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鼠成纤维细胞因子8的克隆和表达 被引量:1
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作者 马驰 于永利 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期600-603,共4页
目的 :克隆和表达鼠成纤维细胞因子 8(FGF 8) ,以便进一步研究FGF 8的功能。方法 :根据已发表的鼠成纤维细胞因子 8的cDNA序列 ,从鼠胚胎中提取总RNA ,采用RT PCR技术 ,用设计合成的引物钓取cDNA片段。将该cDNA片段定向插入酵母表达载体... 目的 :克隆和表达鼠成纤维细胞因子 8(FGF 8) ,以便进一步研究FGF 8的功能。方法 :根据已发表的鼠成纤维细胞因子 8的cDNA序列 ,从鼠胚胎中提取总RNA ,采用RT PCR技术 ,用设计合成的引物钓取cDNA片段。将该cDNA片段定向插入酵母表达载体pYEX4T 1中 ,做DNA序列分析。用此重组质粒转化酿酒酵母 ,经Western印迹分析表达产物。用MTT和3H TdR掺入法检测重组蛋白活性。结果 :经序列分析证明 ,所钓取到的 6 0 0bp的cDNA片段确实是FGF 8的“b”选择性剪接型(FGF 8b)。Western印迹分析表明 ,该基因获得了较高效的表达 ,分子量约 5 5kD。实验组成纤维细胞株NIH3T3的MTT和3H TdR掺入量明显增多 ,拮抗组的掺入量有所下降。结论 :获得了有活性的重组鼠FGF 8蛋白 ,该蛋白能刺激NIH3T3生长 ,并且这种活性能被重组人FGFR 展开更多
关键词 RT-PCR CDNA序列 成纤维细胞因子8 克隆 表达
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草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成纤维细胞生长因子8的cDNA克隆及特征分析
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作者 孙翰昌 丁诗华 +3 位作者 方平 张芬 李云 刁晓明 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2009年第5期13-17,共5页
以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验对象,利用RACE技术克隆了草鱼成纤维细胞成长因子8(Fibro-blast Growth Factor8,FGF8)cDNA序列。实验结果显示,草鱼FGF8 cDNA序列长度为887 bp,其中5′-非翻译区长100 bp,3′-非翻译区长157 bp,... 以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验对象,利用RACE技术克隆了草鱼成纤维细胞成长因子8(Fibro-blast Growth Factor8,FGF8)cDNA序列。实验结果显示,草鱼FGF8 cDNA序列长度为887 bp,其中5′-非翻译区长100 bp,3′-非翻译区长157 bp,开放阅读框(ORF)633 bp,编码210个氨基酸的前体蛋白,包含22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽。利用已知的FGF8序列绘制系统发育树,发现草鱼与两种鲤科鱼(班马鱼、墨西哥脂鲤)聚为一簇,显示亲缘关系很近,而与其它脊椎动物如两栖类、鸟类、哺乳类的亲缘关系则相对较远,这与形态分类学的结果一致。此外,还通过生物信息学分析,揭示了草鱼FGF8的分子结构特征。 展开更多
关键词 草鱼(Ctenopharyngodon idellus) 纤维细胞因子8 CDNA克隆 特征分析
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FGF8辅助牙源性上皮诱导hDPSCs分化为成牙本质细胞及牙髓细胞 被引量:2
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作者 刘皓 姜建萍 +6 位作者 张娟娟 潘智芳 李孟杰 梁铮 赵翔宇 孙岩 刘晓影 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期730-734,共5页
目的:研究成纤维细胞生长因子8(FGF8)对成人牙髓干细胞(hDPSCs)定向分化为成牙本质细胞及牙髓组织的影响。方法:首先分离、克隆培养hDPSCs,通过流式细胞术检测细胞表面标志物鉴定hDPSCs;矿化液中添加50μg/L的FGF8诱导hDPSCs分化,通过re... 目的:研究成纤维细胞生长因子8(FGF8)对成人牙髓干细胞(hDPSCs)定向分化为成牙本质细胞及牙髓组织的影响。方法:首先分离、克隆培养hDPSCs,通过流式细胞术检测细胞表面标志物鉴定hDPSCs;矿化液中添加50μg/L的FGF8诱导hDPSCs分化,通过real-time PCR检测分化后的细胞中牙本质涎磷蛋白(DSPP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)和核心结合因子α1(Cbfa-1)在mRNA水平的表达;E11.5小鼠牙源性上皮联合FGF8与hDPSCs细胞团重组,再将组织块种植于裸鼠肾囊膜下培养,通过DNA原位杂交鉴定成牙本质细胞及牙髓细胞的来源。结果:成功分离培养hDPSCs,其表面标志物CD29和CD90呈阳性表达;经FGF8诱导的hDPSCs形成较明显的矿化结节,并且牙本质特异性蛋白DSPP、BSP及Cbfa-1表达量上调;E11.5小鼠牙源性上皮联合FGF8可以诱导hDPSCs分化为成牙本质细胞及牙髓细胞。结论:FGF8能够辅助牙源性上皮定向诱导hDPSCs分化为成牙本质细胞及牙髓细胞,并形成牙本质及牙髓腔结构。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子8 人牙髓干细胞 牙本质细胞
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组织特异性启动子介导的反义FGF8b RNA对前列腺癌细胞生长增殖能力的影响 被引量:5
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作者 吕英谦 毛泽斌 +3 位作者 周艳艳 韩宽怀 张志文 薛兆英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期755-761,共7页
