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双参宁心方血清药物化学和抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验研究 被引量:15
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作者 孙宇扬 刘建勋 +2 位作者 吴晓洋 李澎 李罡 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2006年第5期36-37,共2页
目的研究双参宁心方(SSNX)主要有效成分及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法利用血药指纹图谱检测来源于SSNX的血中成分,并利用体外心肌细胞缺氧/复氧损伤实验进行验证。结果给药后血清样本中,共检测到15个来源于SSNX的原型成... 目的研究双参宁心方(SSNX)主要有效成分及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法利用血药指纹图谱检测来源于SSNX的血中成分,并利用体外心肌细胞缺氧/复氧损伤实验进行验证。结果给药后血清样本中,共检测到15个来源于SSNX的原型成分,其中确定了人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱4个化学成分。在对心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验中,人参皂苷Rg1、脱氢紫堇碱能抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤导致的乳酰脱氢酶升高(P<0.05),丹酚酸B、延胡索乙素则能显著抑制乳酸脱氢酶的升高(P<0.01),对心肌细胞具有保护作用。结论提示人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱可能是SSNX抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的有效物质基础,可用于复方药代动力学的指标检测。 展开更多
关键词 双参宁心方 血清药物化学 心肌细胞 缺氧损伤
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PI3K/Akt通路在槲皮素后处理减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用 被引量:11
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作者 王赟 张宗泽 +3 位作者 张婧婧 陈莹莹 吴云 王焱林 《山东医药》 CAS 2019年第23期6-9,共4页
目的探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系。方法将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H... 目的探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系。方法将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H/R+槲皮素+抑制剂组(H/R+Que+W组)共4组。Con组细胞正常培养6 h;H/R组仅构建H/R模型;H/R+Que组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入终浓度为40μmol/L的槲皮素,随即复氧4 h;H/R+Que+W组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入PI3K抑制剂Wortamannin 100 nmol/L和槲皮素40μmol/L,复氧4 h。采用MTT法测定细胞活力;比色法测定培养液LDH活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2基因家族中的促凋亡基因(Bax)蛋白表达。结果与Con组比较,H/R组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05)。与H/R组比较,H/R+Que组细胞存活率升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,p-Akt表达上调,Bcl-2/Bax增高(P均<0.05)。与H/R+Que组比较,H/R+Que+W组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05)。结论槲皮素后处理通过激活PI3K/Akt信号途径减轻H/R引起的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 槲皮素 缺氧 心肌细胞 PI3K/AKT信号通路 细胞凋亡
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氧化应激在七氟醚保护大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用 被引量:3
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作者 刘甦 岳红 +1 位作者 杨晓瑞 苏佳灿 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第21期26-27,共2页
