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基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子促进创面愈合的临床研究 被引量:12
1
作者 李校坤 洪岸 +3 位作者 许华 姚成灿 付小兵 林剑 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2002年第2期22-27,共6页
目的 :观察基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rbFGF)对急性创面和慢性创面愈合的促进作用。方法 :治疗组 (12 82例 )和对照组 (439例 )被分为深Ⅱ度烧伤、浅Ⅱ度烧伤、供皮区 (包括刃厚和中厚供皮区 )和慢性 (包括残余小创面和慢性溃... 目的 :观察基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rbFGF)对急性创面和慢性创面愈合的促进作用。方法 :治疗组 (12 82例 )和对照组 (439例 )被分为深Ⅱ度烧伤、浅Ⅱ度烧伤、供皮区 (包括刃厚和中厚供皮区 )和慢性 (包括残余小创面和慢性溃疡 )创面 4大类。分别观察应用rbFGF后不同时间创面愈合面积的百分比、创面完全愈合时间 ,以及用药前后的全身情况和不良反应。结果 :浅Ⅱ度烧伤 8d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 1 7%± 2 6 4 %和 (12 6± 2 9)d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 70 6 %± 2 5 0 %和 (10 5± 2 4 )d(P <0 0 0 1)。深Ⅱ度烧伤 15d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 3 3%± 2 5 4 %和 (2 1 9± 5 5 )d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 6 9 7%± 2 7 0 %和 (18 5± 4 4 )d(P <0 0 0 1)。供皮区创面 8d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 7 6 %± 2 9 4 %和(11 4± 2 7)d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 72 1%± 2 8 0 %和 (9 5± 2 4 )d(P <0 0 0 1)。慢性创面完全愈合时间 ,对照组为 (2 8 0± 18 0 )d ,治疗组 (2 2 1± 16 )d(P =0 0 6 8)。用药前后血常规、肝、肾功能无异常变化。结论 展开更多
关键词 基因重组碱性纤维细胞生长因子 创面愈合 临床试验 rbFGF
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人转化生长因子β1基因转染人牙龈成纤维细胞及其稳定表达 被引量:7
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作者 储庆 吴织芬 +3 位作者 何海丽 谢光远 王鑫 刘玲侠 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第2期136-138,共3页
目的 :探讨人转化生长因子 - β1(hTGF - β1)基因转染人牙龈成纤维细胞 (GF)的表达能力。 方法 :体外培养人GF ,传代培养后以阳离子脂质体 (Lipofectamine) :pcDNA3-hTGF - β1为 3μL∶1μg的比例转染。通过免疫组织化学染色的方法及... 目的 :探讨人转化生长因子 - β1(hTGF - β1)基因转染人牙龈成纤维细胞 (GF)的表达能力。 方法 :体外培养人GF ,传代培养后以阳离子脂质体 (Lipofectamine) :pcDNA3-hTGF - β1为 3μL∶1μg的比例转染。通过免疫组织化学染色的方法及图像分析检测hTGF - β1表达水平 ;利用水貂肺上皮细胞生长抑制法检测TGF - β1的生物学活性。结果 :转染后的GF呈强阳性表达 ,并持续 4周以上。图像分析显示转染细胞hTGF - β1表达显著增强 ,与对照组比较差异显著 (P <0 .0 1)。转染后细胞上清可有效的抑制水貂肺上皮细胞的生长。结论 :hTGF - β1基因转染可使牙龈成纤维细胞有效而稳定的表达活性hTGF - 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 基因转染 牙龈纤维细胞 免疫组织化学 生物学活性 脂质体 真核表达载体
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基因重组碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脊髓损伤神经保护作用 被引量:3
3
作者 洪岸 李校坤 +2 位作者 宿宝贵 童军 林剑 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2001年第1期100-103,共4页
