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理气活血滴丸通过抑制凋亡和坏死样凋亡通路缓解低氧诱导的人心脏微血管内皮细胞损伤
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作者 唐灿 张议月 +1 位作者 罗秀菊 彭军 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期631-640,共10页
目的:人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells,HCMEC)损伤会破坏心肌微循环功能,进一步诱发冠心病等重大心血管事件,严重威胁人类健康。因此探讨低氧诱导的HCMEC损伤机制具有重要意义。本研究探讨理气活... 目的:人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells,HCMEC)损伤会破坏心肌微循环功能,进一步诱发冠心病等重大心血管事件,严重威胁人类健康。因此探讨低氧诱导的HCMEC损伤机制具有重要意义。本研究探讨理气活血滴丸对低氧诱导的HCMEC损伤的作用及作用机制。方法:将HCMEC低氧培养24 h建立细胞低氧损伤模型。将HCMEC分为正常对照组、低氧组、低氧+理气活血滴丸低剂量组、低氧+理气活血滴丸中剂量组、低氧+理气活血滴丸高剂量组和低氧+丹酚酸B(阳性对照)组。采用细胞增殖与毒性检测试剂3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,MTS]检测细胞活力;采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测细胞LDH释放率;采用丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒检测细胞MDA含量;采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8(cysteinyl aspartate specific proteinase 8,caspase-8)试剂盒分别检测细胞SOD、CAT、caspase-3和caspase-8活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用蛋白质印迹法检测细胞坏死样凋亡相关蛋白质:受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting kinase 1,RIPK1)、磷酸化受体相互作用蛋白激酶1(phosphorylated receptor-interacting protein kinase 1,p-RIPK1)、受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)、磷酸化受体相互作用蛋白激酶3(phosphorylated receptor-interacting protein kinase 3,p-RIPK3)、混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)、磷酸化混合谱系激酶结构域样蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain-like protein,p-MLKL)。结果:与正常对照组比较,低氧组细胞活力显著降低(P<0.01),细胞内MDA含量显著升高(P<0.05),CAT、SOD活力均显著下降(均P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL水平均增加(均P<0.05)。与低氧组比较,低氧+理气活血滴丸高剂量组细胞活力显著提升(P<0.01),并且细胞内MDA含量显著降低(P<0.05),细胞内CAT活性显著升高(P<0.05),坏死样凋亡相关蛋白质水平显著降低(均P<0.05)。结论:理气活血滴丸对低氧诱导的HCMEC损伤具有保护作用,其机制涉及减轻低氧诱导的氧化应激,进而减少HCMEC凋亡和坏死样凋亡。 展开更多
关键词 理气活血滴丸 心脏微血管内皮细胞 低氧 氧化应激 凋亡 坏死样凋亡
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黄芪多糖联合lncRNA TUG1沉默对缺血再灌注人心脏微血管内皮细胞凋亡的影响 被引量:13
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作者 曹征 谢连娣 +2 位作者 范宗静 张婧倩 郭彬 《世界中医药》 CAS 2021年第21期3185-3190,共6页
