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人干扰素基因植物表达载体的构建及其在人参愈伤组织细胞中的表达 被引量:8
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作者 任琦 盛军 任志霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期852-855,共4页
目的:利用组织培养人参愈伤组织细胞表达人干扰素,探讨用植物细胞表达人类基因的可行性。方法:用PCR从pBV889扩增人干扰素α2b(hIFN-α2b)编码基因,将其克隆于pMD18-T载体和pBI121,进而构建植物细胞表达载体pBIFN。用冻融法将pBIFN导入... 目的:利用组织培养人参愈伤组织细胞表达人干扰素,探讨用植物细胞表达人类基因的可行性。方法:用PCR从pBV889扩增人干扰素α2b(hIFN-α2b)编码基因,将其克隆于pMD18-T载体和pBI121,进而构建植物细胞表达载体pBIFN。用冻融法将pBIFN导入根瘤农杆菌LBA4404,经卡那霉素和利福霉素筛选后利用农杆菌介导的转化法将hIFN-α2基因导入人参愈伤组织细胞。经G418筛选,形成阳性细胞。用PCR、RT-PCR、Western blot和WISH/VSV系统检测转基因组织。结果:经PCR检测表明hIFN-α2b基因已成功整合到人参愈伤组织细胞基因组中。RT-PCR证明存在hIFN-α2b基因的转录产物。Western blot分析表明转基因人参愈伤组织细胞能有效表达hIFN-α2b蛋白。WISH/VSV系统检测分析表明表达的hIFN-α2b具有生物学活性。结论:本研究利用转基因人参愈伤组织细胞成功地表达了人干扰素,为进一步提高口服干扰素的疗效打下基础。 展开更多
关键词 人干扰素α2b 人参愈伤组织细胞 转基因 根瘤农杆菌
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红豆杉细胞提取物对肿瘤细胞SMMC-7721和HEp-2的作用研究 被引量:2
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作者 鲁翠涛 梅兴国 +1 位作者 龚伟 刘燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期801-803,共3页
目的 了解红豆杉细胞提取物对肿瘤细胞SMMC 772 1和HEp 2生长的影响及其抑制机制。 方法 运用MTT比色法测定细胞毒性和流式细胞仪分析细胞周期。结果 红豆杉细胞提取物对SMMC 772 1和HEp 2的IC50 分别为 0 1 61 4 gDCW·L- 1 和... 目的 了解红豆杉细胞提取物对肿瘤细胞SMMC 772 1和HEp 2生长的影响及其抑制机制。 方法 运用MTT比色法测定细胞毒性和流式细胞仪分析细胞周期。结果 红豆杉细胞提取物对SMMC 772 1和HEp 2的IC50 分别为 0 1 61 4 gDCW·L- 1 和 0 2 75 6gDCW·L- 1 。细胞周期分析发现两肿瘤细胞G2 ~M期含量均有所增高。结论 红豆杉细胞提取物可以通过诱导SMMC 772 1和HEp 展开更多
关键词 红豆杉 愈伤组织细胞 SMMC-7721 HEP-2 细胞毒性 细胞周期
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三七悬浮细胞生物合成绿原酸类物质及其生物活性 被引量:1
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作者 周倍 刘楠 +3 位作者 刘泽波 庄英萍 王泽建 郭美锦 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期515-528,共14页
利用三七(Panax notoginseng)悬浮细胞生物合成绿原酸类物质(CGAs),并对其生物活性进行了研究。对三七细胞中CGAs进行定性分析,优化了细胞培养条件以及6种诱导模式,测定了三七细胞CGAs的抗氧化及α-葡萄糖苷酶活性抑制能力。结果表明三... 利用三七(Panax notoginseng)悬浮细胞生物合成绿原酸类物质(CGAs),并对其生物活性进行了研究。对三七细胞中CGAs进行定性分析,优化了细胞培养条件以及6种诱导模式,测定了三七细胞CGAs的抗氧化及α-葡萄糖苷酶活性抑制能力。结果表明三七愈伤组织内含有4种CGAs;最优工艺条件为:B5+40 g/L蔗糖,pH 7.5,15%接种量;经30μmol/L茉莉酸甲酯诱导3 d后,CGAs产量(684.07 mg/L)比原工艺(475.18 mg/L)提高了0.44倍;三七细胞CGAs具有良好的抗氧化及α-葡萄糖苷酶活性抑制能力。 展开更多
关键词 三七愈伤组织细胞 悬浮培养 绿原酸生物合成 工艺优化 生物活性
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