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乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α表达与患者预后相关 被引量:3
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作者 于海明 杨俊兰 +1 位作者 李莹 焦顺昌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期370-374,共5页
目的本研究旨在探讨乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α(FAP-α)表达与临床病理特征以及预后的关系。方法回顾性收集2000-01-01/2002-12-31期间在解放军总医院手术的130例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,免疫组织化学染色检测乳... 目的本研究旨在探讨乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α(FAP-α)表达与临床病理特征以及预后的关系。方法回顾性收集2000-01-01/2002-12-31期间在解放军总医院手术的130例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,免疫组织化学染色检测乳腺癌原发灶FAP-α表达,分析FAP-α表达与转化生长因子β1(TGF-β1)表达强度的关系,并分析FAP-α表达与乳腺癌预后的关联性以及与临床病理特征的相关性。结果 FAP-α表达在肿瘤细胞和间质成纤维细胞的细胞质,FAP-α阳性纤维细胞密度与TGF-β1阳性间质细胞密度正相关。FAP-α肿瘤细胞质强度与TGF-β1阳性肿瘤细胞质表达正相关。在雌激素受体和孕激素受体均阴性患者中,FAP-α阳性纤维细胞密度是无病生存(DFS)和总生存(OS)的独立不良预后因素;FAP-α阳性肿瘤细胞质强度是DFS和OS的独立不良预后因素。结论激素受体阴性乳腺癌患者中,原发灶FAP-α高表达与不良预后相关。乳腺癌原发灶TGF-β1的表达与FAP-α的表达正相关。 展开更多
关键词 成纤维细胞活化蛋白α 转化生长因子-Β1 乳腺癌 预后
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^(18)F标记成纤维细胞活化蛋白抑制剂PET/CT对^(18)F-FDG摄取偏低恶性肿瘤的临床诊断价值
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作者 梁志盈 林培颖 +2 位作者 张汝森 李雯 李伟 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第2期154-161,共8页
目的探讨^(18)F标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(18)F-FAPI)PET/CT对^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)摄取偏低的恶性肿瘤的临床诊断价值。方法前瞻性选取2021年1月-2022年11月在广州医科大学附属肿瘤医院确诊并接受^(18)FFAPI PET... 目的探讨^(18)F标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(18)F-FAPI)PET/CT对^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)摄取偏低的恶性肿瘤的临床诊断价值。方法前瞻性选取2021年1月-2022年11月在广州医科大学附属肿瘤医院确诊并接受^(18)FFAPI PET/CT检查的62例^(18)F-FDG摄取偏低的恶性肿瘤患者。收集所有患者的一般信息、临床和影像资料。参照肿瘤邻近组织对^(18)F-FDG和^(18)F-FAPI的摄取水平,将肿瘤病灶分为高摄取、中摄取与低摄取,其中高摄取病灶设为阳性。记录并比较^(18)F-FDG与^(18)F-FAPI显示的肿瘤原发灶、转移灶数量及其摄取水平。结果62例原发恶性肿瘤对^(18)F-FDG低摄取18例(29.0%)、中摄取44例(71.0%),而对^(18)F-FAPI低摄取1例(1.6%)、中摄取6例(9.7%)、高摄取55例(88.7%)。原发肿瘤^(18)FFAPI的最大标准摄取值(SUV_(max))明显高于^(18)F-FDG(7.5±5.6 vs.3.9±2.1,P<0.001)。^(18)F-FAPI PET检出的阳性淋巴结数明显多于^(18)F-FDG PET(77个vs.38个,P<0.01)。共检出16个远处转移灶,其中^(18)F-FDG PET/CT检出11个(68.8%),^(18)F-FAPI PET/CT检出15个(93.8%),两种示踪剂的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于^(18)F-FDG摄取偏低的恶性肿瘤,^(18)F-FAPI PET/CT可较好地显示肿瘤原发灶和转移灶。^(18)F-FAPI可作为一种较有前景的放射性示踪剂,尤其适用于^(18)F-FDG摄取偏低的恶性肿瘤。 展开更多
关键词 ^(18)F标记的纤维细胞活化蛋白抑制剂 ^(18)F-氟代脱氧葡萄糖 PET/CT 肿瘤 低摄取
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镍纹样蛋白对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响
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作者 朱晓丹 白婧 +1 位作者 唐俊楠 张金盈 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期536-540,共5页