目的探讨七氟醚预处理对缺氧/复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的保护作用及氧化应激在其中的作用。方法将H9 c2细胞随机分为正常对照组(C组)、H/R组及七氟醚预处理组(S组),缺氧2 h后复氧1 h,观察心肌细胞活力及细胞内活性氧,同时检测心肌... 目的探讨七氟醚预处理对缺氧/复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的保护作用及氧化应激在其中的作用。方法将H9 c2细胞随机分为正常对照组(C组)、H/R组及七氟醚预处理组(S组),缺氧2 h后复氧1 h,观察心肌细胞活力及细胞内活性氧,同时检测心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与C组比较,H/R组细胞存活显著减少,细胞内活性氧增多,SOD及GSH-Px活性减弱,MDA含量增多(P均<0.05);与H/R组比较,S组细胞存活显著增多,细胞内活性氧减少,SOD及GSH-Px活性增强,MDA含量减少(P均<0.05)。结论七氟醚可能通过抑制心肌细胞活性氧产生、增强抗氧化酶活性以减轻心肌细胞的H/R损伤。 展开更多
关键词 心肌细胞 七氟醚 缺氧/ 化应激 大鼠
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黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:4
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作者 苏丽华 王璇琳 +7 位作者 贺敏 李伟静 任素萍 王春燕 乔志新 丁雪洁 何跃忠 于群 《中国医药导报》 CAS 2014年第12期21-24,F0003,共5页
目的研究黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制。方法取大鼠胚胎心肌细胞(H9c2),随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧/复氧+低、中、高剂量药物组(H/R+L、M、H组)。流式细胞术检测细胞... 目的研究黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制。方法取大鼠胚胎心肌细胞(H9c2),随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧/复氧+低、中、高剂量药物组(H/R+L、M、H组)。流式细胞术检测细胞凋亡、细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)和细胞内活性氧(ROS)产生情况;Western blot方法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),总丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(tAkt)和磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(pAkt)蛋白表达变化。结果药物组[(H/R+L)组至(H/R+H组)]细胞凋亡比例为(26.7±2.9)%至(6.1±1.1)%,较H/R组[(57.3±10.4)%]明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组比较,药物组ΔΨm升高,差异有高度统计学意义(P<0.01),ROS水平下降,差异有高度统计学意义(P<0.01),Bcl-2及pAkt表达升高,Bax及tAkt表达无明显变化。结论黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,可抑制心肌细胞凋亡,其可能与Bcl-2/Bax调控和激活磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Akt)信号通路有关。 展开更多
关键词 黑青稞 籽皮提取物 心肌细胞 缺氧 凋亡
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PKC在枸橼酸舒芬太尼预处理大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型中的作用 被引量:4
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作者 高小茹 王萌 +1 位作者 张冬梅 宋华丽 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第7期688-692,共5页
目的蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路是预处理早期保护机制细胞信号传递的共同通路,PKC是预处理早期保护的必备信号传递物质。文中探讨PKC在枸橼酸舒芬太尼预处理大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型中的作用。方法原代心肌细胞分... 目的蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路是预处理早期保护机制细胞信号传递的共同通路,PKC是预处理早期保护的必备信号传递物质。文中探讨PKC在枸橼酸舒芬太尼预处理大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型中的作用。方法原代心肌细胞分离培养。将5 d的心肌细胞分成对照组、缺氧/复氧组、舒芬太尼组和佛波醇+枸橼酸舒芬太尼组。对照组细胞培养不予任何处理,建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,舒芬太尼组加入舒芬太尼至终浓度0.0003μmol/L,佛波醇+舒芬太尼组使用佛波醇干预10 min后再给予枸橼酸舒芬太尼,并在各组相应处理后取材检测细胞增殖情况。