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通过快速定点突变表征人源含硒单链抗体酶的底物结合部位
被引量：
2
1
作者
宋健
徐俊杰
+3 位作者
魏景艳
于扬
孙卫国
张桂荣
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期502-506,共5页
为了对人源含硒单链抗体酶Se-scFv-B3的底物结合部位和催化基团进行研究,在理论预测的基础上,通过快速定点突变法分别在2个理论预测的底物结合部位(位点1和位点2)内选定Ala180和Ala44定点突变为丝氨酸(Ser).2个突变体蛋白经化学修饰将Se...
为了对人源含硒单链抗体酶Se-scFv-B3的底物结合部位和催化基团进行研究,在理论预测的基础上,通过快速定点突变法分别在2个理论预测的底物结合部位(位点1和位点2)内选定Ala180和Ala44定点突变为丝氨酸(Ser).2个突变体蛋白经化学修饰将Ser转变成谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团硒代半胱氨酸(Sec)后,前者的GPX活力达到了Se-scFv-B3的2倍多,而后者的GPX活力没有明显提高,这表明位点1可能是主要的底物结合部位,与理论预测的结果一致.
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关键词
快速定点突变
人源含硒单链抗体酶
底物结合部位
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职称材料
基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性
2
作者
郭笑
于扬
+7 位作者
陈龙
王铭铄
金梦梦
刘广娜
张黎
李涛
高壮
魏景艳
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期2109-2113,共5页
先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137,Cys-154,Cys-165和Cys-205突变为Ser,然后将催化中心14,15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys,再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec,即把GPx的...
先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137,Cys-154,Cys-165和Cys-205突变为Ser,然后将催化中心14,15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys,再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec,即把GPx的催化基团引入到hGSTZ1c-1c中,高效地获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的模拟酶.其中制备的3个含硒突变体15C,14C/15C和17C均显示出明显的GPx活力.对非含硒突变体性质研究发现,Ser-14或Ser-15任何一个残基发生突变都会导致hGSTZ1c-1c的GST活力几乎丧失,表明Ser-14和Ser-15在催化反应中发挥着重要作用,但前者主要参与底物结合,后者更侧重于催化.
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关键词
快速定点突变
谷胱甘肽过氧化物酶
人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶
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职称材料
题名
通过快速定点突变表征人源含硒单链抗体酶的底物结合部位
被引量：
2
1
作者
宋健
徐俊杰
魏景艳
于扬
孙卫国
张桂荣
机构
吉林大学电子科学与工程学院
白求恩医学院
药学院
吉林医药学院基础医学院
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期502-506,共5页
基金
国家自然科学基金(批准号:30870540)
吉林省科技发展计划项目(批准号:20070726,20070425,200705368)资助
文摘
为了对人源含硒单链抗体酶Se-scFv-B3的底物结合部位和催化基团进行研究,在理论预测的基础上,通过快速定点突变法分别在2个理论预测的底物结合部位(位点1和位点2)内选定Ala180和Ala44定点突变为丝氨酸(Ser).2个突变体蛋白经化学修饰将Ser转变成谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团硒代半胱氨酸(Sec)后,前者的GPX活力达到了Se-scFv-B3的2倍多,而后者的GPX活力没有明显提高,这表明位点1可能是主要的底物结合部位,与理论预测的结果一致.
关键词
快速定点突变
人源含硒单链抗体酶
底物结合部位
Keywords
Quikchange site-directed mutagenesis
Human selenium-containing sigle chain abzyme
Substrate-binding site
分类号
O629.7 [理学—有机化学]
Q511 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性
2
作者
郭笑
于扬
陈龙
王铭铄
金梦梦
刘广娜
张黎
李涛
高壮
魏景艳
机构
吉林大学药学院
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期2109-2113,共5页
基金
国家自然科学基金(批准号:30970633
31270851)
+1 种基金
吉林大学医学部博士研究生优秀拔尖人才培育计划(批准号:470110000006)
大学生创新训练计划(批准号:2013B73333)资助~~
文摘
先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137,Cys-154,Cys-165和Cys-205突变为Ser,然后将催化中心14,15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys,再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec,即把GPx的催化基团引入到hGSTZ1c-1c中,高效地获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的模拟酶.其中制备的3个含硒突变体15C,14C/15C和17C均显示出明显的GPx活力.对非含硒突变体性质研究发现,Ser-14或Ser-15任何一个残基发生突变都会导致hGSTZ1c-1c的GST活力几乎丧失,表明Ser-14和Ser-15在催化反应中发挥着重要作用,但前者主要参与底物结合,后者更侧重于催化.
关键词
快速定点突变
谷胱甘肽过氧化物酶
人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶
Keywords
Site-directed mutagenesis
Glutathione peroxidase
Human glutathione transferase zeta
分类号
O629.7 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
通过快速定点突变表征人源含硒单链抗体酶的底物结合部位
宋健
徐俊杰
魏景艳
于扬
孙卫国
张桂荣
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性
郭笑
于扬
陈龙
王铭铄
金梦梦
刘广娜
张黎
李涛
高壮
魏景艳
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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