目的:探讨镍纹样蛋白(METRNL)对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响。方法:分离培养原代大鼠心脏成纤维细胞,采用TGF-β1刺激成纤维细胞诱导细胞活化、增殖,将其分为对照组、TGF-β1组、METRNL组、TGF-β1+... 目的:探讨镍纹样蛋白(METRNL)对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响。方法:分离培养原代大鼠心脏成纤维细胞,采用TGF-β1刺激成纤维细胞诱导细胞活化、增殖,将其分为对照组、TGF-β1组、METRNL组、TGF-β1+METRNL组,采用MTT法检测细胞活性和增殖率,采用qRT-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌蛋白(α-SMA)mRNA的表达水平,采用免疫荧光染色检测Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白的表达,采用Western blot检测p-Smad2、p-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4蛋白的表达。结果:TGF-β1作用后细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及α-SMA mRNA表达水平增加,Ⅲ型胶原及α-SMA蛋白表达水平增加,p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3升高;METRNL作用后上述指标均降低,且TGF-β1和METRNL存在交互作用(P<0.05)。结论:METRNL可减弱TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活化、增殖和胶原合成功能。 展开更多
关键词 心肌纤维 心脏纤维细胞 镍纹样蛋白 SMAD信号通路 大鼠 TGF-β1
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组蛋白甲基转移酶SMYD2对巨噬细胞-肌成纤维细胞转化促进糖尿病肾病肾纤维化的影响
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作者 杨元 彭睿 +9 位作者 刘泽莹 邹雪 李霞 元辉雄 龙合花 王腾 岑明杰 郭兵 朱丽英 刘丽荣 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期239-249,共11页
目的:探讨组蛋白甲基转移酶SMYD2(SET and MYND domain containing 2)在巨噬细胞转化促进糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾纤维化中的作用。方法:(1)C57BL/6J小鼠给予55 mg/kg链脲佐菌素腹腔注射,建立糖尿病模型。实验分为正... 目的:探讨组蛋白甲基转移酶SMYD2(SET and MYND domain containing 2)在巨噬细胞转化促进糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾纤维化中的作用。方法:(1)C57BL/6J小鼠给予55 mg/kg链脲佐菌素腹腔注射,建立糖尿病模型。实验分为正常对照(normal control,NC)组(n=5)、糖尿病20周组(n=5)、糖尿病28周组(n=5)和糖尿病36周组(n=5)。生化分析仪检测小鼠血糖(blood glucose,BG)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)和Masson染色观察小鼠肾组织形态学及纤维化改变情况;Western blot检测SMYD2、组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(histone H3 lysine 4 trimethylation,H3K4me3)、精氨酸酶1(arginase-1)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、I型胶原(collagen type I,Col I)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白水平;免疫荧光染色观察F4/80、α-SMA、SMYD2、CD86、CD206和CD163蛋白的定位及表达情况。(2)体外培养小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),分为正常糖(normal glucose,NG)+敲减对照(negative control siRNA,siNC)组、高糖(high glucose,HG)+siNC组、NG+SMYD2敲减(SMYD2 siRNA,siSMYD2)组和HG+siSMYD2组。Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:(1)与NC组相比,糖尿病28周和糖尿病36周组的BG、SCr和BUN均增高(P<0.05),肾组织可见肾小管萎缩、扩张及胶原纤维沉积,H3K4me3、arginase-1、MMP9、Col I和α-SMA蛋白表达上调(P<0.05)。CD86、CD206、CD163和F4/80主要表达在肾小管间质巨噬细胞,α-SMA主要表达在肾间质,SMYD2主要表达在肾小管上皮细胞及肾间质。(2)与NG+siNC组相比,HG+siNC组SMYD2、H3K4me3、arginase-1、CD163、Col I、α-SMA、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和p-Smad3蛋白水平显著升高(P<0.05);敲减SMYD2后上述指标水平降低(P<0.05)。结论:SMYD2可通过巨噬细胞-肌成纤维细胞转化促进DKD肾纤维化,其机制可能与调控TGF-β1/Smad3信号通路有关。 展开更多
关键词 甲基转移酶 SMYD2蛋白 糖尿病肾病 纤维 巨噬细胞 纤维细胞
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不同体外培养条件对缺氧诱导原代心肌成纤维细胞活化的影响
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作者 付可威 曹梦菲 +1 位作者 罗洁 袁伟 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第4期497-503,共7页
目的探讨不同浓度葡萄糖、血清体外培养对缺氧诱导的原代心肌成纤维细胞活化及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达的影响。方法采用酶消及差速贴壁法分离并纯化原代乳小鼠细胞,随机分为6组:低糖高血清组(1.0 g/L葡萄糖+10%血... 目的探讨不同浓度葡萄糖、血清体外培养对缺氧诱导的原代心肌成纤维细胞活化及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达的影响。方法采用酶消及差速贴壁法分离并纯化原代乳小鼠细胞,随机分为6组:低糖高血清组(1.0 g/L葡萄糖+10%血清),高糖高血清组(4.5 g/L葡萄糖+10%血清),低糖中血清组(1.0 g/L葡萄糖+5%血清),高糖中血清组(4.5 g/L葡萄糖+5%血清),低糖无血清组(1.0 g/L葡萄糖+0%血清),高糖无血清组(4.5 g/L葡萄糖+0%血清)。