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承德无角山羊耳成纤维细胞系的建立与冷冻保存研究 被引量:1
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作者 孙清漪 李梦奇 +8 位作者 赵炜 张文涛 张效生 张金龙 张洪军 房晓欢 陶晨雨 夏威 李俊杰 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期183-192,共10页
【目的】试验以甜菜碱作为冷冻保护剂对承德无角山羊耳成纤维细胞系进行冷冻保存,旨在优化冷冻保护效果,以期在细胞水平上长期保存这一地方品种家畜的遗传资源。【方法】采用组织块培养法建立承德无角山羊耳成纤维细胞系,利用甜菜碱作... 【目的】试验以甜菜碱作为冷冻保护剂对承德无角山羊耳成纤维细胞系进行冷冻保存,旨在优化冷冻保护效果,以期在细胞水平上长期保存这一地方品种家畜的遗传资源。【方法】采用组织块培养法建立承德无角山羊耳成纤维细胞系,利用甜菜碱作为冷冻保护剂对其进行玻璃化冷冻,以不同浓度(5%、10%、15%、20%及25%)甜菜碱为试验组,以不同浓度(10%和20%)二甲基亚砜(DMSO)为对照组,对承德无角山羊耳成纤维细胞进行冷冻,复苏后检测细胞的存活率、增殖活力以及细胞中B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因表达量,同时评估甜菜碱的毒性。【结果】本研究建立的承德无角山羊耳成纤维细胞系生长态势良好,细胞纯度较高,细菌、真菌和支原体3类微生物检测结果均为阴性,生长曲线呈S型,达到了建立成纤维细胞系的要求;当甜菜碱浓度为15%时细胞存活率最高,达90.86%,极显著高于对照组(P<0.01),细胞增殖活力及Bcl-2/Bax基因表达量均显著高于对照组(P<0.05),且甜菜碱的毒性远低于传统冷冻保护剂DMSO(P<0.05)。【结论】试验成功以甜菜碱作为单独的冷冻保护剂对承德无角山羊耳成纤维细胞系进行低温冷冻保存,从而保护了承德无角山羊的遗传资源。 展开更多
关键词 承德无角山羊 成纤维细胞系 冷冻保存 甜菜碱
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小尾寒羊耳组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究 被引量:26
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作者 关伟军 马月辉 +3 位作者 丁鸿 于太永 张海艳 梁海青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期511-516,共6页
Taking Small Tail Han Sheeps ear margin as the study materials, we succeeded in establishing a fibroblast cell bank which content of samples was 52 by the method of explant culture directly and cryopreservation techni... Taking Small Tail Han Sheeps ear margin as the study materials, we succeeded in establishing a fibroblast cell bank which content of samples was 52 by the method of explant culture directly and cryopreservation technique. The biological analysis results showed that population doubling time (PDT) of cells was approximately 24 h, diploid account for 90%~96% in chromosome. Confirmed by isoenzyme analysis,this cell line had no cross-contamination.The test results of the bacterium, fungi, virus, mycoplasma were negative. The transfection rate was high, and the extro-gene can be effectively expressed. Every indexes of the cell bank met all the standard quality controls of ATCC. It had not only preserved the germplasm resources of this important Small Tail Han Sheep on the cell level but also provided valuable material for the research of genome, postgenome and somacloning. Meanwhile, the setting-up of this technological platform will offer technology and theory for storing the cell genetic resources of other animals and poultry. 展开更多