目的 :探索碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对大鼠脊髓损伤的神经保护作用 方法 :将吸入bFGF的胶原蛋白海绵或空白海绵贴敷于大鼠脊髓损伤处 ,术后 1、2、3周 ,对大鼠机能进行评分 ,并对大脑运动皮质进行电镜观察分析 结果 :术后 1、2... 目的 :探索碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对大鼠脊髓损伤的神经保护作用 方法 :将吸入bFGF的胶原蛋白海绵或空白海绵贴敷于大鼠脊髓损伤处 ,术后 1、2、3周 ,对大鼠机能进行评分 ,并对大脑运动皮质进行电镜观察分析 结果 :术后 1、2、3周 ,bFGF组大鼠运动评分均明显优于对照组 (Ρ <0 .0 5) ,运动皮质电镜结果显示bFGF组线粒体、内质网轻度肿胀 ,神经毡结构正常 ,无明显胶质细胞增生 程度较对照组明显减轻 结论 :bFGF对大鼠脊髓受损神经纤维起源脑区—运动皮质的神经细胞具有明显的保护作用 。 展开更多
关键词 碱性纤维细胞生长因子 脊髓损伤 神经保护 基因重组 神经再生 神经元
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碱性成纤维细胞生长因子基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的基因表达 被引量:4
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作者 赵悦 马琳 +1 位作者 彭珊珊 淦鑫 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第12期1246-1251,共6页
目的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类存在于骨髓等多种组织中的具有多向分化潜能的组织干细胞。为研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)转染BMSCs对慢性阻塞性肺疾病(c... 目的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类存在于骨髓等多种组织中的具有多向分化潜能的组织干细胞。为研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)转染BMSCs对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的修复作用及机制,将b FGF基因转染至体外培养的大鼠BMSCs,测定b FGF基因表达情况。方法分离、培养并鉴定BMSCs,构建重组质粒b FGF-pc DNA3.1并测序。脂质体介导b FGF-pc DNA3.1转染BMSCs为b FGF-pc DNA3.1质粒转染组,脂质体介导pc DNA3.1转染BMSCs为空白pc DNA3.1质粒转染组,未转染的BMSCs为未转染组,G418筛选14d,qRT-PCR、Western blot检测b FGF基因及蛋白的表达。结果序列测定证实与Gen Bank报道的b FGF全长基因序列一致。b FGF-pc DNA3.1质粒转染组b FGF基因表达(7.028±0.568)较空白pc DNA3.1质粒转染组(1.000±0.082)及未转染组(1)明显升高(P<0.01),而pc DNA3.1质粒转染组和未转染组相比差异无统计学意义(P>0.05)。b FGF-pc DNA3.1质粒转染组b FGF蛋白表达(1.017±0.054)较空白pc DNA3.1质粒转染组(0.217±0.009)及未转染组(0.165±0.013)明显升高(P<0.05),而空白pc DNA3.1质粒转染组及未转染组b FGF蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂质体介导下,重组真核表达载体b FGF-pc DNA3.1能被转入BMSCs,且表达了b FGF基因及蛋白。 展开更多
关键词 碱性纤维细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 慢性阻塞性肺疾病 基因表达
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血管内皮细胞生长因子基因转染皮肤成纤维细胞的实验研究 被引量:6
5
作者 李刚 夏照帆 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期396-398,共3页
为改善人工复合皮在临床上的应用效果 ,构建人血管内皮细胞生长因子 16 5 (hVEGF165)基因重组载体pcDNA3,并转染成纤维细胞。检测转基因细胞培养上清液VEGF浓度 ;用转基因细胞培养上清液刺激人脐静脉血管内皮细胞 ,观察内皮细胞增殖速... 为改善人工复合皮在临床上的应用效果 ,构建人血管内皮细胞生长因子 16 5 (hVEGF165)基因重组载体pcDNA3,并转染成纤维细胞。检测转基因细胞培养上清液VEGF浓度 ;用转基因细胞培养上清液刺激人脐静脉血管内皮细胞 ,观察内皮细胞增殖速度 ;通过Miles实验检测VEGF的生物学活性。结果显示 ,转基因成纤维细胞能够表达一定浓度的VEGF,且具有加速体外培养人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)生长和增强血管通透性的生物学活性。提示转hVEGF165基因成纤维细胞可修饰人工皮的真皮面。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 基因 转染 皮肤纤维细胞 实验研究
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应用碱性成纤维细胞生长因子基因治疗促进大鼠早期断蒂皮瓣的成活 被引量:3
6
