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贵州猪、牛志贺样毒素大肠杆菌的检出与鉴定 被引量:7
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作者 王嘉福 冉雪琴 +2 位作者 吴拥军 翁庆北 叶在荣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期448-452,共5页
以两对合成的寡核苷酸引物 ,通过聚合酶链式反应 ,检测 158份猪和牛腹泻粪便分离物 ,从 8份猪源和 3份牛源分离物中扩增出大肠杆菌志贺样毒素基因片段 ,其生化试验符合大肠杆菌特征 ,经Vero细胞检测均产生志贺样毒素 ,血清学试验证实分... 以两对合成的寡核苷酸引物 ,通过聚合酶链式反应 ,检测 158份猪和牛腹泻粪便分离物 ,从 8份猪源和 3份牛源分离物中扩增出大肠杆菌志贺样毒素基因片段 ,其生化试验符合大肠杆菌特征 ,经Vero细胞检测均产生志贺样毒素 ,血清学试验证实分属不同的血清型 。 展开更多
关键词 志贺样毒素 大肠杆菌 鉴定 贵州
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肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺样毒素2B亚基的表达 被引量:1
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作者 丁益强 王长军 俞守义 《医学研究生学报》 CAS 2008年第6期587-590,I0003,共5页
目的:克隆肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 AH07株志贺样毒素2B(Stx2B)亚单位基因,应用原核表达系统制备重组蛋白质。方法:根据靶基因序列设计特异性寡核苷酸引物,采用PCR法克隆EHEC AH07株Stx2B的编码基因stx2b,靶基因经TA克隆后连接... 目的:克隆肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 AH07株志贺样毒素2B(Stx2B)亚单位基因,应用原核表达系统制备重组蛋白质。方法:根据靶基因序列设计特异性寡核苷酸引物,采用PCR法克隆EHEC AH07株Stx2B的编码基因stx2b,靶基因经TA克隆后连接到表达载体pET-28a构建重组质粒,阳性重组子转化表达宿主菌E.coliBL-21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导目的蛋白表达,应用SDS-PAGE和Western-blot(WB)分析重组蛋白生物活性。结果:PCR扩增stx2b基因约220 bp,成功构建重组质粒pET28a-stx2b,并在原核细胞中得到高效表达,目的蛋白质的相对分子质量约为7500,约占蛋白质总量的40%;WB显示目的蛋白质可与特异性抗体发生特异性反应。结论:成功克隆EHEC O157∶H7stx2b基因,在原核系统获得目的蛋白质的高效表达,为O157∶H7感染机制及疾病诊断和疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌0157:H7 志贺样毒素2B亚基 克隆表达
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猪水肿病大肠杆菌F18ab菌毛A亚单位与志贺样毒素Ⅱ型变异体A亚单位的联合表达
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作者 姜连连 董国雄 +2 位作者 徐建生 董辉 黄兵 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期80-84,共5页
扩增、克隆和表达了水肿病大肠杆菌的致病因子F18ab 菌毛的主要亚单位FedA全基因(包括信号肽序列),并与现有的另一致病因子志贺样毒素Ⅱ型变异体A亚单位基因(stx 2eA)连接,然后进行联合表达。同时用已制备的抗Stx 2eA 单克隆抗体和抗F1... 扩增、克隆和表达了水肿病大肠杆菌的致病因子F18ab 菌毛的主要亚单位FedA全基因(包括信号肽序列),并与现有的另一致病因子志贺样毒素Ⅱ型变异体A亚单位基因(stx 2eA)连接,然后进行联合表达。同时用已制备的抗Stx 2eA 单克隆抗体和抗F18ab菌毛单克隆抗体对联合表达的融合蛋白质进行检测鉴定。 展开更多
关键词 仔猪水肿病 F18ab菌毛 志贺样毒素Ⅱ型变异体 联合表达 融合蛋白
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致泻性大肠杆菌的流行及耐药现状 被引量:26
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作者 秦小玄 朱朝敏 《儿科药学杂志》 CAS 2008年第2期61-64,共4页
致泻性大肠杆菌(DEC)是细菌性腹泻的常见病原菌,它包括肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)和肠聚集性大肠杆菌(EAEC)以及近来发现的肠产志贺样毒素且具侵袭... 致泻性大肠杆菌(DEC)是细菌性腹泻的常见病原菌,它包括肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)和肠聚集性大肠杆菌(EAEC)以及近来发现的肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠杆菌(ESIES)。DEC感染主要见于婴幼儿,近年来其在成人腹泻病人中的检出率有所增加,并成为部分地区致腹泻的主要病原菌,且对常用药物出现了较高的耐药性,因此受到了广泛的关注。 展开更多
关键词 致泻性大肠杆菌 耐药现状 肠致病性大肠杆菌 产肠毒素大肠杆菌 肠出血性大肠杆菌 侵袭性大肠杆菌 肠产志贺样毒素 常见病原菌
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SLT-IIeA基因在原核系统中的克隆与表达及其鉴定 被引量:1
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作者 严振龙 陈雷 +4 位作者 姜连连 成大荣 徐建生 董国雄 李俊宝 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期73-75,88,共4页