目的:探讨黄芪多糖联合长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸调节基因1(TUG1)沉默对缺血再灌注人心脏微血管内皮细胞凋亡的影响。方法:将心脏微血管内皮细胞分成对照组、模型组、sh-NC组、sh-TUG1组、黄芪多糖组、黄芪多糖+sh-TUG1组,流式细胞... 目的:探讨黄芪多糖联合长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸调节基因1(TUG1)沉默对缺血再灌注人心脏微血管内皮细胞凋亡的影响。方法:将心脏微血管内皮细胞分成对照组、模型组、sh-NC组、sh-TUG1组、黄芪多糖组、黄芪多糖+sh-TUG1组,流式细胞术检测凋亡,Western Blotting方法检测音速豪猪蛋白(SHH)表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,DCFH-DA法检测活性氧(ROS)含量。结果:与对照组比较,模型组心脏微血管内皮细胞凋亡率升高,TNF-α增多,ROS升高,SHH蛋白表达降低(均P<0.05);与sh-NC组比较,sh-TUG1组心脏微血管内皮细胞凋亡率降低,TNF-α减少,ROS含量降低,SHH蛋白表达升高(均P<0.05);与模型组比较,黄芪多糖组心脏微血管内皮细胞凋亡率降低,TNF-α减少,ROS降低,SHH蛋白表达升高(均P<0.05);与sh-TUG1组、黄芪多糖组比较,黄芪多糖+sh-TUG1组心脏微血管内皮细胞凋亡率降低,TNF-α减少,ROS含量降低,SHH蛋白表达升高(均P<0.05)。结论:黄芪多糖联合TUG1基因沉默能减少缺血再灌注人心脏微血管内皮细胞凋亡,减轻氧化损伤,抑制炎症介质分泌,其机制可能与激活SHH信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芪多糖 牛磺酸调节基因1 SHH信号 心脏微血管内皮细胞 炎症 氧化损伤 凋亡 缺血再灌注
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灯盏花乙素上调细胞外信号调节激酶表达拮抗人心脏微血管内皮细胞IR损伤 被引量:3
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作者 黄仙 李晓雪 +2 位作者 喻卓 杨为民 李琳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第9期912-916,共5页
目的灯盏花乙素(SCU)可拮抗心肌IR损伤,但SCU是否通过细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路拮抗IR所致血管内皮细胞损伤尚不清楚。文中探讨SCU在缺氧-复氧(HR)诱导的人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)损伤中的作用及对ERK1/2信号通路的影响。方法... 目的灯盏花乙素(SCU)可拮抗心肌IR损伤,但SCU是否通过细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路拮抗IR所致血管内皮细胞损伤尚不清楚。文中探讨SCU在缺氧-复氧(HR)诱导的人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)损伤中的作用及对ERK1/2信号通路的影响。方法体外培养的HCMEC分别进行正常培养和缺氧12 h-复氧12 h建立IR模型(HR)处理。正常培养条件下,将HCMEC分为正常对照组、DMSO组、SCU 1μmol/L组和SCU 10μmol/L组。给予HCMEC IR损伤处理后,分为空白对照组、HR模型组、HR+DMSO组、HR+SCU 1μmol/L组和HR+SCU 10μmol/L组。将HCMEC与SCU或DMSO预孵育2 h后行HR处理。采用MTT法和锥虫蓝染色检测细胞存活率,并检测HCMEC的丙二醛(MDA)浓度。Western blot检测p-ERK1/2、ERK2和GAPDH蛋白表达情况。结果 MTT检测结果显示,与正常对照组细胞存活率(100%)比较,SCU 1μmol/L组和SCU 10μmol/L组[(110.40±2.34)%和(122±1.25)%]均增加(P<0.05);与空白对照组细胞活力(100%)比较,HR模型组[(68.00±4.06)%]下降(P<0.05),与HR模型组细胞存活率比较,HR+SCU 1μmol/L组和HR+SCU 10μmol/L组[(90.53±3.67)%、(92.04±2.32)%]增加(P<0.05)。锥虫蓝染色显示,与正常对照组细胞活力[(90.06±1.85)%]比较,SCU 10μmol/L组[(96.78±2.01)%]增加(P<0.05);与空白对照组[(91.83±2.34)%]比较,HR模型组细胞存活率[(73.72±4.91)%]下降(P<0.01),与HR模型组比较,HR+SCU 10μmol/L组细胞存活率[(87.59±2.64)%]增加(P<0.05)。与空白对照组比较,HR模型组、HR+DMSO组MDA明显增加(P<0.01);与HR模型组比较,HR+SCU 1μmol/L组和HR+SCU 10μmol/L组MDA含量减少(P<0.05)。与空白对照组比较,HR模型组p-ERK1/2蛋白表达明显降低(P<0.01);与HR模型组比较,HR+SCU 10μmol/L组p-ERK1/2蛋白表达明显增加(P<0.01)。结论 HR损伤导致HCMEC细胞活力下降、MDA增加和p-ERK1/2蛋白表达降低,SCU通过上调p-ERK1/2表达而拮抗HCMEC IR损伤。 展开更多
关键词 灯盏花乙素 缺血再灌注损伤 心脏微血管内皮细胞 细胞外信号调节激酶