作者 朱华锋 汪春兰 +6 位作者 赵宇 曹东升 丁浩 王帮河 王伟 王兴宇 姚远 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第4期386-388,共3页
目的探讨腺病毒介导的碱性成纤维细胞生长因子基因(Ad-bFGF)对大鼠随意皮瓣早期断蒂的影响。方法SD♂大鼠,普通级,随机分成3组:Ad-bFGF目的组、Ad-GFP对照组、PBS对照组,每组10只。于大鼠背部设计2cm×6cm随意皮瓣,蒂位于髂脊水平... 目的探讨腺病毒介导的碱性成纤维细胞生长因子基因(Ad-bFGF)对大鼠随意皮瓣早期断蒂的影响。方法SD♂大鼠,普通级,随机分成3组:Ad-bFGF目的组、Ad-GFP对照组、PBS对照组,每组10只。于大鼠背部设计2cm×6cm随意皮瓣,蒂位于髂脊水平。术后4d断蒂,断蒂后7d观测皮瓣成活面积,检测bFGF表达情况,计算血管密度。结果目的组皮瓣的成活率、血管密度和染色深度均较两对照组有显著差异(P<0.05)。结论应用Ad-bFGF基因治疗能够促进大鼠随意皮瓣早期断蒂。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子2/遗传学 基因疗法 外科皮瓣
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MicroRNA-99b-5p通过抑制成纤维细胞生长因子21表达促进心肌细胞肥大 被引量:3
7
作者 陈丽文 郭晶 +5 位作者 陈泽润 朱杰宁 徐金东 郭惠明 单志新 王晟 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期192-202,共11页
【目的】研究微小RNA microRNA-99b-5p(miR-99b-5p)对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。【方法】实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人心肌组织(包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织)以及横向主动脉缩窄(TAC)手术小鼠心肌中miR-99b-5p的... 【目的】研究微小RNA microRNA-99b-5p(miR-99b-5p)对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。【方法】实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人心肌组织(包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织)以及横向主动脉缩窄(TAC)手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理原代乳小鼠心肌细胞(NMVCs)后,利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小,RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p mimic对NMVCs中肥大相关基因及成纤维细胞生长因子21(Fgf21)表达的影响。双萤光素酶报告实验验证miR-99b-5p与Fgf21基因3′端非翻译区(3’UTR)的结合作用。利用腺病毒介导在NMVCs中过表达Fgf21及超氧化物歧化酶2(Sod2),并利用小干扰RNA(siRNA)敲低NMVCs中Fgf21和Sod2表达,研究Fgf21/Sod2轴是否介导miR-99b-5p对心肌细胞肥大表型的调节作用。【结果】MiR-99b-5p在心衰患者心肌组织、TAC术后的小鼠心肌组织及在AngⅡ处理的心肌细胞中均表达上调(P<0.01)。MiR-99b-5p可促进NMVCs中与肥大相关基因的表达(P<0.01)。双萤光素酶报告基因实验证实miR-99b-5p与Fgf21基因的3’UTR存在结合作用,并且miR 99b-5p可抑制Fgf21及其下游基因Sod2表达(P<0.05)。在NMVCs中过表达Fgf21或Sod2均可有效逆转miR 99b-5p的促心肌细胞肥大作用(P<0.05)。【结论】MiR-99b-5p在肥厚心肌中表达增加,并通过Fgf21/Sod2轴发挥促进心肌细胞肥大的作用。 展开更多
关键词 心肌细胞肥大 微小RNA-99-5p 纤维细胞生长因子21
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碱性成纤维细胞生长因子对卵巢癌CAOV3细胞cyclin D1及GADD153表达的影响 被引量:6
8
作者 叶丽平 温有锋 +1 位作者 聂海褀 张莹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1882-1885,共4页
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人卵巢癌CAOV3细胞细胞周期调节蛋白cyclinD1及GADD153表达的影响,探讨bFGF促进人卵巢癌CAOV3细胞增殖、抑制凋亡的信号机制。方法:利用无血清饥饿诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡。分为对照组、bFGF... 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人卵巢癌CAOV3细胞细胞周期调节蛋白cyclinD1及GADD153表达的影响,探讨bFGF促进人卵巢癌CAOV3细胞增殖、抑制凋亡的信号机制。方法:利用无血清饥饿诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡。分为对照组、bFGF组。分别应用MTT、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳观察25、50、75μg/L bFGF对CAOV3细胞增殖率、细胞周期及细胞凋亡的影响。利用Western blotting检测bFGF对CA-OV3细胞cyclin D1、GADD153以及转录因子(c-Fos、c-Jun)表达的影响。结果:与对照组相比,bFGF呈剂量依赖性加速CAOV3细胞细胞周期进程,促进细胞增殖,抑制饥饿诱导的凋亡(P<0.01);呈时间依赖性促进cyclinD1、c-Fos、c-Jun,抑制GADD153蛋白表达(P<0.01)。结论:bFGF可能通过上调cyclin D1、c-Fos、c-Jun,下调GADD153表达促进细胞增殖,抑制饥饿诱导的卵巢癌CAOV3细胞凋亡。 展开更多
关键词 碱性纤维细胞生长因子 细胞周期蛋白D1 生长抑制和DNA损伤诱导基因153 卵巢肿瘤
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垂体肿瘤转化基因、内皮抑素和碱性成纤维细胞生长因子mRNA在侵袭性垂体腺瘤中的表达 被引量:2
9
作者 陈凌 刘运生 +5 位作者 王陆申 尹海贵 侯庆田 刘志雄 陈立华 凌锋 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期651-653,666,共4页
目的 :探讨垂体腺瘤组织中垂体肿瘤转化基因 (PTTG)、内皮抑素 (endostatin)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在侵袭性垂体腺瘤发生中的作用。方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)技术检测非侵袭性和侵袭性垂体腺瘤组织标本中PTTG ... 目的 :探讨垂体腺瘤组织中垂体肿瘤转化基因 (PTTG)、内皮抑素 (endostatin)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在侵袭性垂体腺瘤发生中的作用。方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)技术检测非侵袭性和侵袭性垂体腺瘤组织标本中PTTG ,endostatin和bFGFmRNA的表达水平。结果 :侵袭性腺瘤较非侵袭性腺瘤PTTG和bFGFmRNA表达明显增高 (均P <0 .0 1)。侵袭性腺瘤较非侵袭性腺瘤endostatinmRNA表达明显降低(P <0 .0 1)。结论 :垂体腺瘤侵袭性的发生可能与PTTG和bFGF表达增高及endostatin表达下调有关 。 展开更多
关键词 PTTG 侵袭性垂体腺瘤 垂体肿瘤转化基因 内皮抑素 瘤组织 mRNA表达 碱性纤维细胞生长因子 性腺 表达水平 FGF
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人血小板源性生长因子-B基因转染犬牙龈成纤维细胞的瞬时表达检测 被引量:2
10
作者 钟泉 闫福华 +1 位作者 李艳芬 江一平 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期214-219,共6页
目的检测携带人血小板源性生长因子-B(hPDGF-B)基因的真核表达质粒在Beagle犬牙龈成纤维细胞内的表达。方法扩增和鉴定携带hPDGF-B基因的质粒EX-A0380-M03,脂质体介导的方法转染Bealge犬牙龈成纤维细胞,RT-PCR、免疫细胞化学、ELISA以... 目的检测携带人血小板源性生长因子-B(hPDGF-B)基因的真核表达质粒在Beagle犬牙龈成纤维细胞内的表达。方法扩增和鉴定携带hPDGF-B基因的质粒EX-A0380-M03,脂质体介导的方法转染Bealge犬牙龈成纤维细胞,RT-PCR、免疫细胞化学、ELISA以及Western blot检测hPDGF-BB的表达。结果 EX-A0380-M03所携带的目的基因为hPDGF-B基因,转染牙龈成纤维细胞24 h后可观察到细胞内的绿色荧光蛋白,48 h转染效率可达18%~38%。RT-PCR、免疫细胞化学、ELISA均能检测到细胞表达hPDGF-B。Western blot证实所表达的蛋白为融合蛋白。结论携带hPDGF-B基因的真核表达载体EX-A0380-M03能被转入牙龈成纤维细胞,并成功表达一种融合蛋白。 展开更多
关键词 血小板源性生长因子-B 基因转染 牙龈纤维细胞
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心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子基因对兔缺血心肌血管新生的促进作用 被引量:4
11
作者 谭强 张小勇 +3 位作者 李易 光雪峰 马雁冰 张光明 《中国心血管杂志》 2003年第5期316-319,共4页