关键词 成纤维细胞系 特性研究 小尾寒羊 生物学 1999年 1995年 组织 资源危机 畜禽品种 世界范围 信息调查 地方品种 灭绝 专门化 濒危 比例 种质 遗传
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天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究 被引量:9
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作者 冯若飞 马忠仁 +4 位作者 关伟军 李明生 乔自林 冯玉萍 周雪雁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期726-732,共7页
采集天祝白牦牛胚胎肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法继代培养和细胞纯化,扩增至F3代后冷冻保存,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进... 采集天祝白牦牛胚胎肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法继代培养和细胞纯化,扩增至F3代后冷冻保存,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示,原代和传代细胞生长形态良好,群体倍增时间为27.2 h;染色体2n=60;二倍体为74%,占主体;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,LDH5浓度较高,活性较强;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明本研究已成功建立天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系,该细胞系的建立,使天祝白牦牛这一国家重要种质资源在细胞水平上得以保存,也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。 展开更多
关键词 天祝白牦牛 肾组织 成纤维细胞系 生物学特性
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滩羊成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究 被引量:7
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作者 陈亮 刘丑生 +3 位作者 王新庄 赵俊金 李天达 孟飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第6期50-54,共5页
试验以滩羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻保存技术构建了35个滩羊成纤维细胞系,并对其进行了形态学、生长动力学、细胞活力测定、核型分析、微生物检测和荧光蛋白报告质粒(PEGFP-N3)基因转染等生物学特性的研究。结果... 试验以滩羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻保存技术构建了35个滩羊成纤维细胞系,并对其进行了形态学、生长动力学、细胞活力测定、核型分析、微生物检测和荧光蛋白报告质粒(PEGFP-N3)基因转染等生物学特性的研究。结果表明,细胞群体倍增时间(PDT)约为36h,细胞冻存后活力为95.8%,细胞染色体中二倍体(2n=54)占主体,镜检细胞的百分比约为97.5%。细菌、真菌、病毒和支原体检测结果为阴性,该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。 展开更多
关键词 滩羊 成纤维细胞系 基因转染 生物学特性研究
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转双基因(pGH/IGF-Ⅰ)猪胎儿成纤维细胞系的建立及鉴定 被引量:5
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作者 李晓玲 于光辉 孙金海 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第8期2053-2059,共7页
本研究旨在建立转双基因(pGH/IGF-Ⅰ)猪胎儿成纤维细胞系,保存转双基因猪的成纤维细胞以便于后续细胞水平研究。试验采用胰蛋白酶消化法对猪胎儿躯干组织进行原代培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功分离出转双基因猪胎儿成纤... 本研究旨在建立转双基因(pGH/IGF-Ⅰ)猪胎儿成纤维细胞系,保存转双基因猪的成纤维细胞以便于后续细胞水平研究。试验采用胰蛋白酶消化法对猪胎儿躯干组织进行原代培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功分离出转双基因猪胎儿成纤维细胞,并对细胞进行了形态学观察、冻存前和复苏后细胞活力检测、生长动力学分析、波形蛋白免疫组化及微生物污染检测等生物学特性分析。结果显示,原代细胞经过胰蛋白酶消化和差速离心分离培养出成纤维细胞,冻存前细胞活力为94.3%,冻存3个月后细胞复苏后活力为91.2%;细胞生长总趋势呈"S"型,经历了潜伏期、指数生长期和平台期3个阶段;细胞波形蛋白在成纤维细胞中呈阳性反应;细胞的细菌、真菌、病毒和支原体检测均为阴性。结果表明本试验成功建立了转双基因猪成纤维细胞系。 展开更多
关键词 转双基因猪 成纤维细胞系 细胞培养 生物学特性
