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鸡斑联蛋白基因的慢病毒干扰载体的构建及筛选被引量：2: 1; 作者戴国俊孙大辉 +7 位作者林雨鑫孙明明王翔王金玉张跟喜谢恺舟施会强侍苗苗《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1330-1336,共7页; 本试验旨在构建4条鸡斑联蛋白(zyxin)基因的RNAi慢病毒载体,对其进行滴度测定,并进行有效干扰靶点的筛选,为以后开展鸡zyxin基因抗球虫机理的研究奠定基础。提取鸡胸腺组织的RNA,反转录,扩增zyxin基因的编码区,并将其克隆到真核表达载体... 展开更多; 关键词 zyxin基因 RNAI 慢病毒干扰载体真核表达载体鸡; 在线阅读下载PDF 职称材料

脊髓钝挫伤后慢病毒干扰水通道蛋白4对大鼠运动功能及Rho表达的影响被引量：1: 2; 作者何正云夏登桃 +6 位作者肖颜唐玉玲卫家豪徐轩李沁轩张晓荣成《成都医学院学报》 CAS 2023年第1期39-44,共6页; 目的探讨脊髓钝挫伤(SCC)后,慢病毒干扰水通道蛋白4(AQP4)对大鼠运动功能的影响,并观察凋亡相关因子Rho表达的变化。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水组(SCC组)、空载组(Vector组)和慢病毒组(AQP4RNAi组,制备慢病毒AQP... 展开更多; 关键词脊髓钝挫伤慢病毒干扰水通道蛋白4 凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

附睾血管内皮生长因子基因慢病毒干扰载体的构建: 3; 作者戴研平王平高晓勤《解剖学杂志》 CAS 2022年第5期445-448,共4页; 目的:以血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA为靶点,设计、构建VEGF的RNA干扰慢病毒载体,并对其在大鼠附睾的沉默效果进行验证。方法:构建3种附睾VEGF-shRNA慢病毒表达载体VEGF-shRNA-1、VEGF-shRNA-2、VEGF-shRNA-3,提取3种阳性克隆质粒测序... 展开更多; 关键词慢病毒干扰血管内皮生长因子基因沉默附睾大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

慢病毒介导的RNA干扰通过下调白细胞介素6抑制损伤后星形胶质细胞中波形蛋白的表达: 4; 作者向阳钟占琼 +2 位作者祝琦吴番娜张晓《解剖学杂志》 CAS 2020年第4期295-299,F0003,共6页; 目的:探讨用慢病毒介导的RNAi方法抑制白细胞介素6(IL-6),观察其对损伤后星形胶质细胞中波形蛋白(Vim)表达的影响。方法:选取3日龄SD大鼠的大脑皮质,体外培养星形胶质细胞,分为载体组和病毒组,2组均制备细胞划伤模型,采用qRT-PCR检测Vim... 展开更多; 关键词白细胞介素6 波形蛋白慢病毒干扰星形胶质细胞胶质化反应细胞培养大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

慢病毒介导的RNA干扰鉴定RIG-Ⅰ、MDA-5和TLR3在猪上皮细胞识别RNA病毒中的作用: 5; 作者 Linda Hüsser 于琳琳《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第8期220-220,共1页; 病原体识别受体是宿主抗病毒免疫反应所必需的,这些特异的受体能识别保守的病毒化合物并诱导Ⅰ型干扰素(IFN)和促炎细胞因子。本试验在猪细胞系PK-15中研究了RIG-Ⅰ、MDA-5和TLR3在IFN-β对古典猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、水泡... 展开更多; 关键词古典猪瘟病毒口蹄疫病毒慢病毒介导RNA干扰 IFN-Β 病原体识别受体; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白激酶B2慢病毒载体的构建及其沉默效果的验证: 6; 作者戴研平高晓勤《解剖学杂志》 CAS 2021年第2期118-122,共5页; 目的:利用RNA干扰技术,以蛋白激酶B 2(AKT2)的mRNA为靶点,设计、构建AKT-2的RNA干扰慢病毒载体,并对其沉默效果进行验证。方法:根据目的基因设计3个小干扰RNA(siRNA)靶点,进行引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切... 展开更多; 关键词蛋白激酶B2 慢病毒干扰基因沉默附睾; 在线阅读下载PDF 职称材料