目的 :探讨心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子基因 (b FGF基因 )治疗兔急性心肌梗死模型的效果。方法 碱裂解法大量制备质粒 ;采用开胸结扎兔冠状动脉左前降支 (L AD)法 ,建立兔急性前壁心肌梗死模型。模型制备成功后将动物分为治疗组 ... 目的 :探讨心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子基因 (b FGF基因 )治疗兔急性心肌梗死模型的效果。方法 碱裂解法大量制备质粒 ;采用开胸结扎兔冠状动脉左前降支 (L AD)法 ,建立兔急性前壁心肌梗死模型。模型制备成功后将动物分为治疗组 (n=19)和对照组 (n=18) ,并于心肌内分别注射 pc DNA3- b FGF10 0 μg和 pc DNA310 0 μg,饲养至 2 ,6 ,12周处死 ;免疫组化观察蛋白表达 ;行病理切片观察心肌梗死组织学变化和缺血心肌内血管新生的情况。结果  (1)术前术后描记的心电图证实兔急性心肌梗死模型制作成功 ;(2 )免疫组化观察注射 pc DNA 3- b FGF处心肌组织在 6周内有 b FGF蛋白的表达 ;(3)病理切片行图像分析计算血管密度发现 ,治疗组毛细血管密度和小动脉密度显著高于对照组。结论 心肌内注射 b FGF基因能促进缺血心肌内血管新生 。 展开更多
关键词 碱性纤维细胞生长因子 基因治疗 血管新生 急性心肌梗死
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截短型小鼠成纤维细胞生长因子受体-1基因慢病毒载体构建及在真核细胞中的表达 被引量:1
12
作者 陈伟 陈翀 +4 位作者 张焕新 闫志凌 程海 曾令宇 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期168-172,共5页
本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c... 本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c胎鼠脑组织为模板克隆全长型fgfr1基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,通过反向PCR技术删除胞内磷酸化区域获得△fgfr1,限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移质粒,构建携带EGFP及△fgfr1双顺反子自身失活型重组慢病毒表达质粒,通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,用荧光显微镜及流式细胞术(FCM)检测EGFP的表达,免疫印迹法(Western blot)鉴定截短型FGFR1蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠fgfr1基因,构建重组慢病毒转移载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1及对照载体LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度达到108 TU/ml。以重组病毒载体转染293FT细胞后第4天在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测转染效率可达95%,Western blot检测显示,转染后293FT细胞表达截短型FGFR1蛋白。结论:成功构建了自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1,并在真核细胞中获得表达。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子受体基因 慢病毒载体构建 基因表达 293FT细胞
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成纤维细胞生长因子受体5的研究进展 被引量:2
13
作者 李靖 杨俐萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期201-205,共5页
成纤维细胞生长因子受体5(fibroblast growth factor receptor 5,FGFR5)是FGFR5家族中的一个新型受体,是由胞外区、穿膜区及胞内区构成的穿膜受体。然而,与其他经典FGFRs不同,其胞内区缺乏信号转导所必须的酪氨酸激酶,这一特征决定了其... 成纤维细胞生长因子受体5(fibroblast growth factor receptor 5,FGFR5)是FGFR5家族中的一个新型受体,是由胞外区、穿膜区及胞内区构成的穿膜受体。然而,与其他经典FGFRs不同,其胞内区缺乏信号转导所必须的酪氨酸激酶,这一特征决定了其生物学功能有别于其他FGFRs。FGFR5激活时可抑制细胞增殖,促进细胞黏附和融合,提示该蛋白是一个潜在的抑癌因子,其分子机制有待进一步研究阐明。研究表明,FGFR5在肿瘤及非肿瘤疾病的发生发展中扮演了独特的角色。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子 纤维细胞生长因子受体-5 肿瘤
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农杆菌介导的成纤维细胞生长因子-21基因转化甘蓝型油菜研究 被引量:1
14
作者 李营 庞实锋 +7 位作者 薛萍 刘秀明 付宏岐 李洪志 熊丽东 潘国庆 李海燕 李校堃 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第8期124-130,共7页