体外培养24 h观察细胞形态,Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子(transforming growth factor beta,TGF-β)、Ⅰ型胶原及YAP表达,免疫荧光法观察α-SMA、YAP表达及定位,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色以及划痕实验分别评估细胞增殖、迁移能力。结果经1%O_(2)培养24 h后,随着培养液血清水平下降及葡萄糖浓度升高,细胞形态逐渐向肌成纤维细胞变化,以高糖无血清组细胞形态变化最为显著。与高糖高血清组比较,高糖无血清组Ⅰ型胶原、TGF-β、α-SMA及YAP表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与低糖高血清组比较,低糖无血清组α-SMA荧光强度明显升高[(9.23±2.45)%vs(2.40±2.04)%,P<0.05];与低糖无血清组比较,高糖无血清组Ⅰ型胶原、TGF-β、α-SMA及YAP表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖高血清组和低糖无血清组比较,高糖无血清组α-SMA荧光强度、YAP入核、细胞迁移明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在1%O_(2)缺氧条件下,选用高糖无血清培养对于构建缺氧诱导活化的体外细胞模型最为合适,并且YAP激活程度最为显著。 展开更多
关键词 缺氧 纤维细胞 体外培养技术 Yes相关蛋白
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丝胶蛋白作为血清替代物对汉江黑猪皮肤成纤维细胞培养效果的评估
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作者 吴楠 许连光 +1 位作者 魏妞妞 王家成 《现代畜牧科技》 2025年第8期43-46,共4页
利用丝胶蛋白全部或部分替代胎牛血清培养汉江黑猪皮肤成纤维细胞,比较细胞之间的形态学,生理学等特征,评估丝胶蛋白作为血清替代物的培养效果。采用胎牛血清培养基、丝胶蛋白全部或部分替代胎牛血清培养基培养汉江黑猪皮肤成纤维细胞... 利用丝胶蛋白全部或部分替代胎牛血清培养汉江黑猪皮肤成纤维细胞,比较细胞之间的形态学,生理学等特征,评估丝胶蛋白作为血清替代物的培养效果。采用胎牛血清培养基、丝胶蛋白全部或部分替代胎牛血清培养基培养汉江黑猪皮肤成纤维细胞。通过细胞的形态观察、活率检测以及生长曲线的绘制评估培养效果。各培养基样品均可成功有效培养汉江黑猪皮肤成纤维细胞。部分替代且胎牛血清与丝胶蛋白比例在5∶5及以上时,效果与胎牛血清培养基基本一致,部分更优。25 mg/mL丝胶蛋白溶液综合培养效果优于10 mg/mL和50 mg/mL。胎牛血清与25 mg/mL丝胶蛋白溶液按8∶2、5∶5比例添加的培养基对成纤维细胞短期培养无显著影响,为培养基选择提供参考。 展开更多
关键词 丝胶蛋白 纤维细胞 细胞培养 汉江黑猪
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黄芩素对高糖诱导的心脏成纤维细胞焦亡的影响
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作者 许峥嵘 董雪琦 +4 位作者 孙倩 刘慧颖 邓文娟 任卫东 谷君 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第8期1076-1081,共6页
目的基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1)/消皮素D通路探讨黄芩素对高糖... 目的基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1)/消皮素D通路探讨黄芩素对高糖诱导的心脏成纤维细胞焦亡的影响。方法将大鼠心脏成纤维细胞分为对照组、高糖组、低浓度组、中浓度组、高浓度组、高浓度黄芩素+激动剂(NLRP3激动剂,BMS-986299)组。除了对照组,其余各组均用40 mmol/L葡萄糖进行高糖诱导。低、中、高浓度组分别用12.5、25、50μmol/L黄芩素处理。高浓度黄芩素+激动剂组同时用50μmol/L黄芩素和1μmol/L BMS-986299处理。利用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)检测细胞毒性;实时荧光定量PCR检测NLRP3、Caspase-1、消皮素D mRNA表达;Western blot检测NLRP3、Caspase-1、消皮素D蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组EdU阳性细胞数增加,细胞焦亡率、细胞毒性、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平、NLRP3、Caspase-1、消皮素D mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05);与高糖组比较,低浓度组、中浓度组、高浓度组EdU阳性细胞数减少,细胞焦亡率、细胞毒性、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平、NLRP3、Caspase-1、消皮素D mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与高浓度组比较,高浓度黄芩素+激动剂组EdU阳性细胞数明显增加[(26.85±2.95)个vs(15.43±1.82)个,P<0.05],细胞焦亡率[(33.45±4.02)%vs(17.34±2.15)%,P<0.05]、细胞毒性[(27.94±2.93)%vs(14.13±1.87)%,P<0.05]、Ⅰ型胶原[(107.58±13.39)ng/ml vs(58.73±8.36)ng/ml,P<0.05]、Ⅲ型胶原[(118.43±13.95)ng/ml vs(68.74±8.57)ng/ml,P<0.05]水平明显升高(P<0.05)。与高浓度组比较,高浓度黄芩素+激动剂组NLRP3、Caspase、消皮素D mRNA及蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芩素可通过抑制NLRP3/Caspase-1/消皮素D通路抑制高糖诱导的心脏成纤维细胞焦亡。 展开更多
关键词 黄芩素 NLR家族 蛋白结构域包含蛋白3 纤维细胞 细胞焦亡
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肿瘤相关成纤维细胞中FAP的表达水平对食管鳞癌恶性进展的影响
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作者 李佳怡 张理 +7 位作者 刘书培 陈攀 张小漫 牛浩瑾 杨平娟 高震东 石林林 高社干 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期13-21,共9页