PRDM14在胰腺癌组织中的表达及对肿瘤干细胞迁移的影响被引量：2: 7; 作者陈柯帆陆运鑫 +3 位作者莫苑君卢旭全谭智威侯恩存《山西医科大学学报》 CAS 2020年第2期129-133,共5页; 目的探讨正性调节区锌指蛋白14(PRDM14)在胰腺癌组织中的表达及对肿瘤干细胞迁移的影响。方法50只裸鼠被随机分为胰腺癌Ⅰ组、胰腺癌Ⅱ组、胰腺癌Ⅲ组、胰腺炎组和对照组,每组10只。胰腺癌Ⅰ组建立人胰腺癌细胞株SW1990原位植瘤模型,胰... 展开更多; 关键词胰腺癌正性调节区锌指蛋白14 RNA慢病毒干扰人胰腺癌细胞细胞迁移; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡斑联蛋白基因的慢病毒干扰载体的构建及筛选被引量：2: 1; 作者戴国俊孙大辉林雨鑫孙明明王翔王金玉张跟喜谢恺舟施会强侍苗苗; 机构扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏京海禽业集团有限公司; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1330-1336,共7页; 基金国家肉鸡产业技术体系(nyctx-42-G1-05) 江苏省高校自然科学研究重大项目(11KJA230001) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD); 文摘本试验旨在构建4条鸡斑联蛋白(zyxin)基因的RNAi慢病毒载体,对其进行滴度测定,并进行有效干扰靶点的筛选,为以后开展鸡zyxin基因抗球虫机理的研究奠定基础。提取鸡胸腺组织的RNA,反转录,扩增zyxin基因的编码区,并将其克隆到真核表达载体Pex-6上。设计针对zyxin的shRNA序列,应用基因重组技术插入到Lv3慢病毒表达载体中,将lv3-shRNA载体与包装质粒pGag/Pol、pRev、Pvsv-G共转染293T细胞,进行病毒包装。将得到的病毒原液10倍稀释6个梯度,分别转染293T细胞,进行滴度的测定。将构建好的4条慢病毒载体与Pex-6-zyxin真核表达载体共转染293T细胞,运用RT-PCR和Western-blot方法进行有效干扰靶点的筛选。构建4条针对目的基因zyxin的RNAi慢病毒穿梭质粒表达载体CO1、CO2、CO3、CO4和1个阴性对照质粒,经测序鉴定正确;共转染293T细胞包装病毒并浓缩后滴度达1×108 TU·mL-1,适合感染目的细胞,经过筛选,CO3对zyxin在293T细胞中的表达干扰效果最佳。成功构建了zyxin基因RNA干扰慢病毒表达载体,并进行了有效干扰靶点的筛选,为进一步研究zyxin基因的功能奠定了基础。; 关键词 zyxin基因 RNAI 慢病毒干扰载体真核表达载体鸡; Keywords zyxin RNAi recombinant lenti-virus interference vectors eukaryotic expression vector chicken; 分类号 S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脊髓钝挫伤后慢病毒干扰水通道蛋白4对大鼠运动功能及Rho表达的影响被引量：1: 2; 作者何正云夏登桃肖颜唐玉玲卫家豪徐轩李沁轩张晓荣成; 机构成都医学院基础医学院实验教学中心; 出处《成都医学院学报》 CAS 2023年第1期39-44,共6页; 基金四川省大学生创新创业训练项目(No:201813705063)。; 文摘目的探讨脊髓钝挫伤(SCC)后,慢病毒干扰水通道蛋白4(AQP4)对大鼠运动功能的影响,并观察凋亡相关因子Rho表达的变化。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水组(SCC组)、空载组(Vector组)和慢病毒组(AQP4RNAi组,制备慢病毒AQP4干扰模型),每组32只。