【目的】利用基因工程技术获得FGF21转基因油菜植株,为FGF21蛋白生产体系的建立奠定基础。【方法】将人源FGF21基因的cDNA序列,根据植物偏好密码子进行改造,并通过PCR拼接技术扩增FGF21全长基因,将该基因插入油菜油体特异表达载体,通过... 【目的】利用基因工程技术获得FGF21转基因油菜植株,为FGF21蛋白生产体系的建立奠定基础。【方法】将人源FGF21基因的cDNA序列,根据植物偏好密码子进行改造,并通过PCR拼接技术扩增FGF21全长基因,将该基因插入油菜油体特异表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌LBA4404,叶盘法转化甘蓝型油菜"沪油15",并对转基因油菜进行PCR检测和Southern blot分析,最后对FGF21蛋白在转基因油菜种子中的表达的进行了Western blot分析。【结果】合成了FGF21全长基因,成功构建了含FGF21基因的植物双元表达载体p1390yoFGF21,并建立了油菜遗传转化体系。通过油菜遗传转化获得2株转基因植株,PCR扩增和Southern blot检测证实,重组FGF21基因已整合到油菜基因组中;Western blot分析检测显示,FGF21在转基因油菜种子蛋白中具有一定水平的表达量,并具有良好的抗原性。【结论】FGF21基因被成功整合到油菜基因组中,收获的T0代种子蛋白具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子-21 甘蓝型油菜 生物反应器 基因 农杆菌
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碱性成纤维细胞生长因子基因在人类胎盘中的表达 被引量:1
15
作者 程淑 杨池荪 +1 位作者 李诗兰 张小为 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期183-183,共1页
关键词 碱性纤维细胞生长因子 代谢 基因表达
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垂体肿瘤转化基因与碱性成纤维细胞生长因子在急性白血病中的表达和临床意义 被引量:3
16
作者 丛佳 汪洪毅 张翠玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期951-953,共3页
为了探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在急性白血病中的表达及其与急性白血病预后的相关性,采用免疫细胞化学染色方法检测53例急性白血病患者及15例非急性白血病患者的PTTG蛋白和bFGF的表达水平。结果表明,急... 为了探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在急性白血病中的表达及其与急性白血病预后的相关性,采用免疫细胞化学染色方法检测53例急性白血病患者及15例非急性白血病患者的PTTG蛋白和bFGF的表达水平。结果表明,急性白血病组PTTG蛋白和bFGF表达较非急性白血病组明显升高,两者呈显著性差异(P<0.01)。在急性白血病组中,化疗后完全缓解的患者与初发的病人比较有显著差异(P<0.01),并且PTTG蛋白和bFGF的表达呈正相关(r=0.61,P<0.01)。结论:PTTG蛋白和bFGF在急性白血病中高表达,而且与化疗疗效密切相关,这提示PTTG蛋白与bFGF的检测对于急性白血病的诊断、疗效评价及预后估计均有一定意义,PTTG与bFGF参与了急性白血病的发展。 展开更多
关键词 垂体肿瘤转化基因 碱性纤维细胞生长因子 急性白血病
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人酸性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达 被引量:1
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作者 汪浩勇 王会倍 +5 位作者 黄培堂 薛沿宁 李丰生 芮贤良 赵强 周廷冲 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第6期713-718,共6页
用Ncol Ⅰ和EcoRI双酶酶切,获得人酸性成纤维细胞生长因子haFGF基因,将该基因片断连接进入pBV220的EcoRI位点。连接物转化入大肠杆菌RR1,用菌落原位杂交的方法筛选出杂交阳性菌株,用酶切和Southern Blot的方法确定haFGF的插入与否以及... 用Ncol Ⅰ和EcoRI双酶酶切,获得人酸性成纤维细胞生长因子haFGF基因,将该基因片断连接进入pBV220的EcoRI位点。连接物转化入大肠杆菌RR1,用菌落原位杂交的方法筛选出杂交阳性菌株,用酶切和Southern Blot的方法确定haFGF的插入与否以及插入方向的正反,结果我们得到了haFGF正向插入在pBV220 PLPR启动子下游的重组质粒pBV-αFGF。42℃热诱导使重组子表达,其菌体的裂解液对3T3细胞的DNA合成有较强的促进作用,说明重组菌株能够表达具有生物活性的hαFGF。SDS-PAGE结果表明,hαFGF表达产物约占菌体总蛋白的15%。hαFGF表达产物以包涵体的形式存在。 展开更多
关键词 纤维细胞 生长因子 基因克隆
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鼠脑缺血后神经元凋亡与P53的关系及碱性成纤维细胞生长因子的影响 被引量:1
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作者 方瑗 童萼塘 +2 位作者 孙圣刚 梅元武 曹非 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2000年第3期196-199,共4页