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黄芪多糖对缺氧/复氧人心脏微血管内皮细胞凋亡、细胞周期的影响 被引量:3
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作者 范宗静 李星星 +2 位作者 崔杰 吴旸 刘金民 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2021年第11期56-60,共5页
目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对缺氧/复氧人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cell,HCMEC)凋亡、细胞周期的影响。方法培养原代HCMEC,通过缺氧/复氧刺激HCMEC,模拟缺血再灌注损伤,建立... 目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对缺氧/复氧人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cell,HCMEC)凋亡、细胞周期的影响。方法培养原代HCMEC,通过缺氧/复氧刺激HCMEC,模拟缺血再灌注损伤,建立缺血再灌注损伤模型。将造模成功的HCMEC随机分为5组:对照组、模型组、APS低浓度组(25μg/ml)、APS中浓度组(50μg/ml)和APS高浓度组(100μg/ml)。通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。通过蛋白质印迹法测定caspase-3、caspase-9蛋白表达水平。结果模型组细胞凋亡率显著高于对照组和APS低、中、高浓度组(均P<0.01)。模型组S期细胞显著增加,细胞在S期被阻滞并促进了细胞凋亡,但APS逆转了这一现象。模型组caspase-3和caspase-9蛋白表达水平均显著高于对照组和APS低、中、高浓度组(均P<0.05)。结论APS可保护HCMEC免受缺血再灌注损伤,这种保护作用可能与改变细胞周期分布、调节caspase-3和caspase-9蛋白表达有关。 展开更多
关键词 黄芪多糖 缺氧/复氧 心脏微血管内皮细胞 细胞凋亡 细胞周期
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钙拮抗剂调节钙非依赖磷脂酶A_2拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的研究 被引量:5
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作者 周巧玲 王远航 +3 位作者 林泓 汪彬 石刚刚 郑付春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1119-1125,共7页
目的探讨经典钙拮抗剂维拉帕米(Ver)、硝苯地平(Nif)、地尔硫(Dil)及本课题组合成的新型钙拮抗剂-碘化N-正丁基氟哌啶醇(F_2)通过调节钙非依赖磷脂酶A_2(iPLA_2)抗心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(H/R)损伤的作用与机制。方法培养... 目的探讨经典钙拮抗剂维拉帕米(Ver)、硝苯地平(Nif)、地尔硫(Dil)及本课题组合成的新型钙拮抗剂-碘化N-正丁基氟哌啶醇(F_2)通过调节钙非依赖磷脂酶A_2(iPLA_2)抗心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(H/R)损伤的作用与机制。方法培养大鼠原代CMECs,制作H/R模型,在H/R的基础上,用不同浓度梯度的钙拮抗剂及F_2处理细胞,比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出反映细胞损伤程度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定白介素-6(IL-6)和花生四烯酸(AA)的含量;TUNEL法检测细胞晚期凋亡水平;Real-time PCR检测iPLA_2mRNA表达,Western blot检测iPLA_2蛋白表达。结果钙拮抗剂F_2、Ver和Nif均可量效-依赖性地减少H/R过程中LDH漏出(P<0.05),降低IL-6和AA含量(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),而Dil对上述指标均无作用;同时,F_2和Ver均可量效-依赖性地降低iPLA_2mRNA和蛋白表达水平,Nif和Dil对H/R过程中iPLA_2mRNA和蛋白表达水平并无影响。结论H/R可导致CMECs损伤,钙拮抗剂F_2、Ver、Nif能保护CMECs抗H/R损伤,Dil无抗H/R损伤的作用;而F_2和Ver是部分通过调节iPLA_2抗H/R损伤作用的。 展开更多
关键词 钙拮抗剂 碘化N-正丁基氟哌啶醇 钙非依赖磷脂酶A2 花生四烯酸 心脏微血管内皮细胞 缺氧/复氧
