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恒温实时荧光法快速检测不同样品中的单增李斯特菌
被引量：
5
1
作者
张文敏
石育娇
+8 位作者
戚成
田明胜
朱智
殷荣永
钟少水
王大鹏
何更生
冯元琦
董庆利
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期44-50,共7页
为实现乳制品中、临床病人腹泻物中单增李斯特菌的快速检测,选用外引物F3和B3、内引物FIP和BIP作为环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的特异性引物,采用便携式荧光恒温扩增仪作为检测平台,选取单增李斯特菌...
为实现乳制品中、临床病人腹泻物中单增李斯特菌的快速检测,选用外引物F3和B3、内引物FIP和BIP作为环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的特异性引物,采用便携式荧光恒温扩增仪作为检测平台,选取单增李斯特菌标准菌株进行基因组DNA灵敏度和最低检测限测定;选用人工污染的15份乳制品样品和20份腹泻样品进行适用性实验;以上样品同时利用国标法GB4789.30-2010进行菌落计数。结果表明:恒温实时荧光法对纯培养的单增李斯特菌基因组DNA、乳制品和腹泻样品中的单增李斯特菌基因组DNA灵敏度均达到10~2CFU/mL、检测限均达到10~3 CFU/mL;阴性样本出现假阳性的概率分别为0、0.03%和0;单增李斯特菌污染浓度在检出限以上的阳性样本检出率分别为100%、99%和92%。研究表明恒温实时荧光法的检测结果与传统国标培养结果基本一致,恒温实时荧光法适用于乳制品中和临床腹泻样本中单增李斯特菌的快速检测。
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关键词
恒温实时荧光法
快速检测
单增李斯特菌
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职称材料
恒温实时荧光法快速检测简单异尖线虫方法的建立
被引量：
3
2
作者
张森
邓艳
+5 位作者
黄燕琼
何淑华
戴金
赵尚志
石磊
柏建山
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第24期53-57,共5页
为了快速鉴定简单异尖线虫,本研究建立了一套检测简单异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对简单异尖线虫ITS2区域设计引物特异性识别靶标基因。进行了特...
为了快速鉴定简单异尖线虫,本研究建立了一套检测简单异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对简单异尖线虫ITS2区域设计引物特异性识别靶标基因。进行了特异性、灵敏度、重复性和实际样品的测试,并与传统的PCR方法进行比较。结果表明,该方法能够特异性扩增简单异尖线虫DNA,对含有简单异尖线虫ITS2目的基因片段的质粒DNA检测限为1 fg/μL,灵敏度比传统的PCR方法高100倍,重复性良好,对实际样品进行检测,与传统的PCR测序方法结果相符。本研究建立的恒温实时荧光快速检测方法适用于特异性检测简单异尖线虫。
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关键词
恒温实时荧光法
简单异尖线虫
快速检测
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职称材料
题名
恒温实时荧光法快速检测不同样品中的单增李斯特菌
被引量：
5
1
作者
张文敏
石育娇
戚成
田明胜
朱智
殷荣永
钟少水
王大鹏
何更生
冯元琦
董庆利
机构
上海理工大学医疗器械与食品学院
上海食品药品监督管理局
上海捷易生物科技有限公司
上海交通大学农业与生物学院
复旦大学公共卫生学院
广州迪澳生物科技有限公司
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期44-50,共7页
基金
国家重点研发计划(2018YFC1602902)
国家“十二五”科技支撑计划项目(2015BAK36B04)
国家自然科学基金项目(31271896)
文摘
为实现乳制品中、临床病人腹泻物中单增李斯特菌的快速检测,选用外引物F3和B3、内引物FIP和BIP作为环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的特异性引物,采用便携式荧光恒温扩增仪作为检测平台,选取单增李斯特菌标准菌株进行基因组DNA灵敏度和最低检测限测定;选用人工污染的15份乳制品样品和20份腹泻样品进行适用性实验;以上样品同时利用国标法GB4789.30-2010进行菌落计数。结果表明:恒温实时荧光法对纯培养的单增李斯特菌基因组DNA、乳制品和腹泻样品中的单增李斯特菌基因组DNA灵敏度均达到10~2CFU/mL、检测限均达到10~3 CFU/mL;阴性样本出现假阳性的概率分别为0、0.03%和0;单增李斯特菌污染浓度在检出限以上的阳性样本检出率分别为100%、99%和92%。研究表明恒温实时荧光法的检测结果与传统国标培养结果基本一致,恒温实时荧光法适用于乳制品中和临床腹泻样本中单增李斯特菌的快速检测。
关键词
恒温实时荧光法
快速检测
单增李斯特菌
Keywords
real time fluorescence isothermal amplification assay
rapid detection
Lis.monocytegenes
分类号
R37 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
恒温实时荧光法快速检测简单异尖线虫方法的建立
被引量：
3
2
作者
张森
邓艳
黄燕琼
何淑华
戴金
赵尚志
石磊
柏建山
机构
华南理工大学食品科学与工程学院
广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室
暨南大学食品安全与营养研究院
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第24期53-57,共5页
基金
国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK055)
广东省科技项目(2014A040401063)
文摘
为了快速鉴定简单异尖线虫,本研究建立了一套检测简单异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对简单异尖线虫ITS2区域设计引物特异性识别靶标基因。进行了特异性、灵敏度、重复性和实际样品的测试,并与传统的PCR方法进行比较。结果表明,该方法能够特异性扩增简单异尖线虫DNA,对含有简单异尖线虫ITS2目的基因片段的质粒DNA检测限为1 fg/μL,灵敏度比传统的PCR方法高100倍,重复性良好,对实际样品进行检测,与传统的PCR测序方法结果相符。本研究建立的恒温实时荧光快速检测方法适用于特异性检测简单异尖线虫。
关键词
恒温实时荧光法
简单异尖线虫
快速检测
Keywords
real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification
Anisakis sirnplex
rapid detection
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
恒温实时荧光法快速检测不同样品中的单增李斯特菌
张文敏
石育娇
戚成
田明胜
朱智
殷荣永
钟少水
王大鹏
何更生
冯元琦
董庆利
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
恒温实时荧光法快速检测简单异尖线虫方法的建立
张森
邓艳
黄燕琼
何淑华
戴金
赵尚志
石磊
柏建山
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
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