SCC组、AQP4RNAi组及Vector组均采用改良Allen’s法制备SCC模型,术后12 h及术后1、3 d,采用大鼠脊髓损伤(BBB)评分评估4组后肢运动功能;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测4组脊髓组织中rho的表达;采用免疫组织化学方法检测Rho在4组脊髓组织中的表达;生物信息学分析预测AQP4与Rho之间的相关性。结果运动功能评分结果显示,术后12 h SCC组、Vector组和AQP4 RNAi组BBB评分均为0分,术后3 d AQP4 RNAi组BBB评分较Vector组高(P<0.05)。GeneMANIA结果显示,AQP4与Rho存在间接共表达关系。RT-PCR和免疫组织化学结果显示,术后12 h及术后1、3 d AQP4RNAi组脊髓组织中rho表达均低于Vector组(P<0.05);SCC组脊髓组织中rho表达均高于Sham组(P<0.05)。结论大鼠SCC后脊髓组织中Rho表达上调,而干扰AQP4能使其Rho表达下调,减少神经细胞凋亡,有利于大鼠运动功能恢复。; 关键词脊髓钝挫伤慢病毒干扰水通道蛋白4 凋亡; Keywords Spinal cord contusion Lentiviral interference Aquaporin 4 Apoptosis; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名附睾血管内皮生长因子基因慢病毒干扰载体的构建: 3; 作者戴研平王平高晓勤; 机构岳阳职业技术学院医学院遵义医药高等专科学校基础医学院; 出处《解剖学杂志》 CAS 2022年第5期445-448,共4页; 文摘目的:以血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA为靶点,设计、构建VEGF的RNA干扰慢病毒载体,并对其在大鼠附睾的沉默效果进行验证。方法:构建3种附睾VEGF-shRNA慢病毒表达载体VEGF-shRNA-1、VEGF-shRNA-2、VEGF-shRNA-3,提取3种阳性克隆质粒测序,转染HEK293-T细胞后产生慢病毒质粒。大鼠随机分为空白对照组、NC-shRNA阴性感染组、VEGF-shRNA-1感染组、VEGF-shRNA-2感染组、VEGF-shRNA-3感染组,将病毒液分别注射到各组大鼠双侧附睾;实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹检测各组大鼠附睾VEGF的mRNA及蛋白沉默效果。结果:测序结果证明3种慢病毒载体被包装成功。感染大鼠附睾后,VEGF感染组mRNA及蛋白表达量均较阴性感染组和空白对照组明显降低,其中以VEGF-shRNA-3感染组干扰效果更为有效。结论:成功设计了VEGF基因的RNA干扰靶点和制备了VEGF基因的慢病毒载体,VEGF-shRNA-3能有效抑制附睾VEGF的表达。; 关键词慢病毒干扰血管内皮生长因子基因沉默附睾大鼠; Keywords lentivirus interference vascular endothelial growth factor gene silencing epididymis rat; 分类号 R-33 [医药卫生] R698.2 [医药卫生—泌尿科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢病毒介导的RNA干扰通过下调白细胞介素6抑制损伤后星形胶质细胞中波形蛋白的表达: 4; 作者向阳钟占琼祝琦吴番娜张晓; 机构江油市人民医院检验科成都中医药大学基础医学院成都医学院基础医学实验教学中心; 出处《解剖学杂志》 CAS 2020年第4期295-299,F0003,共6页; 文摘目的:探讨用慢病毒介导的RNAi方法抑制白细胞介素6(IL-6),观察其对损伤后星形胶质细胞中波形蛋白(Vim)表达的影响。方法:选取3日龄SD大鼠的大脑皮质,体外培养星形胶质细胞,分为载体组和病毒组,2组均制备细胞划伤模型,采用qRT-PCR检测Vim mRNA的表达,免疫印迹检测Vim蛋白表达,用免疫荧光检测Vim的定位,MTT检测划伤模型中星形胶质细胞增殖率,免疫荧光检测GFAP用于观察划伤模型中星形胶质细胞活性。