目的探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达水平及对其预后的影响,进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中FAP的表达... 目的探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达水平及对其预后的影响,进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。方法首先,通过TCGA数据库评估FAP在31种肿瘤的癌和癌旁组织中表达水平的差异,并分析其对ESCC患者预后的影响;进一步收集高发区ESCC患者癌和癌旁新鲜组织用于原代CAFs和癌旁正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)的提取和分离,利用qRT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光进行表型鉴定和功能分析;收集NFs、CAFs和经FAP抑制剂(FAPi)处理后的CAFs细胞上清,与KYSE150细胞构建体外共培养模型,通过EdU法、CCK-8法、平板克隆、Transwell和划痕实验探究FAP表达水平对KYSE150细胞增殖、侵袭和迁移等恶性行为的影响;最后,通过构建食管癌小鼠皮下荷瘤模型,在体内探究CAFs中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。结果在包含ESCC在内的10种恶性肿瘤中,癌组织中FAP的表达均显著高于癌旁组织,且ESCC中FAP的高表达提示患者的不良预后,并且FAP可作为ESCC患者预后的独立危险因素;从ESCC及其癌旁组织中成功提取、分离出原代CAFs和NFs,经鉴定表型正确;体外共培养结果显示,与NFs相比,CAFs高表达FAP并显著促进ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力,而FAPi处理可显著抑制上述恶性行为;体内实验证实FAPi和CAFs去激活处理,对荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著抑制作用。结论在ESCC中,FAP的高表达与CAFs的活化和患者的不良预后呈正相关,促进肿瘤的恶性进展。 展开更多
关键词 食管鳞癌 纤维细胞活化蛋白 肿瘤相关纤维细胞
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小鼠骨髓间充质干细胞通过JAK2/STAT3信号通路对成纤维细胞增殖和胶原表达水平的影响
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作者 黎涵玥 阳莲 +2 位作者 刘剑锋 张舒飞 洪莉 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期325-332,共8页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对L929细胞增殖和其胶原表达水平的影响,阐明其相关作用机制。方法:提取4周龄C57BL/6小鼠的BMSCs。采用免疫荧光染色鉴定BMSCs的表型。将L929细胞分为对照组(L929细胞)、共培养组(L929细胞与BMSCs)、Ja... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对L929细胞增殖和其胶原表达水平的影响,阐明其相关作用机制。方法:提取4周龄C57BL/6小鼠的BMSCs。采用免疫荧光染色鉴定BMSCs的表型。将L929细胞分为对照组(L929细胞)、共培养组(L929细胞与BMSCs)、Janus激酶(JAK)抑制剂WP1066组(WP1066处理L929细胞与BMSCs)和二甲基亚砜(DMSO)组(DMSO处理L929细胞与BMSCs)。细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测不同时间点各组L929细胞增殖活性,Western blotting法检测各组L929细胞中Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)表达水平,免疫荧光染色法检测各组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ蛋白表达。结果:BMSCs表面抗原(SA)荧光检测,BMSCs表达表面标志物CD29+、CD45-、CD90+和CD105+。CCK-8法检测,与对照组比较,共培养组L929细胞增殖活性明显升高(P<0.01),DMSO组L929细胞增殖活性明显升高(P<0.01);与共培养组比较,WP1066组L929细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,共培养组和DMSO组L929细胞中ColⅠ及ColⅢ蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与共培养组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与DMSO组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。免疫荧光染色法检测,与对照组比较,共培养组和DMSO组L929细胞中ColⅠ及ColⅢ荧光强度明显升高(P<0.01);与共培养组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ荧光强度明显降低(P<0.01);与DMSO组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ荧光强度明显降低(P<0.01)。结论:间充质干细胞可通过JAK2/信号转导和转录激活子3 (STAT3)信号通路促进小鼠L929细胞增殖及胶原生成。 展开更多
关键词 盆底功能障碍性疾病 骨髓间充质干细胞 纤维细胞 Ⅰ型胶原蛋白 Ⅲ型胶原蛋白 JANUS激酶2 信号转导和转录激活子3
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竹红菌素A通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白依赖途径促进瘢痕疙瘩成纤维细胞自噬的研究
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作者 陈雷刚 任慧敏 +3 位作者 吴远慧 安国芝 景晓蕾 赵同心 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期577-581,共5页