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贵德黑裘皮羊耳成纤维细胞系的建立和生物学特性的研究 被引量:9
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作者 陆会宁 刘丑生 +3 位作者 王志刚 张利平 赵俊金 孟飞 《中国草食动物》 2007年第2期3-6,共4页
以贵德黑裘皮羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻技术成功构建了成纤维细胞系,并对培养细胞进行了形态学、生长动力学观察、细胞活力测定、核型分析和微生物检测。结果表明:细胞群体倍增时间(PDT)约为36h,冻存前细... 以贵德黑裘皮羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻技术成功构建了成纤维细胞系,并对培养细胞进行了形态学、生长动力学观察、细胞活力测定、核型分析和微生物检测。结果表明:细胞群体倍增时间(PDT)约为36h,冻存前细胞活力为96.2%,以DMEM/F-12+20%FBS中添加10%DMSO冻存成纤维细胞,解冻后细胞活力为93.6%,24h后的贴壁率为85%。在传代10次之前,细胞染色体中二倍体(2n=54)占主体,约为82%~90%,细菌、真菌、病毒、支原体检测为阴性。该细胞系的建立,使贵德黑裘皮羊这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来,也为体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。 展开更多
关键词 贵德黑裘皮羊 成纤维细胞系 细胞培养 生物学特性
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奶山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析 被引量:1
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作者 马呈瑞 常卫华 +3 位作者 曹会萍 张改平 卢清侠 张勇 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期16-20,共5页
试验分别采用组织块贴壁法和消化分离法对奶山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功建立了奶山羊胎儿成纤维细胞系,并对该细胞系进行了形态学观察、生长动力学分析、细胞活力测定、核型分析和微生物检... 试验分别采用组织块贴壁法和消化分离法对奶山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功建立了奶山羊胎儿成纤维细胞系,并对该细胞系进行了形态学观察、生长动力学分析、细胞活力测定、核型分析和微生物检测等多种生物学特性分析.结果表明:成纤维细胞原代培养采用贴块培养时所需时间较长,消化培养有较多死细胞;传代细胞生长情况良好,群体倍增时间(PDT)约为40.4h;生长总体趋势呈"S"型;冻存后活力为92.3%,生长状况与冻存前一致;细胞染色体中二倍体(2 n=60)占主体;细菌、真菌和支原体检测结果均为阴性,细胞系的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准. 展开更多
关键词 奶山羊 成纤维细胞系 细胞培养 生物学特性
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蓝莓花色苷对鸡胚成纤维细胞系生长的影响 被引量:1
8
作者 王丹 黄紫藤 +1 位作者 马越 赵晓燕 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2016年第8期13-16,共4页
以花色苷含量为21.34%的蓝莓花色苷粉末为原料,采用MTT法、显微镜观察法,同时利用细胞计数仪测定细胞活率,3种方法共同检测蓝莓花色苷作用于鸡胚成纤维细胞系的细胞毒性,以完成细胞试验模型的建立。结果表明t50~100μg/mL的蓝... 以花色苷含量为21.34%的蓝莓花色苷粉末为原料,采用MTT法、显微镜观察法,同时利用细胞计数仪测定细胞活率,3种方法共同检测蓝莓花色苷作用于鸡胚成纤维细胞系的细胞毒性,以完成细胞试验模型的建立。结果表明t50~100μg/mL的蓝莓花色苷可以促进鸡胚成纤维细胞生长。高于100μg/mL的蓝莓花色苷,对细胞生长产生抑制作用。该结果可为进一步拓展花色苷功能性研究,以及以鸡胚成纤维细胞为模型的生物功能性研究提供理论依据。 展开更多
关键词 蓝莓花色苷 鸡胚成纤维细胞系 MTT法
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晋中绵羊耳成纤维细胞系建立 被引量:3
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作者 李振 靳辉 +1 位作者 黄洋 张春香 《中国草食动物》 2012年第3期9-12,共4页
以晋中绵羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法,通过原代培养和传代培养对细胞进行了细胞形态学观察、细胞计数和生长曲线的绘制,探讨了细胞体外培养模式。结果:细胞生长总体趋势呈"S"型;建立了晋中绵羊耳成纤维细胞系,细... 以晋中绵羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法,通过原代培养和传代培养对细胞进行了细胞形态学观察、细胞计数和生长曲线的绘制,探讨了细胞体外培养模式。结果:细胞生长总体趋势呈"S"型;建立了晋中绵羊耳成纤维细胞系,细胞系的建立,使晋中绵羊的重要种质资源在细胞水平上保存下来。 展开更多