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碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心脏微血管内皮细胞缺氧复氧损伤保护机制的研究 被引量:4
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作者 周燕琼 张艳美 +4 位作者 高分飞 黄展勤 陈一村 郑燕珊 石刚刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期207-211,共5页
目的观察碘化Ⅳ.正丁基氟哌啶醇(N-n-butylhalo-peridol iodide,F2)对培养的内皮细胞缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤及早期生长反应基因-1(early growth response gene1,Egr-1)蛋白表达的影响。方法应用新生SD大... 目的观察碘化Ⅳ.正丁基氟哌啶醇(N-n-butylhalo-peridol iodide,F2)对培养的内皮细胞缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤及早期生长反应基因-1(early growth response gene1,Egr-1)蛋白表达的影响。方法应用新生SD大鼠进行心脏微血管内皮细胞(cardiacmicrovas.eularendothelialcells,CMECs)原代培养,取3-4代的CMECs建立A/R模型。通过测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及CMECs中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,观察CMECs损伤程度;应用ELISA法测定细胞培养上清液肿瘤坏死因子-d(TNF-α)的含量,观察CMECs炎症反应水平;Westernblot法检测培养CMECs中Egr一1的蛋白表达水平。结果A/R造成CMECs内MDA升高,SOD下降,上清液中LDH、TNF—α含量升高,A/R刺激下细胞Egr-1的蛋白表达水平明显升高;A/R刺激前给予F2:可减轻CMECs的损伤及炎症反应程度,抑制Egr-1蛋白的表达。结论F:对心脏微血管内皮细胞A/R损伤具有保护作用,该作用可能与其抑制Egr-1的表达有关。 展开更多
关键词 碘化N-正丁基氟哌啶醇 大鼠 心脏微血管内皮细胞 缺氧复氧 损伤 EGR-1
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硝苯地平通过调控COX-2拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤 被引量:8
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作者 陈润济 柳满 +3 位作者 汪彬 李海燕 蔡文锋 石刚刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期946-952,共7页
目的研究硝苯地平(Nif)对心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的作用与机制。方法通过建立心脏微血管内皮细胞H/R模型;在H/R模型基础上,分别用不同浓度的硝苯地平(Nif)处理内皮细胞,采用比色法测定细胞... 目的研究硝苯地平(Nif)对心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的作用与机制。方法通过建立心脏微血管内皮细胞H/R模型;在H/R模型基础上,分别用不同浓度的硝苯地平(Nif)处理内皮细胞,采用比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出情况;采用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞的早期凋亡;TUNEL法观察细胞晚期凋亡水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定白介素1β(IL-1β)的含量、内皮细胞黏附分子(ICAM-1)的含量和COX-2产物(PGE2)的含量;Western blot检测COX-2蛋白的表达;结果与Control组相比,COX-2蛋白表达上调、乳酸脱氢酶LDH的漏出增加,产物PGE2的量上升。Nif(10.0、1.0、0.1μmol·L^-1)3个剂量组可呈现量效依赖性地降低炎症因子IL-1β的含量,减轻凋亡,降低H/R损伤COX-2蛋白的高表达、减少产物PGE2的产生。结论 Nif能保护CMECs抗H/R损伤,其机制可能是通过调节COX-2来发挥保护作用。 展开更多
关键词 心脏微血管内皮细胞 硝苯地平 COX-2 缺氧/复氧 内皮细胞黏附分子 炎症
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黄芪协同红花-葶苈子抑制内皮细胞旁分泌改善心肌纤维化机制 被引量:2
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作者 王咏 王悠草 +2 位作者 王丽丽 马度芳 李晓 《世界中医药》 北大核心 2025年第3期429-439,共11页
