渐增高,Cbfα1P57mRNA在第18和22d的表达量明显增高,Cbfα1P56mRNA无变化。Cbfα1蛋白随MC3T3E1细胞的分化,表达量逐渐增高。同样,随MC3T3E1细胞分化,Ⅰ型胶原、骨钙素、骨桥素和骨涎蛋白mRNA的表达量逐渐增高。ALP活性0～10d逐渐增高,10d后逐渐下降。结论在MC3T3E1细胞的分化过程中Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白、骨桥素mRNA随MC3T3E1细胞的分化表达逐渐增高。Cbfα1mRNA及Cbfα1蛋白的表达随细胞的分化逐渐增高,与其他成骨特异性基因的变化趋势一致,并以Cbfα1P57mRNA亚型为主。Cbfα1P57亚型的表达与成骨分化的关系更密切,在进一步的与成骨细胞分化有关的Cbfα1亚型研究应以Cbfα1P57亚型为主。
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关键词
MC3T3E1
细胞
Cbfα1
细胞
分化
成骨细胞特异性基因
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题名
MC3T3E1细胞分化过程中Cbfα1及相关基因的表达
1
作者
刘敏
周后德
何玉玲
谢辉
廖二元
机构
中南大学湘雅第二医院代谢内分泌研究所
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期118-123,共6页
文摘
目的研究在小鼠前成骨细胞MC3T3E1诱导成骨过程中,总Cbfα1、Cbfα1两种亚型Cbfα1P56、Cbfα1P57及碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白和骨桥素在前成骨细胞成熟过程中的变化。明确Cbfα1、Cbfα1亚型及相关基因表达与成骨细胞分化的关系,探求与成骨细胞成熟更密切相关的Cbfα1亚型,为进一步的Cbfα1亚型研究提供基础。方法MC3T3E1细胞在含β甘油磷酸钠,抗坏血酸的培养基中培养22d,在细胞培养的不同时间(0,4,10,14,18,22d),用α磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;VanGieSon苦味酸酸性复红染色法染色细胞Ⅰ型胶原;茜素红染色观察矿化结节形成;半定量RTPCR检测总Cbfα1mRNA及Cbfα1P56、Cbfα1P57mRNA和Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白、骨桥素mRNA的表达;用Westernblot检测Cbfα1蛋白的表达。结果MC3T3E1细胞在β甘油磷酸钠存在的情况下,培养第18d开始出现矿化,第22dⅠ型胶原染色及茜素红染色均观察到明显矿化结节形成。随MC3T3E1细胞的分化,Cbfα1mRNA的表达量逐渐增高,Cbfα1P57mRNA在第18和22d的表达量明显增高,Cbfα1P56mRNA无变化。Cbfα1蛋白随MC3T3E1细胞的分化,表达量逐渐增高。同样,随MC3T3E1细胞分化,Ⅰ型胶原、骨钙素、骨桥素和骨涎蛋白mRNA的表达量逐渐增高。ALP活性0～10d逐渐增高,10d后逐渐下降。结论在MC3T3E1细胞的分化过程中Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白、骨桥素mRNA随MC3T3E1细胞的分化表达逐渐增高。Cbfα1mRNA及Cbfα1蛋白的表达随细胞的分化逐渐增高,与其他成骨特异性基因的变化趋势一致,并以Cbfα1P57mRNA亚型为主。Cbfα1P57亚型的表达与成骨分化的关系更密切,在进一步的与成骨细胞分化有关的Cbfα1亚型研究应以Cbfα1P57亚型为主。
关键词
MC3T3E1
细胞
Cbfα1
细胞
分化
成骨细胞特异性基因
Keywords
MC3T3E1 cell line
Cbfα1
Collagen Ⅰ
Osteocalcin
Osteopontin
Bone sialoprotein
Alkaline
分类号
R336 [医药卫生—人体生理学]
R285.5 [医药卫生—中药学]
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作者
出处
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1
MC3T3E1细胞分化过程中Cbfα1及相关基因的表达
刘敏
周后德
何玉玲
谢辉
廖二元
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2006
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