结果:划伤细胞2 d后,病毒组的Vim mRNA和蛋白表达量较载体组明显下降。Vim主要在星形胶质细胞胞质中表达。病毒组中星形胶质细胞增殖情况和活性低于载体组。结论:用慢病毒介导的RNAi方法抑制炎症因子IL-6,可以下调反应性胶质化细胞中Vim的表达,影响星形胶质细胞胶质化反应,可能抑制胶质瘢痕形成,对神经细胞的再生具有积极作用。; 关键词白细胞介素6 波形蛋白慢病毒干扰星形胶质细胞胶质化反应细胞培养大鼠; Keywords interleukin-6 vimentin lentivirus interference astrocyte gliosis cell culture rat; 分类号 R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢病毒介导的RNA干扰鉴定RIG-Ⅰ、MDA-5和TLR3在猪上皮细胞识别RNA病毒中的作用: 5; 作者 Linda Hüsser 于琳琳; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第8期220-220,共1页; 文摘病原体识别受体是宿主抗病毒免疫反应所必需的,这些特异的受体能识别保守的病毒化合物并诱导Ⅰ型干扰素(IFN)和促炎细胞因子。本试验在猪细胞系PK-15中研究了RIG-Ⅰ、MDA-5和TLR3在IFN-β对古典猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、水泡性口炎病毒(VSV)和A型流感病毒(IAV)的识别中的作用。本研究鉴定了猪基因特异性小干扰RNA序列,并用慢病毒(LV)系统来表达相应的短发夹RNA,构建了基因表达下调细胞系,并检测基因表达下调水平与时间和IFN-β刺激的相关性。试验细胞经多次传代,报告基因eGFP的表达和目的基因的RNA减少水平都是稳定的,而后者相对变化较大。IFN-β诱导干扰素应答基因(如RIG-Ⅰ)表达,但其水平在试验细胞系中仍低于对照细胞。病毒介导的IFN-βmRNA反应结果表明,在PK-15细胞中,口蹄疫病毒的识别完全是由MDA-5介导的,而VSV和IAV主要由RIG-Ⅰ检测到,MDA-5也起到一定作用,CSFV是通过MDA-5,RIG-Ⅰ和TLR3识别。; 关键词古典猪瘟病毒口蹄疫病毒慢病毒介导RNA干扰 IFN-Β 病原体识别受体; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白激酶B2慢病毒载体的构建及其沉默效果的验证: 6; 作者戴研平高晓勤; 机构贵州医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室遵义医药高等专科学校基础医学院岳阳市岳阳楼区人民医院; 出处《解剖学杂志》 CAS 2021年第2期118-122,共5页; 基金贵州省科学技术基金(黔科合人才团队[2014]4005号)。; 文摘目的:利用RNA干扰技术,以蛋白激酶B 2(AKT2)的mRNA为靶点,设计、构建AKT-2的RNA干扰慢病毒载体,并对其沉默效果进行验证。方法:根据目的基因设计3个小干扰RNA(siRNA)靶点,进行引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体。测序验证正确的转化子,进行高纯度质粒抽提。提取3种阳性克隆质粒测序,转染HEK293-T细胞后产生慢病毒质粒。实验大鼠被随机分为5组,每组10只,空白对照组不注射慢病毒,NC-shRNA阴性感染组、PL-AKT2-shRNA-1感染组、PL-AKT2-shRNA-2感染组、PL-AKT2-shRNA-3感染组。大鼠附睾分别被注射200μL含有NC-shRNA、PL-AKT2-shRNA-1、PLAKT2-shRNA-2、PL-AKT2-shRNA-3的病毒液;免疫印迹检测大鼠附睾AKT2的蛋白沉默效果。结果:测序结果证明3种慢病毒载体被包装成功。感染大鼠附睾后,AKT2的蛋白表达量均较阴性感染组和正常对照组明显降低,其中以PL-AKT2-shRNA-3质粒组干扰效果更为有效。结论:成功设计了AKT-2基因的RNA干扰靶点和制备了AKT-2基因的慢病毒载体,基因沉默效果明显。