目的:探究竹红菌素A(HA)通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)依赖途径促进瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)自噬的作用机制。方法:原代培养KFs并进行传代,将第3代KFs分为对照组、不同剂量HA组(分别予0.125、0.25、0.5、1.0μmol/L HA处理)、si-阴... 目的:探究竹红菌素A(HA)通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)依赖途径促进瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)自噬的作用机制。方法:原代培养KFs并进行传代,将第3代KFs分为对照组、不同剂量HA组(分别予0.125、0.25、0.5、1.0μmol/L HA处理)、si-阴性对照(NC)组、si-NC+HA组(转染NC si RNA+1.0μmol/L HA)及si-磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)+HA组(转染PTEN siRNA+1.0μmol/L HA)。采用CCK8法检测细胞增殖情况;采用酶联免疫吸附试验检测胶原代谢指标Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)的含量;采用western blot检测自噬标志物微管相关蛋白1的轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及m TOR途径中PTEN、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、p-mTOR的表达水平。结果:不同剂量HA组KFs的A_(450)值,Col-Ⅰ、α-SMA、FN含量以及p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达水平均低于对照组;而PTEN、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平均高于对照组(P<0.05),且呈剂量依赖性。si-PTEN+HA组KFs的A_(450)值,Col-Ⅰ、α-SMA、FN含量以及p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达水平均高于si-NC+HA组(P<0.05);而PTEN、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平均低于si-NC+HA组(P<0.05)。结论:HA通过调控m TOR途径介导的细胞自噬可抑制KFs增殖。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 纤维细胞 竹红菌素A 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 自噬
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过表达sFRP3对小鼠原代心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量:1
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作者 江舜祥 涂彬 +3 位作者 宋凯 何缓缓 陶辉 曹炜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期809-814,共6页
目的探讨Wnt信号通路调控剂分泌型卷曲相关蛋白3(sFRP3)在小鼠心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的作用。方法购入1~3 d的小鼠乳鼠,行手术对心脏取材,消化后分离CFs进行培养。细胞贴壁生长后使用转化生长因子(TGF-β1)刺激构建CFs活化增殖... 目的探讨Wnt信号通路调控剂分泌型卷曲相关蛋白3(sFRP3)在小鼠心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的作用。方法购入1~3 d的小鼠乳鼠,行手术对心脏取材,消化后分离CFs进行培养。细胞贴壁生长后使用转化生长因子(TGF-β1)刺激构建CFs活化增殖模型;确认模型构建成功后分别向实验组和对照组细胞转染sFRP3过表达质粒和空载质粒24~48 h。通过Western blot、qRT-PCR的方法在分子层面对sFRP3、Periostin(POSTN)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行检测;使用MTT法、CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖能力的改变。结果在TGF-β1刺激构建的CFs活化增殖模型中,相较于对照组,模型组sFRP3蛋白及mRNA表达下降,活化增殖相关蛋白PCNA、POSTN和CollagenⅠ表达上调。另外,在质粒转染sFRP3过表达组的CFs中,PCNA、POSTN和CollagenⅠ蛋白及mRNA表达相较于空载组下降。MTT、CCK-8与EdU实验表明,质粒转染sFRP3过表达组的CFs增殖活性较空载组明显下降。结论过表达sFRP3明显抑制CFs活化增殖,提示sFRP3可能是参与调控CFs活化增殖的关键基因。 展开更多
关键词 sFRP3 心肌纤维细胞 心肌纤维 活化 增殖
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成纤维细胞活化蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 刘蕊 刘亮 +2 位作者 李慧 于津浦 任秀宝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期225-229,共5页