目的:观察黄芪协同红花-葶苈子抑制心肌纤维化的作用及机制。方法:结扎前降支制备心肌梗死后心力衰竭大鼠,红花-葶苈子(C-L)、黄芪(HR)与黄芪-红花-葶苈子(A-C-L)干预,马松染色检测纤维化程度,蛋白质印迹法检测血管性血友病因子(νWF)和... 目的:观察黄芪协同红花-葶苈子抑制心肌纤维化的作用及机制。方法:结扎前降支制备心肌梗死后心力衰竭大鼠,红花-葶苈子(C-L)、黄芪(HR)与黄芪-红花-葶苈子(A-C-L)干预,马松染色检测纤维化程度,蛋白质印迹法检测血管性血友病因子(νWF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),蛋白质印迹法及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、蜗牛家族转录抑制因子1(Snail)。构建缺氧心脏微血管内皮细胞(HCMEC),C-L、HR及A-C-L含药血清干预,免疫荧光(IF)检测血小板内皮细胞黏附分子(CD31)和α-SMA。A-C-L含药血清联合TGF-β1激活剂(SRI-011381)干预HCMEC,IF观察内皮细胞间充质转化,蛋白质印迹法和RT-PCR检测TGF-β1/Snail表达。提取HCMEC上清液干预心脏成纤维细胞(CF),酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测上清液结缔组织生长因子(CTGF),检测CF增殖及胶原合成。结果:A-C-L抑制心力衰竭大鼠心肌纤维化效果最佳。C-L、HR及A-C-L均上调心力衰竭大鼠心肌和缺氧内皮细胞CD31、vWF及下调α-SMA表达,又以A-C-L效果最佳。联合应用SRI-011381后A-C-L抑制内皮间充质转化作用减弱。A-C-L抑制HCMEC中TGF-β1/Snail表达、下调CTGF分泌。提取A-C-L干预的HCMEC上清液培养CF,其CF活化和胶原合成低于HCMEC上清液培养的CF。结论:黄芪协同红花-葶苈子抑制心肌纤维化,其机制,抑制内皮间充质转化,下调内皮细胞中TGF-β1/Snail,以旁分泌方式抑制成纤维细胞增殖和胶原合成。 展开更多
关键词 心肌纤维化 内皮细胞间充质转化 旁分泌 黄芪 红花-葶苈子药对 转化生长因子-β1/Snail通路 协同 成纤维细胞 心脏微血管内皮细胞
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心脏震波治疗对微血管eNOS和血管内皮生长因子的影响及其信号转导机制 被引量:5
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作者 华宝桐 赵玲 +6 位作者 蔡红雁 骆志玲 王钰 李琳 彭云珠 李锐洁 郭涛 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第7期683-687,共5页
目的体外心脏震波治疗(cardiac shock wave therapy,CSWT)可促进缺血心肌动脉生成,但具体分子机制仍不清楚。文中探讨CSWT对人心脏微血管内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)与血管内皮生长因子(vascular endo... 目的体外心脏震波治疗(cardiac shock wave therapy,CSWT)可促进缺血心肌动脉生成,但具体分子机制仍不清楚。文中探讨CSWT对人心脏微血管内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响;同时探讨黏附班激酶(focal adhesion kinase,FAK)和钙敏感钾通道(KCa)是否参与了CSWT治疗效应的机械信号转导通路。方法体外培养人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells,HCMEC),随机数字表法分为对照组、CSWT组、CSWT+PF-573228组、CSWT+Iberiotoxin组。每个实验组加药刺激48 h后接受1次低能量体外震波治疗(0.09 m J/mm2,200Times),常规培养24 h后,检测促动脉生成相关的e NOS、VEGF mRNA及蛋白的表达变化。结果对照组e NOS mRNA表达(1.00±0.09)、VEGFmRNA表达(1.00±0.11)相比,CSWT组(3.99±0.17,4.61±0.19)升高,CSWT+PF-573228组(0.40±0.02,0.62±0.10)、CSWT+Iberiotoxin组(0.64±0.02,0.53±0.02)降低,差异均有统计学意义(P<0.05),与CSWT组比较,CSWT+PF-573228组、CSWT+Iberiotoxin组e NOS mRNA、VEGF mRNA表达均降低(P<0.05)。与对照组e NOS蛋白表达(0.50±0.01)、VEGF蛋白表达(0.35±0.01)相比,CSWT组(0.63±0.02、0.43±0.02)升高,CSWT+PF-573228组(0.36±0.01、0.29±0.02)、CSWT+Iberiotoxin组(0.37±0.02、0.30±0.02)降低,差异均有统计学意义(P<0.05),与CSWT组比较,CSWT+PF-573228组、CSWT+Iberiotoxin组e NOS蛋白、VEGF蛋白表达均降低(P<0.05)。结论心脏震波治疗可上调人心脏微血管内皮细胞e NOS、VEGF表达,FAK和钙敏感钾通道可能参与了CSWT治疗效应的机械信号转导通路。 展开更多