目的 研究脑缺血再灌注后P5 3与细胞凋亡的关系和外源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的影响。方法 用原位杂交、免疫组化及原位末端标记的方法观察大鼠大脑中动脉闭塞 2h后再通即刻至 72h脑组织P5 3基因的表达与凋亡细胞的分布及侧... 目的 研究脑缺血再灌注后P5 3与细胞凋亡的关系和外源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的影响。方法 用原位杂交、免疫组化及原位末端标记的方法观察大鼠大脑中动脉闭塞 2h后再通即刻至 72h脑组织P5 3基因的表达与凋亡细胞的分布及侧脑室注射外源性bFGF对它们的影响。结果 缺血 2h及再灌注即刻可见P5 3的表达和凋亡细胞 ,P5 3mRNA及其蛋白的表达高峰在缺血再灌注后 2 4h ,凋亡细胞数高峰在再灌注 2 4~ 48h。bFGF组与缺血组相比 ,6~ 48h各时间点P5 3表达减弱 ,凋亡细胞数明显减少(P <0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论 脑缺血再灌注后诱导P5 3的表达和细胞凋亡 ;外源性bFGF能抑制脑缺血再灌注后P5 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 纤维细胞生长因子 碱性 基因表达
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碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响
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作者 刘雷 唐康来 +1 位作者 许建中 李起鸿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期1348-1350,共3页
目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growthfactor,bFGF)对牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响.方法用特制的脊柱撑开器放置在大鼠脊髓T12~L3椎体横突上纵向牵张,同时皮层体感诱发电位监测,建立大鼠牵张性脊髓损伤模型... 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growthfactor,bFGF)对牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响.方法用特制的脊柱撑开器放置在大鼠脊髓T12~L3椎体横突上纵向牵张,同时皮层体感诱发电位监测,建立大鼠牵张性脊髓损伤模型.用免疫组织化学染色法观察c-fos基因的表达,并用计算机图像分析系统进行定量分析.结果脊髓损伤后神经元C-FOS蛋白D值较正常组显著增加,表达高峰出现在损伤后2 h,而bFGF治疗组在各时相点均低于对照组(P<0.05,P<0.01).结论碱性成纤维细胞生长因子能显著抑制脊髓损伤后c-fos基因的表达,这可能是bFGF保护神经元并减轻脊髓损伤的机制之一. 展开更多
关键词 牵张性 脊髓损伤 C-FOS基因 碱性纤维细胞生长因子
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P物质对体外培养大鼠成纤维细胞表皮生长因子及其受体基因表达的影响
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作者 朱金明 赖西南 +1 位作者 王正国 王丽丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第16期1415-1417,共3页
目的 探讨P物质 (SubstanceP ,SP)作用于离体培养的大鼠肉芽组织成纤维细胞后 ,对其表皮生长因子(EGF)及受体 (EGFR)基因表达的影响。方法 采用大鼠肉芽组织成纤维细胞培养和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,观察SP在不同浓度 ( 1... 目的 探讨P物质 (SubstanceP ,SP)作用于离体培养的大鼠肉芽组织成纤维细胞后 ,对其表皮生长因子(EGF)及受体 (EGFR)基因表达的影响。方法 采用大鼠肉芽组织成纤维细胞培养和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,观察SP在不同浓度 ( 1× 10 -9~ 1× 10 -5mol/L)及不同孵育时间 ( 0、3、6、12、2 4h)情况下刺激大鼠成纤维细胞后 ,成纤维细胞EGF、EGFRmRNA表达的改变情况。结果 SP可上调大鼠肉芽组织成纤维细胞EGF、EGFRmRNA表达。其中 ,SP对EGF的量 效曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 1× 10 -7mol/L。但SP仅在高浓度时 ( 1× 10 -6~ 1× 10 -5mol/L)促进EGFR表达。在最大效应浓度 ( 1× 10 -7mol/L ,1× 10 -5mol/L)时 ,SP对大鼠成纤维细胞EGF、EGFRmRNA表达的上调作用分别于孵育细胞后 6、12h达高峰。结论 SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞EGF、EGFR基因表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关。这种影响可能是SP在创伤愈合过程中发挥调控作用的生物学机制之一。 展开更多
关键词 P物质 表皮生长因子 纤维细胞 基因表达 体外培养
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