免疫荧光共聚焦技术观察Connexin43(Cx43)蛋白的平均光密度,流式细胞术检测各期的凋亡率,Western blot检测细胞缝隙连接蛋白Cx43总蛋白。结果与对照组相比,缺氧/复氧组、舒芬太尼处理组、佛波醇+舒芬太尼组细胞增殖明显增多(P<0.05);与缺氧/复氧组增殖(0.325 8±0.023 5)相比,舒芬太尼组(0.498 0±0.0432 4)、佛波醇+舒芬太尼组(0.724 0±0.123 4)的细胞增殖增多(P<0.05)。与舒芬太尼组增殖(0.498 0±0.043 24)相比,佛波醇+舒芬太尼组(0.724 0±0.123 4)的细胞增殖增多(P<0.05)。流式细胞术检测显示,与对照组相比,缺氧/复氧组、舒芬太尼组、佛波醇+舒芬太尼组早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率升高(P<0.05);与缺氧/复氧组早、晚、总凋亡率[(4.96±0.59)%、(18.77±0.92)%、(23.73±0.51)%]相比,舒芬太尼组[(5.86±0.38)%、(10.37±0.38)%、(16.23±0.32)%]、佛波醇+舒芬太尼处理组[(5.71±0.58)%、(5.54±0.43)%、(11.24±0.62)%]均显著降低(P<0.05),其中舒芬太尼处理组较佛波醇+舒芬太尼处理组晚期总凋亡率均低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论枸橼酸舒芬太尼对缺氧复氧损伤的心肌具有保护作用,PKC激动剂联合枸橼酸舒芬太尼对心肌细胞缺氧/复氧损伤有叠加的保护效应。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 枸橼酸舒芬太尼 缺氧/损伤 CX43
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原花青素通过内质网应对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用 被引量:4
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作者 王鑫 王巍 +1 位作者 张君丞 贾大林 《中国医药导报》 CAS 2016年第32期29-33,共5页
目的观察原花青素(PCs)通过抑制内质网应激对H9C2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后损伤的保护作用。方法将培养的H9C2心肌细胞随机分为5组:对照组、缺氧/复氧组(H/R组)、低剂量PCs+H/R组(LPCs组)、中剂量PCs+缺氧复氧组(MPCs组)、高剂量PCs+缺... 目的观察原花青素(PCs)通过抑制内质网应激对H9C2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后损伤的保护作用。方法将培养的H9C2心肌细胞随机分为5组:对照组、缺氧/复氧组(H/R组)、低剂量PCs+H/R组(LPCs组)、中剂量PCs+缺氧复氧组(MPCs组)、高剂量PCs+缺氧复氧组(HPCs组)。对照组心肌细胞正常培养至实验结束,H/R组行缺氧3 h后复氧3 h,PCs组分别于缺氧前30 min给予50、100、200μg/m L的PCs培养再行缺氧/复氧过程。实验后MTT法测定细胞生存率;测定乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术检测心肌细胞凋亡;Western blot测定内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(pJNK)、Caspase-12的表达。结果与对照组比较,H/R组细胞生存率显著降低(P<0.05),LDH活性和细胞凋亡率显著升高(P<0.05);H/R组GRP78、CHOP、p-JNK、Caspase-12蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);给予不同浓度PCs干预后,PCs预处理组细胞生存率较H/R组明显升高(LPCs组除外),LDH活性和细胞凋亡率明显降低(P<0.05),PCs预处理组GRP78、CHOP、p-JNK、Caspase-12蛋白表达较H/R组明显下降(P<0.05),中高剂量PCs抑制作用较低剂量强(P<0.05)。结论 H/R可诱导心肌细胞内质网应激,引起细胞损伤和凋亡;PCs可以通过抑制内质网应激发挥其保护作用,减少细胞损伤和凋亡。 展开更多
关键词 原花青素 H9C2心肌细胞 缺氧/ 内质网应激
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褪黑素对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制 被引量:3
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作者 杨吉平 费琳 +2 位作者 钟钰西 余蕾 苟兴春 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第8期761-765,共5页