关键词 体外心脏震波治疗 心脏微血管内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶 血管内皮生长因子 黏附班激酶抑制剂 钙敏感钾通道抑制剂
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黄芩素通过促进内皮细胞eNOS蛋白表达与NO释放增强乙酰胆碱对血管的舒张作用 被引量:20
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作者 瞿晶田 王家龙 王玉明 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第11期2396-2398,共3页
目的:探讨黄芩素促血管舒张的作用及作用机制。方法:黄芩素孵育大鼠心脏微血管内皮细胞24 h,MTT法检测细胞活力;硝酸还原酶法检测细胞上清NO含量;ELISA法检测细胞e NOS蛋白表达。黄芩素孵育大鼠胸主动脉环24 h,去甲肾上腺素(10^-6mol/L... 目的:探讨黄芩素促血管舒张的作用及作用机制。方法:黄芩素孵育大鼠心脏微血管内皮细胞24 h,MTT法检测细胞活力;硝酸还原酶法检测细胞上清NO含量;ELISA法检测细胞e NOS蛋白表达。黄芩素孵育大鼠胸主动脉环24 h,去甲肾上腺素(10^-6mol/L)收缩血管后应用乙酰胆碱(10^-8,10^-7,10^-6,10^-5mol/L)舒张血管,检测血管张力变化。结果:黄芩素(0.5,5,20μm)具有促进大鼠心脏微血管内皮细胞NO产生与e NOS蛋白表达的作用。一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(100μm)能够抑制黄芩素促NO产生的作用。黄芩素(20μm)具有增强乙酰胆碱舒张动脉环的作用。结论:黄芩素可能通过促进内皮细胞e NOS蛋白表达与NO释放这一途径增强乙酰胆碱对血管的舒张作用。 展开更多
关键词 黄芩素 一氧化氮 心脏微血管内皮细胞 血管舒张
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理气化痰活血方含药血清对线粒体介导的心肌细胞凋亡的影响
11
作者 葛昭 苏立硕 +4 位作者 任思霖 周梦雪 李默涵 宁旭瑾 王贤良 《世界中医药》 北大核心 2025年第13期2266-2273,共8页
目的:探讨理气化痰活血方含药血清对线粒体介导的心肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠原代心脏微血管内皮细胞(CMEC)-心肌细胞共培养的模型,随机分为空白组、对照组、siRNA干扰组、中药组(理气化痰活血方)、siRNA+中药组、尼可地尔组及... 目的:探讨理气化痰活血方含药血清对线粒体介导的心肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠原代心脏微血管内皮细胞(CMEC)-心肌细胞共培养的模型,随机分为空白组、对照组、siRNA干扰组、中药组(理气化痰活血方)、siRNA+中药组、尼可地尔组及缬沙坦组,免疫荧光染色检测通透性转换孔开放程度,荧光探针检测线粒体膜电位,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测线粒体途径相关凋亡因子的mRNA相对表达水平。结果:与空白组比较,模型组及siRNA干扰组中半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱天冬蛋白酶-9(Caspase-9)、细胞色素C(Cyt-c)、B淋巴细胞瘤-2关联死亡启动子(Bad)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)mRNA相对表达水平升高(P<0.001),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2/Bax、钙黄绿素绿色荧光强度降低(P<0.001)。与模型组比较,中药组、尼可地尔组以及缬沙坦组Caspase-3、Caspase-9、Cyt-c、Bad、Bax mRNA相对表达水平降低(P<0.05、P<0.01或P<0.001),Bcl-2及Bcl-2/Bax升高(P<0.001),钙黄绿素绿色荧光强度增强(P<0.05或P<0.001),JC-1聚集体/单体升高(P<0.05、P<0.01或P<0.001)。结论:理气化痰活血方可通过上调NRG-1表达,介导线粒体凋亡途径,发挥抑制心肌细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 理气化痰活血方 心脏微血管内皮细胞 心肌细胞 细胞凋亡 线粒体凋亡途径 缺氧损伤 线粒体
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HCMEC细胞在灯盏花乙素及低能量震波联合作用下血管生成相关因子的研究 被引量:6
