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基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用
被引量:
3
1
作者
娄加陶
吴传勇
+3 位作者
薛剑
林强
周海燕
朱晓
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期284-289,共6页
目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,...
目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,手术后留取新鲜肺癌组织,提取基因组DNA,采用多重聚合酶链式反应(PCR)对组织样本的EGFR基因18、19、20和21号外显子中包含8种高频突变位点的特异片段进行扩增,并经多重连接酶检测反应(LDR)以特异性探针对扩增片段中的突变进行连接,再基于悬浮点阵技术平台对连接产物进行检测,最后通过DNA测序对检测结果进行验证。结果在61例NSCLC组织样本中,运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术共检出EGFR基因突变19例,突变率为31.1%,其中外显子19缺失突变E746-A750 del(1)、E746-A750 del(2)各1例,外显子20点突变T790M 1例,外显子21点突变L858R 14例、L861Q2例,经DNA测序验证完全正确。结论运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术初步建立了一种新型的EGFR基因突变检测方法,能同时准确检测EGFR基因中的8种高频突变,具有高通量和高特异性的特点,有望用于NSCLC患者进入EGFR-TKI药物靶向治疗前的EGFR基因突变检测。
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关键词
表皮生长因子受体
悬浮点阵技术
聚合酶链式反应
连接酶检测反应
非小细胞肺癌
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职称材料
题名
基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用
被引量:
3
1
作者
娄加陶
吴传勇
薛剑
林强
周海燕
朱晓
机构
上海交通大学附属胸科医院检验科
上海交通大学附属胸科医院胸外科
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期284-289,共6页
基金
上海市重大科技攻关子课题(09441900702)~~
文摘
目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,手术后留取新鲜肺癌组织,提取基因组DNA,采用多重聚合酶链式反应(PCR)对组织样本的EGFR基因18、19、20和21号外显子中包含8种高频突变位点的特异片段进行扩增,并经多重连接酶检测反应(LDR)以特异性探针对扩增片段中的突变进行连接,再基于悬浮点阵技术平台对连接产物进行检测,最后通过DNA测序对检测结果进行验证。结果在61例NSCLC组织样本中,运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术共检出EGFR基因突变19例,突变率为31.1%,其中外显子19缺失突变E746-A750 del(1)、E746-A750 del(2)各1例,外显子20点突变T790M 1例,外显子21点突变L858R 14例、L861Q2例,经DNA测序验证完全正确。结论运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术初步建立了一种新型的EGFR基因突变检测方法,能同时准确检测EGFR基因中的8种高频突变,具有高通量和高特异性的特点,有望用于NSCLC患者进入EGFR-TKI药物靶向治疗前的EGFR基因突变检测。
关键词
表皮生长因子受体
悬浮点阵技术
聚合酶链式反应
连接酶检测反应
非小细胞肺癌
Keywords
epidermal growth factor receptor
suspension array technology
polymerase chain reaction
ligase detection reaction
non-small cell lung cancer
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用
娄加陶
吴传勇
薛剑
林强
周海燕
朱晓
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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