目的研究褪黑素(MLT)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用,并探讨其机制。方法将H9c2心肌细胞随机分为对照组、H/R组、MLT组和受体相互作用蛋白激酶3抑制剂(GSK-872)组。对照组用不含药物的DMEM处理,H/R组对H9c2细胞进行缺氧4 h... 目的研究褪黑素(MLT)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用,并探讨其机制。方法将H9c2心肌细胞随机分为对照组、H/R组、MLT组和受体相互作用蛋白激酶3抑制剂(GSK-872)组。对照组用不含药物的DMEM处理,H/R组对H9c2细胞进行缺氧4 h/复氧6 h处理,MLT组和GSK-872组细胞在H/R前2 h分别给予100μmol/L MLT和5μmol/L GSK-872预处理。采用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,碘化丙啶(PI)染色观察细胞坏死情况,Western blot检测RIPK3和磷酸化钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶(p-CaMK)Ⅱ的表达。结果与对照组比较,H/R组细胞存活率显著下降(P<0.01),培养液中LDH含量明显升高(P<0.01),坏死细胞数量显著增多(P<0.01),RIPK3和p-CaMKⅡ蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与H/R组比较,MLT组和GSK-872组细胞存活率明显提高(P<0.01),LDH含量显著降低(P<0.01),坏死细胞明显减少(P<0.01),RIPK3和p-CaMKⅡ蛋白的表达明显下调(P<0.01)。而MLT组与GSK-872组上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论褪黑素可减轻H9c2心肌细胞的H/R损伤,其机制可能与抑制RIPK3/CaMKⅡ信号通路有关。 展开更多
关键词 褪黑素 H9C2心肌细胞 缺氧/损伤 受体相互作用蛋白激酶3 钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ
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厌氧培养箱法建立大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型 被引量:2
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作者 夏中元 王宇 刘菊英 《临床误诊误治》 2013年第10期102-104,共3页
目的探讨建立大鼠心肌细胞H9c2缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤模型的一种新方法。方法实验使用大鼠心肌细胞H9c2,随机分为对照组和实验组,对照组常规培养不做处理,实验组分为缺氧2、4、8、12 h及缺氧后复氧2 h组。缺氧时换... 目的探讨建立大鼠心肌细胞H9c2缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤模型的一种新方法。方法实验使用大鼠心肌细胞H9c2,随机分为对照组和实验组,对照组常规培养不做处理,实验组分为缺氧2、4、8、12 h及缺氧后复氧2 h组。缺氧时换不含血清的低糖DMEM培养基,再置入85%N2、10%H2、5%CO2缺氧环境。缺氧后,加入新鲜DMEM培养基,置入二氧化碳培养箱中继续培养2 h。苔盼蓝染色检测细胞存活率,Annexin V/PI染色行流式细胞术检测细胞凋亡率,分光光度法检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果大鼠心肌细胞经过H/R处理后,与对照组比,细胞存活率显著下降,LDH含量升高,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用厌氧培养箱法建立大鼠心肌细胞H/R损伤模型简单易行,重复性好。 展开更多
关键词 心肌缺血 再灌注损伤 缺氧 细胞模型 大鼠
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神经再生素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:1
9
作者 郑民 郑艳 徐济良 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期552-554,共3页
目的:探讨神经再生素(nerve regeneration factor,NRF)对缺氧/再复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)心肌细胞的保护作用。方法:取Winstar乳鼠心脏,制成心肌细胞悬液,贴壁法培养心肌细胞并进行缺氧/再复氧损伤,观察神经再生素对缺氧/再复... 目的:探讨神经再生素(nerve regeneration factor,NRF)对缺氧/再复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)心肌细胞的保护作用。方法:取Winstar乳鼠心脏,制成心肌细胞悬液,贴壁法培养心肌细胞并进行缺氧/再复氧损伤,观察神经再生素对缺氧/再复氧心肌细胞形态及细胞内SOD、MDA及LDH水平的影响,采用流式细胞仪双标法检测心肌细胞凋亡百分率。结果:神经再生素能升高SOD活性,降低MDA含量和LDH活性,减少心肌细胞凋亡率。结论:神经再生素对缺氧/再复氧心肌细胞损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 神经再生素 缺氧/缺氧 心肌细胞 凋亡
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檀香提取物调控miR-199a-3p对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用 被引量:4