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作者 华宝桐 赵玲 +7 位作者 蔡红雁 骆志玲 王钰 李琳 彭云珠 李锐洁 胡钊 郭涛 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期2155-2157,共3页
目的:探讨人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)在灯盏花乙素(scu)、低能量震波(CSWT)联合作用下对血管生成相关因子的影响。方法:随机将培养至5代的HCMEC细胞分为空白对照组、CSWT组、FAK抑制+CSWT组、IBTX+CSWT组、CSWT+scu高、中、低剂量组,... 目的:探讨人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)在灯盏花乙素(scu)、低能量震波(CSWT)联合作用下对血管生成相关因子的影响。方法:随机将培养至5代的HCMEC细胞分为空白对照组、CSWT组、FAK抑制+CSWT组、IBTX+CSWT组、CSWT+scu高、中、低剂量组,通过RT-q PCR、western-blot对血管内皮生长因子(VEGF)、内皮一氧化氮合成酶(e NOS)表达测定。结果:CSWT组、FAK抑制+CSWT组、IBTX+CSWT组、CSWT+scu高、中、低剂量组VEGF、e NOs mRNA表达、蛋白表达明显高于空白对照组(P<0.05),其中SWT+scu高、中、低剂量组VEGF、e NOs mRNA表达、蛋白表达相比其他3组明显高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:灯盏花乙素联合低能量震波能有效提高VEGF、e NOS表达,保护血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 心脏微血管内皮细胞 灯盏乙素 低能量震波 血管内皮生长因子 内皮一氧化氮合成酶
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反义寡核苷酸抑制早期生长反应基因-1表达对内皮细胞缺氧复氧损伤的影响 被引量:2
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作者 周燕琼 张艳美 +4 位作者 高分飞 黄展勤 陈一村 郑燕珊 石刚刚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第1期14-18,共5页
目的:研究反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODN)抑制早期生长反应基因1(early growth response gene-1,Egr-1)表达对内皮细胞缺氧复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤的影响。方法:采用新生大鼠进行心脏微血... 目的:研究反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODN)抑制早期生长反应基因1(early growth response gene-1,Egr-1)表达对内皮细胞缺氧复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤的影响。方法:采用新生大鼠进行心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)原代培养,取3~4代的CMECs建立缺氧复氧模型。细胞随机分为6组:对照(Con)组、缺氧复氧组(A/R)、溶剂组(LIP)、反义寡核苷酸转染组(AS)、正义寡核苷酸转染组(S)和错配寡核苷酸转染组(Sc)。通过测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及内皮细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,观察内皮细胞损伤程度;应用ELISA法测定细胞培养上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,观察内皮细胞炎症反应水平;Western-blot法检测培养内皮细胞中Egr-1的蛋白表达水平;显微镜下观察细胞形态学改变并计算存活率。结果:A/R造成内皮细胞内MDA升高,SOD下降,上清液中LDH、TNF-α含量升高,A/R刺激下细胞Egr-1的蛋白表达水平明显升高;A/R刺激前给予AS-ODN可抑制Egr-1蛋白的表达,减轻内皮细胞的损伤及炎症反应程度,提高细胞存活率。结论:AS-ODN抑制培养内皮细胞Egr-1的表达,并降低A/R损伤,提示Egr-1与缺氧复氧所致的心脏微血管内皮细胞损伤密切相关。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 心脏微血管内皮细胞 氧复氧损伤 EGR-1
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内皮素1对内皮细胞cAMP和cGMP含量的影响 被引量:2