关键词 晋中绵羊 成纤维细胞系 细胞培养
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岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究
10
作者 冯若飞 马忠仁 +3 位作者 乔自林 李明生 冯玉萍 关伟军 《中国草食动物》 2011年第1期5-9,共5页
采集岷县黑裘皮羊肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法进行继代培养和细胞纯化,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示:... 采集岷县黑裘皮羊肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法进行继代培养和细胞纯化,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示:原代和传代细胞生长形态均好,群体倍增时间为28.3 h;染色体2 n=54,二倍体占主体(84%)乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,未见LDH4、LDH5谱带,与其它羊有明显区别;外源性荧光蛋白转染质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明该研究已成功建立岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系,为在细胞水平上保存岷县黑裘皮羊种质资源以及进行相关研究提供了理想的生物材料。 展开更多
关键词 岷县黑裘皮羊 肾组织 成纤维细胞系 生物学特性
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云南半细毛羊成纤维细胞系建立及其生物学特性分析 被引量:5
11
作者 吴帅帅 李东江 +3 位作者 吕春荣 权国波 郭成裕 洪琼花 《中国草食动物科学》 CAS 2013年第1期17-20,共4页
实验采用组织块贴壁培养法首次对云南半细毛羊耳缘组织进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了云南半细毛羊耳缘成纤维细胞系,并对其细胞形态、生长动力学、染色体核型等生物学特性进行分析。结果表明:第7、12、17代细胞... 实验采用组织块贴壁培养法首次对云南半细毛羊耳缘组织进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了云南半细毛羊耳缘成纤维细胞系,并对其细胞形态、生长动力学、染色体核型等生物学特性进行分析。结果表明:第7、12、17代细胞群体倍增时间分别为26、42和47 h。细胞生长曲线均为"S"型。云南半细毛羊染色体中正常二倍体染色体(2n=54)所占比例分别为93%、86%和81%,其中,常染色体中有3对为中着丝点染色体,23对为端着丝点染色体,X染色体为最大的近端着丝点染色体,Y染色体为最小的亚中着丝点染色体。染色体组总相对长度197.86,平均相对长度3.66。 展开更多
关键词 云南半细毛羊 成纤维细胞系 生长曲线 生物学特性
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云岭黑山羊成纤维细胞系建立及其生物学特性分析 被引量:3
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作者 吴帅帅 吕春荣 +2 位作者 权国波 郭成裕 洪琼花 《黑龙江动物繁殖》 2013年第4期16-20,共5页
本实验采用组织块贴壁培养法首次对云岭黑山羊耳缘组织进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了云岭黑山羊耳缘成纤维细胞系,并对其细胞形态、生长动力学、染色体核型等生物学特性进行分析。结果表明:第4、8、12代细胞群... 本实验采用组织块贴壁培养法首次对云岭黑山羊耳缘组织进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了云岭黑山羊耳缘成纤维细胞系,并对其细胞形态、生长动力学、染色体核型等生物学特性进行分析。结果表明:第4、8、12代细胞群体倍增时间分别为26 h、34 h和46 h,细胞生长曲线均为"S"型。云岭黑山羊染色体中正常二倍体染色体(2n=60)所占比例分别为97%、95%和90%,其中,29对常染色体均为端着丝点染色体,X染色体为最大的近端着丝点染色体,Y染色体为最小的中着丝点染色体。染色体组总相对长度为197.87,平均相对长度为3.30。细菌、真菌、病毒和支原体等微生物检查显示为阴性。 展开更多
关键词 云岭黑山羊 成纤维细胞系 生长曲线 生物学特性
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龙陵黄山羊成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析 被引量:4
13
作者 吕春荣 王思宇 +3 位作者 赵其毅 杨维林 邵庆勇 洪琼花 《中国草食动物科学》 CAS 2016年第6期11-13,共3页
实验采用龙陵黄山羊耳缘组织块贴壁培养法首次对龙陵黄山羊成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了龙陵黄山羊耳缘成纤维细胞系;并对其细胞形态、细胞活率、细胞核型等生物学特性进行了分析。结果表明:细胞倍... 实验采用龙陵黄山羊耳缘组织块贴壁培养法首次对龙陵黄山羊成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了龙陵黄山羊耳缘成纤维细胞系;并对其细胞形态、细胞活率、细胞核型等生物学特性进行了分析。结果表明:细胞倍增时间48 h,生长曲线为"S"型;染色体中正常二倍体染色体2n=60所占比例为91.68%。 展开更多