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作者 何志凌 龙文杰 招煦杰 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第7期840-847,共8页
目的探讨檀香提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其分子机制。方法建立心肌细胞H/R模型,并加入不同浓度(0.1,0.2,0.4 mg/ml)的檀香提取物。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,商品试剂盒检测乳酸... 目的探讨檀香提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其分子机制。方法建立心肌细胞H/R模型,并加入不同浓度(0.1,0.2,0.4 mg/ml)的檀香提取物。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,商品试剂盒检测乳酸盐脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-199a-3p的表达。将心肌细胞H9c2分为H/R+miR-NC组、H/R+miR-199a-3p组、H/R+anti-miR-NC组、H/R+anti-miR-199a-3p、H/R+0.4 mg/ml檀香+miR-NC组、H/R+0.4 mg/ml檀香+miR-199a-3p组、H/R+0.4 mg/ml檀香+anti-miR-NC组、H/R+0.4 mg/ml檀香+anti-miR-199a-3p组。CCK-8法、流式细胞术、商品试剂盒测量细胞存活、凋亡和损伤情况。结果与H/R组比较,H/R+檀香组细胞存活率、miR-199a-3p的表达升高(P<0.05),凋亡率、LDH和CK活性降低(P<0.05)。与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-199a-3p组细胞存活率升高(P<0.05),凋亡率、LDH和CK活性降低(P<0.05)。与H/R+anti-miR-NC组比较,H/R+anti-miR-199a-3p组细胞存活率降低(P<0.05),凋亡率、LDH和CK活性升高(P<0.05)。与H/R+0.4 mg/ml檀香+anti-miR-NC组比较,H/R+0.4 mg/ml檀香+anti-miR-199a-3p组细胞存活率降低(P<0.05),凋亡率、LDH和CK活性升高(P<0.05)。与H/R+0.4 mg/ml檀香+miR-NC组比较,H/R+0.4 mg/ml檀香+miR-199a-3p组细胞存活率升高(P<0.05),凋亡率、LDH和CK活性降低(P<0.05)。结论檀香提取物上调miR-199a-3p对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 檀香提取物 miR-199a-3p 心肌细胞 缺氧/
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丙泊酚后处理在高糖环境下改善H9c2心肌细胞缺氧/复氧诱导的凋亡和自噬 被引量:2
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作者 曹炜炜 张欢 +1 位作者 张月梅 刘建军 《中国心血管病研究》 CAS 2024年第2期185-192,共8页
目的探讨丙泊酚后处理(propofol postconditioning,P-Post C)在高糖环境下对H9c2心肌细胞缺血/复氧诱导的凋亡和自噬的改善作用。方法2023年4月于上海市奉贤区中心医院开展实验,将大鼠心脏来源的H9c2细胞暴露于高糖48 h,然后在不存在或... 目的探讨丙泊酚后处理(propofol postconditioning,P-Post C)在高糖环境下对H9c2心肌细胞缺血/复氧诱导的凋亡和自噬的改善作用。方法2023年4月于上海市奉贤区中心医院开展实验,将大鼠心脏来源的H9c2细胞暴露于高糖48 h,然后在不存在或存在不同浓度的P-Post C后处理的情况下,在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)。细胞分组:NC组、HG组、NC+H/R组、HG+H/R组、HG+H/R+P12.5组、HG+H/R+P25组、HG+H/R+P50组、HG+H/R+P100组和HG+H/R+P25+Brusatol组。确定丙泊酚的浓度后,在使用或不使用Nrf2/HO-1通路抑制剂的情况下,对H9c2细胞进行H/R和P-Post C处理,以探索它们在P-Post C介导的高糖下对凋亡和自噬细胞死亡的保护中的作用。结果结果显示,含或不含H/R的高糖降低了H9c2细胞的活力,增加了乳酸脱氢酶的释放和活性氧的产生,所有这些都被P-Post C显著逆转,尤其是在25μmol/L(P25)浓度下(P<0.05)。此外,发现丙泊酚(P25)降低H9c2细胞的凋亡和自噬,同时增加Nrf2和HO-1的表达(P<0.05)。丙泊酚(P25)对H/R损伤的保护作用通过使用Nrf2/HO-1通路抑制剂而逆转(P<0.05)。结论P-Post C通过上调高糖状态下的Nrf2/HO-1通路活性,减轻了H/R损伤诱导的H9c2心脏细胞凋亡和自噬。 展开更多
关键词 丙泊酚后处理 H9c2心肌细胞 缺氧/ 凋亡 自噬 Nrf2/HO-1通路
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肉豆蔻-8散通过JAK2/STAT3信号通路减轻缺氧/复氧心肌细胞的损伤 被引量:7
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作者 钱新宇 肖云峰 +2 位作者 王玉华 杨秀华 王娜 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期593-599,共7页