; 关键词蛋白激酶B2 慢病毒干扰基因沉默附睾; Keywords serine/threonine kinase B2 lentivirus interference gene silencing epididymis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PRDM14在胰腺癌组织中的表达及对肿瘤干细胞迁移的影响被引量：2: 7; 作者陈柯帆陆运鑫莫苑君卢旭全谭智威侯恩存; 机构广西中医药大学附属瑞康医院肿瘤科; 出处《山西医科大学学报》 CAS 2020年第2期129-133,共5页; 基金广西中医药管理局民族医药科研课题(GZZC16-21)。; 文摘目的探讨正性调节区锌指蛋白14(PRDM14)在胰腺癌组织中的表达及对肿瘤干细胞迁移的影响。方法50只裸鼠被随机分为胰腺癌Ⅰ组、胰腺癌Ⅱ组、胰腺癌Ⅲ组、胰腺炎组和对照组,每组10只。胰腺癌Ⅰ组建立人胰腺癌细胞株SW1990原位植瘤模型,胰腺癌Ⅱ组建立PRDM14-shRNA慢病毒干扰的人胰腺癌细胞株SW1990原位植瘤模型,胰腺癌Ⅲ组建立control病毒干扰的人胰腺癌细胞株SW1990原位植瘤模型,胰腺炎组采用腹腔注射雨蛙素和脂多糖建立慢性胰腺炎模型,对照组腹腔注射生理盐水。造模完成后8周,采集小鼠胰腺,免疫组化检测胰腺组织PRDM1表达,划痕实验检测人胰腺癌细胞株SW1990(胰腺癌Ⅰ组)、PRDM14-shRNA慢病毒干扰的人胰腺癌细胞株SW1990(胰腺癌Ⅱ组)和control病毒干扰的人胰腺癌细胞株SW1990(胰腺癌Ⅲ组)的迁移能力。结果免疫组化结果显示,胰腺癌组小鼠PRDM14阳性表达率明显高于对照组(均P<0.05);胰腺癌Ⅰ组和胰腺癌Ⅲ组小鼠PRDM14阳性表达率明显高于胰腺炎组小鼠(均P<0.05),胰腺癌Ⅰ组和胰腺癌Ⅲ组PRDM14阳性表达率及PRDM14表达量均明显高于胰腺癌Ⅱ组,组间比较差异有统计学意义(均P<0.05)。划痕实验结果显示,胰腺癌Ⅰ组和胰腺癌Ⅲ组肿瘤干细胞迁移能力明显高于胰腺癌Ⅱ组。结论PRDM14在胰腺癌组织中呈高表达,可能与胰腺癌的发生、侵袭和转移存在紧密关系,有待进一步研究证实。; 关键词胰腺癌正性调节区锌指蛋白14 RNA慢病毒干扰人胰腺癌细胞细胞迁移; Keywords pancreatic cancer PR domain zinc finger protein 14 RNA lentiviral interference human pancreatic cancer cells cell migration; 分类号 R735.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鸡斑联蛋白基因的慢病毒干扰载体的构建及筛选	戴国俊孙大辉林雨鑫孙明明王翔王金玉张跟喜谢恺舟施会强侍苗苗	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	脊髓钝挫伤后慢病毒干扰水通道蛋白4对大鼠运动功能及Rho表达的影响	何正云夏登桃肖颜唐玉玲卫家豪徐轩李沁轩张晓荣成	《成都医学院学报》 CAS	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	附睾血管内皮生长因子基因慢病毒干扰载体的构建	戴研平王平高晓勤	《解剖学杂志》 CAS	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	慢病毒介导的RNA干扰通过下调白细胞介素6抑制损伤后星形胶质细胞中波形蛋白的表达	向阳钟占琼祝琦吴番娜张晓	《解剖学杂志》 CAS	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	慢病毒介导的RNA干扰鉴定RIG-Ⅰ、MDA-5和TLR3在猪上皮细胞识别RNA病毒中的作用	Linda Hüsser 于琳琳	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	蛋白激酶B2慢病毒载体的构建及其沉默效果的验证	戴研平高晓勤	《解剖学杂志》 CAS	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	PRDM14在胰腺癌组织中的表达及对肿瘤干细胞迁移的影响	陈柯帆陆运鑫莫苑君卢旭全谭智威侯恩存	《山西医科大学学报》 CAS	2020	2	在线阅读下载PDF 职称材料