目的:检测人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activationprotein,FAP)mRNA的表达,探讨FAP mRNA与NSCLC临床特征及预后之间的关系。方法:2004年6月至2006年12月选取天津医科大学附... 目的:检测人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activationprotein,FAP)mRNA的表达,探讨FAP mRNA与NSCLC临床特征及预后之间的关系。方法:2004年6月至2006年12月选取天津医科大学附属肿瘤医院组织库中247例NSCLC患者瘤组织标本和对应的48例癌旁组织标本,患者随访至2011年12月1日。采用实时荧光PCR检测NSCLC组织和正常肺组织中FAP mRNA。临床病理参数与FAP mRNA相对表达量的相关性分析采用Mann-Whitney U检验,以Kaplan-Meier法绘制生存曲线,用log-Rank检验比较患者的生存差异,采用Cox回归模型评估独立的预后因素。结果:FAP mRNA在NSCLC组织中过表达。NSCLC组织中FAP mRNA表达水平与NSCLC患者KPS评分成正相关(P<0.05),而与肿瘤原发部位、肿块大小、淋巴结转移、临床分期、组织学类型等其他病理特征无明显关系(P>0.05)。高表达FAP mRNA的NSCLC患者与低表达者相比,中位总生存时间(overall survival,OS)无明显差异(43 vs 39个月,P>0.05)。进一步以组织学类型分层分析显示,肺腺癌患者FAP mRNA表达量与临床分期成负相关(P=0.031),与KPS评分成正相关(P=0.041)。高表达FAP mRNA的肺腺癌患者与低表达者相比,中位OS时间显著延长(42 vs 26个月,P<0.05),多因素分析进一步证实FAP mRNA表达是影响肺腺癌患者预后的独立因素。结论:FAP在NSCLC组织中高表达,FAP mRNA高表达与肺腺癌的临床分期呈负相关,并与肺腺癌患者的预后密切相关。 展开更多
关键词 纤维细胞活化蛋白(FAP)基因 非小细胞肺癌 预后
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丝裂原活化蛋白激酶通路对成纤维细胞内游离钙的影响 被引量:6
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作者 程飚 付小兵 +2 位作者 盛志勇 张萍 孟晋红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期380-382,共3页
为观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对离体热烫伤后成纤维细胞内钙离子的作用以及丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)通路对胞内游离钙的影响 ,将培养的人成纤维细胞进行热损伤刺激后分成 4组 :①bFGF处理组 (10ng/ml) ;②预先加入PD980 5 9(10... 为观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对离体热烫伤后成纤维细胞内钙离子的作用以及丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)通路对胞内游离钙的影响 ,将培养的人成纤维细胞进行热损伤刺激后分成 4组 :①bFGF处理组 (10ng/ml) ;②预先加入PD980 5 9(10 μmol/L)阻断剂 30min,再行bFGF(10ng/ml)刺激 ;③预先加入SB2 0 35 80 (10 μmol/L)阻断剂 30min ,再行bFGF刺激 (10ng/ml) ;④同时加入PD980 5 9(10 μmol/L)和SB2 0 35 80 (10 μmol/L) 2种阻断剂 30min,再加入bFGF(10ng/ml)。应用特异性Ca2 + 荧光指示剂Fluo 3/AM负载细胞 ,激光共聚焦显微镜检测细胞内游离钙的浓度。结果显示 ,受热刺激的成纤维细胞荧光强度较弱。加入bFGF后可促使成纤维细胞中游离Ca2 +浓度升高 ,分别预先加入PD980 5 9和SB2 0 35 80拮抗剂的成纤维细胞 ,再加入bFGF ,胞内钙离子浓度出现不同的钙振荡现象。同时加入 2种阻断剂后胞内钙离子浓度则迅速降低。表明bFGF引起热损伤后的成纤维细胞中游离Ca2 + 浓度的增加 。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子 显微镜检查 丝裂原活化蛋白激酶 BFGF 烫伤
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靶向成纤维细胞激活蛋白分子影像的临床研究与应用进展
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作者 付浩 陈皓鋆 吴华 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期917-932,共16页
[背景]肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)在肿瘤生物行为中起重要作用,成纤维细胞激活蛋白(FAP)作为CAF的特异性标志物,在90%的上皮肿瘤中均有表达.近年来,FAP抑制剂(FAPI)正电子发射断层成像(PET)在肿瘤疾病与非肿瘤疾病中的临床... [背景]肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)在肿瘤生物行为中起重要作用,成纤维细胞激活蛋白(FAP)作为CAF的特异性标志物,在90%的上皮肿瘤中均有表达.近年来,FAP抑制剂(FAPI)正电子发射断层成像(PET)在肿瘤疾病与非肿瘤疾病中的临床研究和应用进展迅速,成为领域内的前沿热点.[进展]FAPI PET/计算机断层扫描(CT)在包括头颈部肿瘤、肺癌、消化系统肿瘤、肉瘤等多种肿瘤的诊断评价中显示出克服其氟代脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT的不足、显著提升诊断效能的优点.同时,以FAPI为载体的放射性核素诊疗一体化研究也引起关注.本文对FAPI PET/CT在肿瘤与非肿瘤疾病的临床研究和应用进展以及基于FAPI的放射性核素诊疗一体化研究动向进行综述.[展望]未来随着FAPI分子探针药动学的进一步提升,更多前瞻性大样本量的临床研究系统性评价FAPI分子影像在肿瘤疾病和非肿瘤疾病中的价值,以及不同治疗方式的联合,FAP有望成为重要的诊疗一体化靶点,为肿瘤治疗提供全新的策略. 展开更多
关键词 纤维细胞激活蛋白 分子影像 正电子发射断层 肿瘤疾病 非肿瘤疾病 放射性核素诊疗
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基于光损伤皮肤成纤维细胞模型的鱼胶原蛋白肽修复性能研究
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作者 蒲春宏 王荣昌 +2 位作者 华中杰 张佳婵 陈朝 《日用化学工业(中英文)》 CAS 北大核心 2024年第11期1375-1381,共7页