研究肉豆蔻-8散提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其与酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导子和激活子3(STAT3)信号通路的关系。使用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立H9c2细胞缺氧/复氧损伤模型;采用CCK-8法检测细胞活力;采用全自动生化... 研究肉豆蔻-8散提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其与酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导子和激活子3(STAT3)信号通路的关系。使用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立H9c2细胞缺氧/复氧损伤模型;采用CCK-8法检测细胞活力;采用全自动生化分析仪检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;采用试剂盒法测定细胞中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;采用Hoechst染色法检测细胞凋亡程度;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组心肌细胞JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Bcl-2、Bax的蛋白表达。Na2S2O4对H9c2细胞活力的半数抑制量为2mmol/L;与模型组比较,不同浓度肉豆蔻-8散提取物均能提高细胞活力;能显著降低细胞培养液中CK、LDH、AST的水平、能显著增加细胞中CAT、SOD、GSH-Px的水平;同时可显著增加p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2的蛋白表达、显著减少Bax的蛋白表达,而AG490阻断剂组可减弱肉豆蔻-8散提取物的作用。肉豆蔻-8散通过JAK2/STAT3信号通路发挥对Na2S2O4诱导缺氧/复氧损伤心肌细胞的保护作用。 展开更多
关键词 肉豆蔻-8散 连二亚硫酸钠 AG490阻断剂 心肌细胞缺氧/复氧损伤 酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导子和激活子3(STAT3)
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缬沙坦调节ROS/NLRP3/caspase-1信号通路对缺氧复氧诱导心肌细胞焦亡的影响 被引量:1
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作者 陈晨 陈莉洁 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第9期909-913,共5页
目的探究缬沙坦(VAL)调节活性氧(ROS)/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶1(caspase-1)信号通路对缺氧复氧(H/R)诱导心肌细胞焦亡的影响。方法用浓度为0.1~3.2μmol/L的缬沙坦处理后,H/R处理H9C2细胞,MTT法测细胞活性,... 目的探究缬沙坦(VAL)调节活性氧(ROS)/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶1(caspase-1)信号通路对缺氧复氧(H/R)诱导心肌细胞焦亡的影响。方法用浓度为0.1~3.2μmol/L的缬沙坦处理后,H/R处理H9C2细胞,MTT法测细胞活性,筛选缬沙坦最佳浓度;将H9C2细胞分为Control组,H/R组,缬沙坦低、中、高浓度组(VAL-L组、VAL-M组、VAL-H组),缬沙坦高浓度+ROS激活剂组(VAL-H+TMAO组);用JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(MMP)水平;用ELISA法检测H9C2细胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)含量;Western blot检测IL-1β、IL-18、NLRP3、caspase-1蛋白表达。结果浓度为0.1~3.2μmol/L的缬沙坦可促进H/R诱导的H9C2细胞增殖,选择缬沙坦浓度为0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L进行实验。与Control组相比,H/R组ROS、LDH、MDA、PI阳性率、IL-1β、IL-18、ROS、NLRP3、caspase-1表达水平明显升高,MMP、SOD水平降低(P<0.001);与H/R组比较,VAL-L、VAL-M、VAL-H组H9C2细胞ROS、LDH、MDA、PI阳性率、IL-1β、IL-18、ROS、NLRP3、caspase-1表达水平降低,MMP、SOD水平上升(P<0.001);与VAL-H组比较,VAL-H+TMAO组H9C2细胞ROS、LDH、MDA、PI阳性率、IL-1β、IL-18、ROS、NLRP3、caspase-1表达水平明显上升,MMP、SOD水平下降(P<0.001)。结论缬沙坦可能抑制ROS/NLRP3/caspase-1信号通路抑制H/R诱导心肌细胞焦亡。 展开更多
关键词 心肌细胞 缬沙坦 活性/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3/胱天蛋白酶1 缺氧 焦亡