关键词 龙陵黄山羊 成纤维细胞系 生物学特性
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撒坝猪成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析 被引量:4
14
作者 吕春荣 权国波 +1 位作者 吴国权 洪琼花 《黑龙江动物繁殖》 2016年第2期9-13,共5页
实验采用撒坝猪耳缘组织块贴壁培养法首次对撒坝猪成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了撒坝猪耳缘成纤维细胞系;并对其细胞形态、细胞活率、细胞核型等生物学特性进行分析;还利用透射电镜观察了耳缘组织细... 实验采用撒坝猪耳缘组织块贴壁培养法首次对撒坝猪成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、传代培养、冷冻保存建立了撒坝猪耳缘成纤维细胞系;并对其细胞形态、细胞活率、细胞核型等生物学特性进行分析;还利用透射电镜观察了耳缘组织细胞。结果表明:细胞倍增时间为48 h,生长曲线为"S"型;染色体中正常二倍体染色体(2n=38)所占比例为92.56%;细菌、真菌、病毒和支原体等微生物污染检测均显示为阴性。透射电镜观察显示,成纤维细胞呈长梭型。 展开更多
关键词 撒坝猪 成纤维细胞系 生物学特性
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6种荧光蛋白基因在蒙古羊成纤维细胞中的表达 被引量:5
15
作者 关伟军 刘长青 +2 位作者 娜日苏 陆涛峰 马月辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1141-1148,共8页
采用脂质体介导法,将绿色荧光蛋白(pEGFP—C1、pEGFP-N3)、增强型青色荧光蛋白(pECFP—N1、pECFP—mito)、黄色荧光蛋白(pEYFP—N1)和红色荧光蛋白(pDsRed1—N1)等6种荧光蛋白基因导入蒙古羊体外培养成纤维细胞中,对基因的时... 采用脂质体介导法,将绿色荧光蛋白(pEGFP—C1、pEGFP-N3)、增强型青色荧光蛋白(pECFP—N1、pECFP—mito)、黄色荧光蛋白(pEYFP—N1)和红色荧光蛋白(pDsRed1—N1)等6种荧光蛋白基因导入蒙古羊体外培养成纤维细胞中,对基因的时空表达、阳性细胞生长与增殖状况、细胞凋亡与细胞活力以及提高基因表达率的最佳方法等方面进行了深入的研究。试验结果表明:6种荧光蛋白基因在转染后24、48和72h的转染率在12.3%~63.3%之间,经多重比较,各试验组之间有较大差异。转染24h后,6种荧光蛋白都均匀地充满细胞质和细胞核,只有囊状小泡没有标记荧光;转染48h后,EGFP、ECFP和EYFP仍在整个细胞中均匀表达,呈弥散分布状态,随着表达量的增加,在细胞核局部呈现块状或颗粒状的基因表达产物;DsRed荧光蛋白基因则主要在细胞核膜周围呈现由诸多颗粒状表达产物组成的环状轮廓;在优化的条件下,细胞凋亡率、阳性细胞的形态、生长与增殖状况与对照组比较差异不显著(P〉0.05)。本研究结果对于标记基因、核移植及转基因动物克隆等研究具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 蒙古羊 成纤维细胞系 荧光蛋白 细胞定位 脂质体
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马身猪耳缘组织成纤维细胞的体外培养与鉴定 被引量:6
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作者 张旗 郭晓红 +8 位作者 高鹏飞 靳玉舒 李萌 成志敏 张宁芳 乐宝玉 刘宏 曹果清 李步高 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第8期2289-2294,共6页
为研究马身猪体细胞的生物学特性,试验以3日龄马身猪耳缘组织为材料,采用组织块贴壁法建立马身猪耳缘组织成纤维细胞系,并对体外获得的细胞系进行生物学特性检测。结果表明,获得的马身猪耳缘组织成纤维细胞系符合成纤维细胞的基本特征,... 为研究马身猪体细胞的生物学特性,试验以3日龄马身猪耳缘组织为材料,采用组织块贴壁法建立马身猪耳缘组织成纤维细胞系,并对体外获得的细胞系进行生物学特性检测。结果表明,获得的马身猪耳缘组织成纤维细胞系符合成纤维细胞的基本特征,细胞贴壁生长,呈典型的梭形、星形和多边形,细胞汇合成单层的时间为10~13d,生长曲线呈S型,中期染色体二倍体(2n=38)占主体,约占细胞总数的84%,符合细胞建系的要求;脂质体(Lipofectamine^(TM)2000)转染绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-C1)的转染效率为25%。马身猪耳缘组织成纤维细胞系的成功建立为地方猪种遗传资源的保护开辟了新的方法。 展开更多
关键词 马身猪 成纤维细胞系 组织块贴壁法
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鲁西黄牛体细胞克隆保种技术的研究 被引量:1
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作者 朱化彬 程金华 +5 位作者 孙秀柱 王栋 戴蕴平 龚国春 万荣 郝海生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1287-1292,共6页