鱼胶原蛋白肽(Fish collagen peptides,FCPs)是一类具备多种活性功能的多肽混合物。近几年研究表明,口服鱼胶原蛋白肽能够安全高效地作用于皮肤,发挥抗氧化、抑制黑色素形成、延缓衰老和抗光老化等功效。然而,现有鱼胶原蛋白肽的体外功... 鱼胶原蛋白肽(Fish collagen peptides,FCPs)是一类具备多种活性功能的多肽混合物。近几年研究表明,口服鱼胶原蛋白肽能够安全高效地作用于皮肤,发挥抗氧化、抑制黑色素形成、延缓衰老和抗光老化等功效。然而,现有鱼胶原蛋白肽的体外功效研究较少。该研究利用人皮肤成纤维细胞建立UVA诱导的光损伤模型,从细胞形态和细胞存活率两个方面研究鱼胶原蛋白肽对人皮肤成纤维细胞增殖能力的影响。通过测定鱼胶原蛋白肽处理细胞后,其中透明质酸、Ⅰ型胶原、弹性蛋白含量以及总抗氧化能力的变化来研究其抗氧化功效。另外对比分析细胞形态、细胞活力和关键代谢产物等的具体变化来研究鱼胶原蛋白肽对UVA诱导的光损伤细胞的修复作用。该研究为鱼胶原蛋白肽在皮肤光损伤修复领域提供了理论依据,为新型功能食品和胶原蛋白产品的开发与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 鱼胶原蛋白 光损伤 人皮肤纤维细胞 修复 抗氧化
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68Ga标记成纤维细胞活化蛋白抑制剂PET/CT假阳性原因分析 被引量:1
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作者 王安波 冯丽佳 +3 位作者 倪萍萍 何丽萌 李红梅 张伟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期440-444,共5页
目的 探讨^(68)Ga标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(68)Ga-FAPI-04)PET/CT显像出现假阳性的原因。方法 回顾性收集西南医科大学附属医院核医学科2020年9月至2021年5月547例行^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT检查患者的影像学资料,由2名有经验... 目的 探讨^(68)Ga标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(68)Ga-FAPI-04)PET/CT显像出现假阳性的原因。方法 回顾性收集西南医科大学附属医院核医学科2020年9月至2021年5月547例行^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT检查患者的影像学资料,由2名有经验的核医学诊断医师根据患者临床资料、相关影像学检查、实验室检查、病理及随访结果对假阳性病例进行分析。结果 547例^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT显像中共发现假阳性99例(18.1%),其中男56例,女43例。13例经术后病理诊断,包括甲状腺炎1例、肺结核2例、骨结核1例、肺炎性假瘤2例、肺结节病1例、肺良性纤维瘤1例、机化性肺炎1例、肾血管平滑肌脂肪瘤2例、肿块型胰腺炎1例及胰腺黏液囊腺瘤1例;86例经病史、相关影像学检查及长期随访证实,其中颈部8例(9.3%)、胸部13例(15.1%)、腹部5例(5.8%)、骨关节57例(66.3%)、皮肤3例(3.5%)。假阳性显像中与炎症有关的摄取83例(83.8%),以关节炎(23例)和骨赘(29例)最多见;与成纤维细胞有关的摄取16例(16.2%)。结论^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT会出现非恶性肿瘤性假阳性显像,主要与炎症及成纤维细胞有关。 展开更多
关键词 纤维细胞活化蛋白抑制剂 假阳性 同位素标记 PET/CT
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成纤维细胞活化蛋白的研究进展 被引量:5
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作者 刘维 刘美燕 吴沅皞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期842-845,共4页
近年来,越来越多的文献报道成纤维细胞活化蛋白(Fibroblast activation protein,FAP)在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。FAP是肿瘤相关成纤维细胞(Tumor-associated fibroblast,TAF)的特异性标志物之一,具有特殊的生物学特性,基... 近年来,越来越多的文献报道成纤维细胞活化蛋白(Fibroblast activation protein,FAP)在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。FAP是肿瘤相关成纤维细胞(Tumor-associated fibroblast,TAF)的特异性标志物之一,具有特殊的生物学特性,基因组稳定,丰富、特异地表达于肿瘤间质,在促进肿瘤细胞的生长、侵袭、转移及免疫抑制中扮演重要角色。 展开更多
关键词 纤维细胞 活化蛋白 肿瘤间质 FIBROBLAST 特异性标志物 免疫抑制 生物学特性 类风湿关节炎 疾病发展过程 乳腺癌细胞
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RGD多肽水凝胶对Tenon囊成纤维细胞活化和YAP信号的影响
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作者 吕瑶 梁亮 +2 位作者 覃勉 蒋汝平 吴霞 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第9期686-691,共6页
目的 探究不同浓度的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽水凝胶,对Tenon囊成纤维细胞(HTF)活化和Yes相关蛋白(YAP)表达的影响。方法 制备0.5%、1.0%、2.0%三种浓度RGD多肽水凝胶,透射电子显微镜观察其内部微观结构,流变学检测弹性模量(E)... 目的 探究不同浓度的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽水凝胶,对Tenon囊成纤维细胞(HTF)活化和Yes相关蛋白(YAP)表达的影响。方法 制备0.5%、1.0%、2.0%三种浓度RGD多肽水凝胶,透射电子显微镜观察其内部微观结构,流变学检测弹性模量(E)。构建SD雄性大鼠结膜损伤模型后,分为空白组(不作处理)、低浓度RGD组(结膜下注射0.5%RGD多肽水凝胶)、中浓度RGD组(结膜下注射1.0%RGD多肽水凝胶)、高浓度RGD组(结膜下注射2.0%RGD多肽水凝胶),观察1周后取材,Masson染色观察大鼠结膜处胶原纤维增生情况,免疫组织化学检测大鼠结膜YAP、平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)表达情况。