利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆... 利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆转录病毒载体pSIR中构建成重组体PB 反义FGF8b pSIR .经转染包装细胞PT 6 7后将产生的复制缺陷型逆转录病毒体外感染前列腺癌细胞系PC 3M ,体外检测其生长增殖和侵袭转移能力的变化 .结果表明 ,与对照组相比 ,前列腺癌细胞感染产生反义FGF8bRNA的逆转录病毒后生长速度减慢 ,集落形成能力下降 ,体外侵袭转移能力降低 (P <0 0 1) .体外试验表明 ,前列腺组织特异性启动子介导的反义FGF8bRNA可有效降低前列腺癌细胞的体外生长增殖和转移能力 ,这为体内靶向前列腺癌基因治疗奠定了可靠的基础 . 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子8b 靶向基因治疗 组织特异性启动子 介导 反义FGF8bRNA 前列腺癌细胞 生长增殖能力
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FGF8b调控前列腺癌细胞上皮间质转化的分子机制 被引量:2
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作者 范本祎 王桂林 +2 位作者 齐范 李卓 刘怀政 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期656-661,共6页
目的:探讨成纤维细胞生长因子8b(fibroblast growth factor 8b,FGF8b)促进前列腺癌DU145细胞上皮间质转化的分子机制。方法:先选取3组细胞,分别为空白对照组(DU145细胞)、阴性对照组[(DU145细胞转染空白质粒(简称pcDNA3.1/DU145)]和实验... 目的:探讨成纤维细胞生长因子8b(fibroblast growth factor 8b,FGF8b)促进前列腺癌DU145细胞上皮间质转化的分子机制。方法:先选取3组细胞,分别为空白对照组(DU145细胞)、阴性对照组[(DU145细胞转染空白质粒(简称pcDNA3.1/DU145)]和实验组[DU145细胞转染FGF8b(简称FGF8b/DU145)]。采用Western印迹检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)通路活性,然后将FGF8b/DU145细胞及DU145细胞在PD98059(ERK激酶抑制剂)作用下分为4组:A组为2%胎牛血清(FBS)处理的FGF8b/DU145细胞;B组为2%FBS+PD98059(50μmol/L)处理的FGF8b/DU145细胞;C组为2%FBS处理的DU145细胞;D组为2%FBS+PD98059(50μmol/L)处理的DU145细胞,培养观察细胞形态学的变化,最后Western印迹和Transwell小室检测各组细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物的变化以及细胞的迁移能力改变。结果:实验组ERK1/2活性明显高于空白对照组和阴性对照组。给予PD98059后,B组与未给予PD98059组的A组相比,上皮细胞标志物上皮钙黏素蛋白表达量明显上调(P<0.05);间质标志物波形蛋白表达量明显下调(P<0.05)。细胞迁移试验结果提示:在给予PD98059后,B组FGF8b/DU145细胞的迁移能力与A组相比明显减弱。结论:FGF8b调控前列腺癌细胞DU145发生上皮-间质转化,可能由ERK激酶通路介导,MAPK激酶1作为该信号通路的关键因子之一,可能是干预前列腺侵袭转移的有效靶点。 展开更多
关键词 前列腺癌 纤维细胞生长因子-8 上皮-间质转化 侵袭转移
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FGF8在脊椎动物早期胚胎发育中的调控作用 被引量:1
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作者 孙翰昌 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第5期797-799,共3页
成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子家族的成员之一,是一种组织发育过程中的重要分泌性调控信号分子,参与脊椎动物的多种组织器官的发生与发育。早期胚胎细胞通过表达FGF8在组织和器官发育、血... 成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子家族的成员之一,是一种组织发育过程中的重要分泌性调控信号分子,参与脊椎动物的多种组织器官的发生与发育。早期胚胎细胞通过表达FGF8在组织和器官发育、血管发生、血细胞生成、附肢发生和伤口愈合等方面发挥着重要作用。FGF8不但可以在细胞外通过胞内信号通路,而且也可以进入细胞内部发挥生物学功能。本文就FGF8在脊椎动物神经系统、内脏器官、肢体发育及不对称发育等组织、器官发育中的调控作用予以阐述。 展开更多
关键词 纤维细胞生长因子8(FGF8) 脊椎动物 胚胎发育
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8p11骨髓增殖综合征的研究现状
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作者 李锋 翟勇平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1073-1077,共5页
8p11骨髓增殖综合征(8p11 myeloproliferative syndrome,EMS)是与定位于髓系和淋巴系细胞8号染色体短臂(8p11)的成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)基因易位相关的侵袭性肿瘤。EMS以外周血白细胞计数明显增高、骨髓中髓系增生、嗜酸细胞增... 8p11骨髓增殖综合征(8p11 myeloproliferative syndrome,EMS)是与定位于髓系和淋巴系细胞8号染色体短臂(8p11)的成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)基因易位相关的侵袭性肿瘤。EMS以外周血白细胞计数明显增高、骨髓中髓系增生、嗜酸细胞增多和淋巴母细胞淋巴瘤/白血病为特征。EMS短期内将进展为急性白血病。EMS预后差,目前只有异基因造血干细胞移植能有效控制该病。在分子水平,所有病例均涉及8p11的FGFR1基因易位,新融合蛋白通过诱导FGFR1基因二聚体化,组成性激活酪氨酸激酶活性,导致细胞增殖及恶性转化。迄今,已鉴定出的与FGFR1形成融合蛋白的伙伴基因有14例(包括13例易位与1例插入),现就其分子生物学特征、发病机制和治疗等的研究现状作一综述。 展开更多
关键词 8p11骨髓增殖综合征 细胞白血病 淋巴瘤综合征 骨髓增殖性肿瘤 纤维细胞生长因子受体1t(8 13)(p11 q12)
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