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miR-451对心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护作用及其机制 被引量:3
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作者 胡笑容 谢菁 +3 位作者 马瑞松 廖芫熙 李雪飞 江洪 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第17期1-3,共3页
目的探讨miR-451对心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护作用及其心肌细胞高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达变化。方法培养乳鼠心室肌细胞,制备缺氧再复氧模型,并随机分为对照组(Con组)、缺氧再复氧组(AR组)、AR+Ad-GFP组(空病毒组)、AR+Ad-miR-451... 目的探讨miR-451对心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护作用及其心肌细胞高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达变化。方法培养乳鼠心室肌细胞,制备缺氧再复氧模型,并随机分为对照组(Con组)、缺氧再复氧组(AR组)、AR+Ad-GFP组(空病毒组)、AR+Ad-miR-451组(miR-451上调组)、AR+Ad-asmiR-451组(miR-451下调组)。检测五组心肌细胞存活率、凋亡率以及HMGB1 mRNA、HMGB1和激活细胞凋亡蛋白酶3(caspase-3)表达水平。利用荧光素酶检测法在HEK293细胞中进一步确认miR-451对HMGB1作用靶点。结果与Con组比较,AR组、空病毒组、miR-451上调组、miR-451下调组心肌细胞存活率降低、凋亡率增高,心肌细胞HMGB1 mRNA、HMGB1、激活caspase-3表达增高(P均<0.05)。与AR组比较,Ad-miR-451组心肌细胞存活率增高、凋亡率降低,心肌细胞HMGB1 mRNA、HMGB1、激活caspase-3表达降低(P均<0.05)。miR-451识别HMGB1 mRNA的3'端非编码区并以此为作用靶点抑制HMGB1表达。结论上调miR-451对心肌细胞缺氧再复氧损伤有保护作用,此作用是通过miR-451抑制HMGB1 mRNA表达而实现的。 展开更多
关键词 心肌细胞 缺氧损伤 微小RNA-451 高迁移率族蛋白1
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心肌细胞缺氧复氧损伤时Mipu1启动子活性、Mipu1 mRNA表达变化及意义 被引量:2
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作者 屈顺林 郭芳 +3 位作者 范文静 张弛 詹向阳 姜志胜 《山东医药》 CAS 2012年第23期5-7,共3页
目的探讨心肌细胞缺氧复氧损伤时心肌缺血预适应表达上调蛋白1(Mipu1)启动子活性的变化及其作用。方法按本课题组的常规方法复制心肌细胞缺氧复氧模型,先予缺氧(95%N2-5%CO2,无血清低糖DMEM)处理6 h,再分别复氧(95%空气-5%CO2,10%FBS-高... 目的探讨心肌细胞缺氧复氧损伤时心肌缺血预适应表达上调蛋白1(Mipu1)启动子活性的变化及其作用。方法按本课题组的常规方法复制心肌细胞缺氧复氧模型,先予缺氧(95%N2-5%CO2,无血清低糖DMEM)处理6 h,再分别复氧(95%空气-5%CO2,10%FBS-高糖DMEM)6、12、24 h。采用MTT法检测心肌细胞活性,比色法测定心肌细胞LDH活性,双荧光素酶报告基因技术检测启动子PGL3-Mipu1活性,实时定量PCR法检测Mipu1mRNA表达。结果缺氧6 h复氧(6、12、24 h)后心肌细胞活性减低,LDH释放增加,启动子PGL3-Mipu1活性增加,Mipu1 mRNA表达上调,且在缺氧6 h复氧12 h时变化最明显。结论 Mipu1可能参与了心肌细胞的缺氧复氧损伤,其可能通过调控凋亡相关基因发挥作用。 展开更多
关键词 缺氧 心肌细胞 心肌缺血预适应表达上调蛋白1 启动子
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SOCS1介导CT-1对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的保护作用 被引量:2
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作者 李菊香 鲍慧慧 +7 位作者 万磊 夏子荣 颜素娟 苏海 吴延庆 洪葵 吴清华 程晓曙 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第12期48-50,共3页