以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体,研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛(1♂,4♀)成纤维细胞系,作为核移植供体细胞,利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后... 以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体,研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛(1♂,4♀)成纤维细胞系,作为核移植供体细胞,利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后作为核受体进行核移植,试验结果表明:重构胚的融合率为62.5%(242/387),分裂率为63.6%(154/242),体外培养第7天囊胚发育率为42.9%(66/154)。体外培养第7天的囊胚的内细胞团细胞(ICM)与滋养层细胞数平均为37和47,ICM占44.2%。体外发育到7 d的囊胚新鲜胚胎的移植妊娠率(新鲜胚胎)移植受体10头,60 d妊娠率为20%(2/10)。 展开更多
关键词 鲁西黄牛 成纤维细胞系 细胞克隆
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体细胞克隆牛的规模化生产 被引量:3
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作者 吕自力 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2003年第z1期23-24,共2页
关键词 核移植 细胞工程 供体细胞 成纤维细胞系
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黑豆皮花色苷抗禽白血病病毒A亚群活性的研究 被引量:2
19
作者 雷用东 王丹 +4 位作者 童军茂 张莉 马越 张超 赵晓燕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期344-349,共6页
为探寻黑豆皮花色苷(anthocyanins from black soybean seed coat,ABSC)抗禽白血病病毒A亚群(subgroup A avian leukosis virus,ALV-A)的活性效果。本文以ABSC粉为原料,采用高效液相色谱仪与质谱仪联机(HPLC-MS)的方法鉴定了其花色苷主... 为探寻黑豆皮花色苷(anthocyanins from black soybean seed coat,ABSC)抗禽白血病病毒A亚群(subgroup A avian leukosis virus,ALV-A)的活性效果。本文以ABSC粉为原料,采用高效液相色谱仪与质谱仪联机(HPLC-MS)的方法鉴定了其花色苷主要活性成分,随后采用体外实验,应用MTT法和观察细胞形态法检测了ABSC对鸡成纤维细胞系(DF-1)的细胞毒性,建立细胞模型,研究加入ABSC后对ALV-A的预防和治疗作用。结果表明:黑豆皮花色苷粉中含四种花色苷成分,其中主要为矢车菊色素-3-葡萄糖苷;ABSC对DF-1无细胞毒性的最大相对安全质量浓度为20μg/mL;ABSC在安全浓度范围内能抑制ALV-A的增殖,且抑制程度成剂量关系。结论,ABSC质量浓度为12μg/mL能够显著抑制ALV-A诱导的DF-1细胞形态变化,降低凋亡。 展开更多
关键词 黑豆皮花色苷 成纤维细胞系 禽白血病病毒A亚群 生物活性
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黑加仑花色苷抗禽白血病A亚群病毒作用
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作者 雷用东 王丹 +4 位作者 童军茂 张莉 马越 张超 赵晓燕 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期821-827,共7页
研究了黑加仑花色苷(Anthocyanin from Blackcurrant,ACB)对禽白血病A亚群病毒(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)的抑制作用。作者以ACB粉为原料,采用高效液相色谱仪与质谱仪联机(HPLC-MS)的方法鉴定了其主要活性成分,随后采用... 研究了黑加仑花色苷(Anthocyanin from Blackcurrant,ACB)对禽白血病A亚群病毒(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)的抑制作用。作者以ACB粉为原料,采用高效液相色谱仪与质谱仪联机(HPLC-MS)的方法鉴定了其主要活性成分,随后采用体外实验,应用MTT法和观察细胞形态法检测了ACB对鸡成纤维细胞系(DF1)的细胞毒性的影响,建立细胞模型,研究加入ACB后对ALV-A的预防和治疗作用。结果表明:ACB主要含飞燕草色素-3-鼠李糖苷-5-葡萄糖苷和矢车菊色素-3-鼠李糖苷-5-葡萄糖苷两种组分;ACB对DF1无细胞毒性的质量浓度为10μg/mL;基于ACB的预防和治疗实验,ACB可明显抑制ALV-A的增殖,具有良好的剂量-效应关系,因此ACB具有一定的体外抗ALV-A作用。 展开更多
关键词 黑加仑花色苷 成纤维细胞系 禽白血病病毒A亚群 MTT法
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