利用转化生长因子-β2(TGF-β2)刺激HTF活化构建瘢痕化细胞模型,按照实验要求分为对照组、 0.5%RGD水凝胶组、1.0%RGD水凝胶组、2.0%RGD水凝胶组、正常组,培养24 h后,Western blot检测HTF中YAP、结缔组织生长因子(CTGF)、α-SMA、纤连蛋白(FN)和I型胶原蛋白(Col I)的蛋白相对表达量;激光共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白(F-actin)和YAP蛋白表达定位。结果 电镜下观察可见,RGD多肽水凝胶内部纳米纤维交联密度随多肽浓度增加而升高,流变学测得0.5%、1.0%及2.0%RGD多肽水凝胶弹性模量(E)依次约为0.067 kPa、0.150 kPa、2.170 kPa。Masson染色结果显示,除中浓度RGD组大鼠结膜胶原纤维增生面积比明显低于空白组外(P<0.05),低浓度组、高浓度组与空白组差异均无统计学意义(均为P>0.05)。免疫组织化学结果显示,与空白组相比,低浓度RGD组、中浓度RGD组、高浓度RGD组大鼠YAP及α-SMA蛋白相对表达量均下降,中浓度RGD组下降最明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。细胞免疫荧光染色结果显示,与对照组相比,0.5%RGD水凝胶组、1.0%RGD水凝胶组、2.0%RGD水凝胶组HTF的F-actin绿色荧光减弱,YAP红色荧光从细胞核转位于细胞质表达。Western blot检测结果显示,与对照组相比,0.5%RGD水凝胶组、1.0%RGD水凝胶组、2.0%RGD水凝胶组HTF中YAP、CTGF、α-SMA、FN及Col I蛋白相对表达量均下降,1.0%RGD水凝胶组下降最明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 RGD多肽水凝胶的最佳作用浓度为1.0%,其通过抑制YAP蛋白的表达水平及其核转位,减少HTF的活化及其纤维化蛋白的表达,从而产生抗瘢痕效果。 展开更多
关键词 TENON囊纤维细胞 RGD多肽水凝胶 细胞外基质 Yes相关蛋白 瘢痕化
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富血小板纤维蛋白对牙龈成纤维细胞生物学功能的影响 被引量:1
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作者 王玉花 柴纪华 张好建 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期611-616,共6页
目的:探究冷冻干燥富血小板纤维蛋白(freeze-dried platelet-rich fibrin, FD-PRF)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts, hGFs)功能的影响以及其抗菌性能,为口腔黏膜炎的防治提供新思路。方法:采用流式细胞术、CCK-8检测细... 目的:探究冷冻干燥富血小板纤维蛋白(freeze-dried platelet-rich fibrin, FD-PRF)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts, hGFs)功能的影响以及其抗菌性能,为口腔黏膜炎的防治提供新思路。方法:采用流式细胞术、CCK-8检测细胞增殖(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞划痕和Transwell实验,检测FD-PRF对hGFs细胞周期、增殖和迁移的影响;采用倾注平板法和振荡培养法研究FD-PRF的抗菌作用。结果:CCK-8实验结果表明,随着FD-PRF浓度升高,hGFs的细胞数量显著增加。细胞周期结果显示,S-G2/M期的细胞比例:5%FD-PRF组>1%FD-PRF组>对照组,而G0-G1期细胞则相反。迁移实验结果显示,FD-PRF显著提升了hGFs的迁移速度。抗菌实验结果显示,FD-PRF组相比于对照组的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量明显减少。结论:FD-PRF促进hGFs进入细胞分裂期,进而促进细胞增殖。FD-PRF促进hGFs迁移。此外,本研究还证实FD-PRF具有一定的抗菌性。提示FD-PRF可以促进口腔黏膜炎的愈合。 展开更多
关键词 冷冻干燥富血小板纤维蛋白 纤维细胞 抗菌性 口腔黏膜炎
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酸性成纤维细胞生长因子保护庆大霉素对海马星形胶质细胞毒性作用的分裂原活化蛋白激酶通路机制 被引量:2
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作者 沈丽 黄巨恩 +2 位作者 黄太萍 沈慧 李校堃 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第3期270-273,共4页
目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素损伤的海马星形胶质细胞保护作用可能的机制。方法新生24 h Sprague-Dawley大鼠分离、纯化海马星形胶质细胞,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色鉴定,传3代细胞接种于24孔培养板培养3 d... 目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素损伤的海马星形胶质细胞保护作用可能的机制。方法新生24 h Sprague-Dawley大鼠分离、纯化海马星形胶质细胞,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色鉴定,传3代细胞接种于24孔培养板培养3 d,分为3组:对照组正常培养,损伤组以2.0 g/L庆大霉素培养24 h,保护组加入4.25μg/L aFGF培养24 h后再加入2.0g/L庆大霉素培养24 h。Western blotting检测P38、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1、ERK2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)1、JNK2的表达。结果成功培养细胞,纯度>95%。与对照组比较,损伤组ERK1表达增加(P<0.05);保护组与损伤组比较,P38表达增加(P<0.05),ERK1表达减少(P<0.05);其余两两比较均无显著性差异(P>0.05)。结论信号通路中的P38和ERK1可能在aFGF对抗庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞损伤过程中发挥作用。 展开更多
关键词 酸性纤维细胞生长因子 分裂原活化蛋白激酶 庆大霉素 星形胶质细胞 海马 大鼠
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