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作者 李元义 方之扬 +2 位作者 陈玉林 葛绳德 刘世康 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期41-44,共4页
目的:观察内皮素1(ET-1)对心脏微血管内皮细胞(CMEC)cAMP和cGMP含量的影响及一氧化氮(NO)的介导作用。方法:分离和培养心脏微血管内皮细胞,分别用含有ET-1和NO合成酶抑制剂L-NMMA的培养基培养... 目的:观察内皮素1(ET-1)对心脏微血管内皮细胞(CMEC)cAMP和cGMP含量的影响及一氧化氮(NO)的介导作用。方法:分离和培养心脏微血管内皮细胞,分别用含有ET-1和NO合成酶抑制剂L-NMMA的培养基培养CMEC1,3,10min,用放免法测定cMEC内cAMP和cGMP含量。结果:ET-1不影响微血管内皮细胞cAMP含量,但明显增加cGMP含量。用ET-1孵育细胞1min使cGMP含量增加1倍,10min内增加近5倍。L-NMMA不影响内皮细胞内cGMP的基础含量,但有明显抑制ET-1增加cGMP含量作用。结论:ET-1通过刺激CMEC产生NO,快速增加细胞内cGMP含量。 展开更多
关键词 内皮素1 一氧化氮 心脏微血管内皮细胞
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药理学
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《中国医学文摘(基础医学)》 CSCD 2005年第4期246-251,共6页
IGF-1经PI3K/Akt依赖性途径保护苯妥英诱导的小脑颗粒神经元凋亡;15-HETE对肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响;β淀粉样肽前体蛋白N端肽段对糖尿病鼠脑凋亡相关改变的作用;大鼠体内硝基精氨酸的手性代谢动力学;大蒜多糖对阿霉素所... IGF-1经PI3K/Akt依赖性途径保护苯妥英诱导的小脑颗粒神经元凋亡;15-HETE对肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响;β淀粉样肽前体蛋白N端肽段对糖尿病鼠脑凋亡相关改变的作用;大鼠体内硝基精氨酸的手性代谢动力学;大蒜多糖对阿霉素所致小鼠心脏毒性的拮抗作用;克罗米酚对骨髑间质干细胞增殖和向成骨细胞分化的影响;西洋参有效部位的抗肿瘤作用研究;PLC对ADP诱导的兔血小板cAMP的影响;人参皂苷Rg1延缓细胞衰老过程中端粒长度和端粒酶活性的变化;托吡脂对青霉素诱发大鼠痫性放电和海马区相关递质含量的影响;盐酸埃他卡林对内皮素系统的影响;磷脂酰肌醇-3-激酶在胰岛素与表皮生长因子激活MAPK信号通路中的不同作用;重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对大鼠胶原性关节炎的治疗作用;动态观察不同的药理性阻断剂对膜磷脂PtdIns(4,5)P2的代谢过程的影响特征;二苯乙烯苷对高胆固醇血症致β-淀粉样肽增高大鼠模型的影响;沉默Cdk7导致pRb和Cdk2磷酸化水平下降并诱导HepG2细胞凋亡;2,3-二甲基-2-丁胺新衍生物对脑神经细胞钾通道的影响;非诺贝特对高脂血症兔血清及脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子-α;TSA抑制NB4细胞去乙酰化酶活性并促进细胞周期素激酶抑制剂表达;松果菊苷对TNF-α诱导的SH-SYSY细胞凋亡的保护作用;健康人连续口服不同剂量胺碘酮的血药浓度的临床研究;PGA1对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响;紫草素诱导A375-S2细胞凋亡的分子机制研究;异甘草素对脑缺血再灌注小鼠认知功能障碍及能量代谢的影响;黄芪提取物对局灶性脑缺血再灌注损伤的抗氧化及线粒体保护作用;雏菊叶龙胆酮对局灶性脑缺血损伤的保护作用及机制探讨;原花青素对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制的研究;大黄素对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞的影响;一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对脑缺血大鼠脑组织氨基酸含量的影响;当归多糖硫酸酯抗小鼠L6565逆转录病毒的作用;三氟拉嗪诱发细胞凋亡及对DNA依赖蛋白激酶催化亚单位表达和P38磷酸化的抑制作用;灵芝多糖对自由基所致的腹腔巨噬细胞早期损伤的影响;竹芪口服液对动物心血管、呼吸、神经系统的影响及急性毒性研究;多药耐药基因MDR1 C3435T多态性与口服环孢素A清除率的关系。 展开更多
关键词 局灶性脑缺血再灌注损伤 HEPG2细胞凋亡 细胞介素-1受体拮抗剂 细胞钙离子浓度 磷脂酰肌醇-3-激酶 药理学 心脏微血管内皮细胞 一氧化氮合酶抑制剂 MAPK信号通路
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