PCR扩增并克隆在 p UC1 8质粒中的类志贺样毒素 II型变异体 ( SL T-IIe) A亚单位基因片段切出 ,按预定阅读框架插入到原核性表达载体 p GEX-6p-1的谷胱甘肽 S-转移酶( GST)基因的下游 ,获得重组质粒 pp GEX-A。重组质粒导入大肠杆菌 BL2... PCR扩增并克隆在 p UC1 8质粒中的类志贺样毒素 II型变异体 ( SL T-IIe) A亚单位基因片段切出 ,按预定阅读框架插入到原核性表达载体 p GEX-6p-1的谷胱甘肽 S-转移酶( GST)基因的下游 ,获得重组质粒 pp GEX-A。重组质粒导入大肠杆菌 BL2 1 ,用 IPTG进行诱导表达 ,通过对重组大肠杆菌的菌体裂解物的SDS-PAGE电泳分析及 Western-blot鉴定 ,表明重组菌能大量表达融合蛋白形式的 SL T-IIe A,即 SL T-IIe A蛋白与谷胱甘肽转移酶相连组成的蛋白质。本实验的研究结果 ,为进一步研究 SL T-IIe的生物学特性及研制仔猪水肿病亚单位苗提供了有效的生物材料。 展开更多
关键词 SLT-ⅡeA基因 原核系统 克隆 表达 鉴定 志贺样毒素Ⅱ型变异体 仔猪 水肿瘤
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欧洲人畜共患传染病的来源与流行趋势 被引量:2
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作者 李凯年 逯德山 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第5期45-46,共2页
近几十年来,人畜共患传染病在全世界呈多发趋势,原有的人畜共患传染病没有减少,新的人畜共患传染病又不断发生。在近30年中,已经确定了30多种新的人类病原体,其中,大多数是新发现的动物源性人畜共患的病原体,造成了严重的公共卫生后果... 近几十年来,人畜共患传染病在全世界呈多发趋势,原有的人畜共患传染病没有减少,新的人畜共患传染病又不断发生。在近30年中,已经确定了30多种新的人类病原体,其中,大多数是新发现的动物源性人畜共患的病原体,造成了严重的公共卫生后果。在欧洲国家,原有的弯曲菌、产志贺样毒素大肠杆菌(VTEC)、沙门氏菌等引起的人畜共患传染病仍然是一个比较严重的问题。在全世界, 展开更多
关键词 人畜共患传染病 欧洲国家 流行趋势 志贺样毒素 大肠杆菌 沙门氏菌 病原体 动物源
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12个中药方剂对小鼠仔猪水肿病模型的保护率观察比较 被引量:5
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作者 高立云 周宏超 +2 位作者 王中杰 穆祥 陈耀兴 《中兽医医药杂志》 2007年第5期42-43,共2页
关键词 仔猪水肿病 中药方剂 溶血性大肠杆菌病 保护率 志贺样毒素 模型 小鼠 Ⅱ型变异体
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SLT-Ⅱe对PIMVECs分泌炎症反应相关细胞因子的影响 被引量:1
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作者 王伟然 施晓杰 +1 位作者 张蒙 穆祥 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第11期3467-3473,共7页
本试验旨在探究大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)处理后,猪小肠微血管内皮细胞(PIMVECs)分泌的肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)、P选择素(P-selectin)、一氧化氮(NO)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和内皮素(ET)水平的变化。采用超速离心法提取... 本试验旨在探究大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)处理后,猪小肠微血管内皮细胞(PIMVECs)分泌的肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)、P选择素(P-selectin)、一氧化氮(NO)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和内皮素(ET)水平的变化。采用超速离心法提取SLT-Ⅱe,采用BCA试剂盒测定其质量浓度,使用SDS-PAGE及Western blotting验证蛋白纯度;用WST-1法从0.1、0.5、1、5、10μg/mL SLT-Ⅱe和0、2、4、8、12、24 h中筛选出SLT-Ⅱe对PIMVECs最佳作用浓度与时间;ELISA法检测对照组(0μg/mL SLT-Ⅱe)和试验组(1μg/mL SLT-Ⅱe)细胞上清中TNF-ɑ、P-selectin、NO、ICAM-1和ET含量的变化。结果表明:所提蛋白为SLT-Ⅱe,蛋白含量为721.75μg/mL;1μg/mL的SLT-Ⅱe作用8 h后可极显著降低PIMVECs的活性(P<0.01);1μg/mL的SLT-Ⅱe作用9和12 h时PIMVECs的TNF-ɑ分泌量显著升高(P<0.05),NO/ET的值显著高于对照组(P<0.05),作用6、9、12 h时P-selectin的含量显著升高(P<0.05),作用12 h时的ICAM-1分泌量显著升高(P<0.05)。综上所述,SLT-Ⅱe浓度为1μg/mL时可以诱导PIMVECs分泌的TNF-ɑ、P-selectin、ICAM-1以及NO/ET上升,为研究仔猪水肿病发病机制提供参考。 展开更多
关键词 志贺样毒素Ⅱ型变异体 小肠微血管内皮细胞 炎症反应细胞因子
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F18^+E.coli株可引起生长-肥育猪腹泻
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作者 金福源 陶艳华 《国外畜牧学(猪与禽)》 2011年第4期42-45,共4页
大肠杆菌是引起断奶仔猪腹泻的一种常见致病因子,但通常不会影响生长-肥育猪。最初认为11周龄生长-肥育猪出现的急性、严重水样腹泻是传染性胃肠炎。在对送检样本进行检测后表明,致病因子是能够产生志贺样毒素的F18^+E.coli。患病猪无... 大肠杆菌是引起断奶仔猪腹泻的一种常见致病因子,但通常不会影响生长-肥育猪。最初认为11周龄生长-肥育猪出现的急性、严重水样腹泻是传染性胃肠炎。在对送检样本进行检测后表明,致病因子是能够产生志贺样毒素的F18^+E.coli。患病猪无神经症状或其他的与水肿病有关的症状,新霉素治疗有效。临床受感染猪群与未受感染猪群在死亡率和生长性能上无明显的差异。本文报告了11周龄生长-肥育猪感染F18^+E.coli株的罕见病例。 展开更多
关键词 腹泻 大肠杆菌(E.coli) F18 志贺样毒素
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