目的通过使用细胞因子信号抑制物1(SOCS1))反义寡核苷酸(ASODN)干预,从细胞和分子水平阐明SOCS1如何介导心肌营养素-1(CT-1)对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法用改良的方法培养出生1~3d的乳鼠心肌细胞,分为对照组:DMEM液培养6 h... 目的通过使用细胞因子信号抑制物1(SOCS1))反义寡核苷酸(ASODN)干预,从细胞和分子水平阐明SOCS1如何介导心肌营养素-1(CT-1)对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法用改良的方法培养出生1~3d的乳鼠心肌细胞,分为对照组:DMEM液培养6 h;缺氧复氧组;CT-1组:缺氧复氧+CT-1;ASODN组1:缺氧复氧+CT-1+ASODN(终浓度为20μmol/L);ASODN组2;SODN组:缺氧复氧+CT-1+SODN;ScODN组:缺氧复氧+CT-1+ScODN。测定心肌细胞的存活率、线粒体膜电位(Δψm)、细胞活性氧(ROS)、细胞凋亡率及SOCS1水平。结果缺氧复氧组较对照组心肌细胞凋亡率增加、ROS水平升高、心肌细胞存活率降低、Δψm下降,P均<0.05;而CT-1组较缺氧复氧组心肌细胞存活率上升、凋亡率减少、Δψm增加。SOCS1 ASODN干预后,心肌细胞凋亡率和ROS水平明显升高,Δψm水平下降。缺氧复氧组SOCS1 mRNA和蛋白较对照组有所增加;CT-1组SOCS1 mRNA和蛋白均较缺氧复氧组升高,SOCS1 ASODN干预后下降。结论 SOCS1介导了CT-1减轻缺氧复氧引起的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌营养素-1 心肌损伤 信号转导 缺氧
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生脉注射液对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用 被引量:4
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作者 曹艳花 刘珊珊 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第14期38-39,共2页
目的探讨生脉注射液对纯化培养的乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用纯化培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为正常对照组、缺氧复氧损伤组、缺氧复氧损伤+维拉帕米组、缺氧复氧损伤+生脉注射液组,分别测定其... 目的探讨生脉注射液对纯化培养的乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用纯化培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为正常对照组、缺氧复氧损伤组、缺氧复氧损伤+维拉帕米组、缺氧复氧损伤+生脉注射液组,分别测定其乳酸脱氢酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)及ATP水平。结果生脉注射液可明显提高LDH、SOD活性,降低MDA、提高ATP水平。结论生脉注射液具有明显的抗缺氧复氧损伤、保护心肌的作用。 展开更多
关键词 生脉注射液 缺氧损伤 心肌细胞
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lncRNA FGD5-AS1靶向miR-421对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响 被引量:3
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作者 孟晓京 刘亚军 项宁 《山东医药》 CAS 2021年第16期30-34,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1与微小RNA-421(miR-421)的靶向调控关系及其对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法利用H/R诱导心肌细胞H9C2损伤,采用实时荧光定量PCR检测lncRNAFGD5-AS1和miR-421表达。在心肌细胞中转... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1与微小RNA-421(miR-421)的靶向调控关系及其对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法利用H/R诱导心肌细胞H9C2损伤,采用实时荧光定量PCR检测lncRNAFGD5-AS1和miR-421表达。在心肌细胞中转染pcDNA-FGD5-AS1、anti-miR-421,或共转染pcDNAFGD5-AS1和miR-421,之后进行H/R损伤。采用试剂盒评估丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,流式细胞术分析凋亡率,Westernblotting法测定B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。生物信息学预测与双荧光素酶报告实验验证lncRNAFGD5-AS1对miR-421的靶向调控。结果缺氧/复氧使心肌细胞中lncRNAFGD5-AS1表达、SOD活性、GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达减少,并使miR-421表达、MDA含量、凋亡率、Bax蛋白表达增多(P均<0.05)。lncRNAFGD5-AS1过表达降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞的MDA含量、凋亡率、Bax蛋白表达,提高SOD活性、GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达(P均<0.05),抑制miR-421表达与其效果相同。lncRNAFGD5-AS1靶向调控miR-421的表达。共转染pcDNA-FGD5-AS1和miR-421提高缺氧/复氧诱导的心肌细胞的MDA含量、凋亡率、Bax蛋白表达,降低SOD活性、GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达(P均<0.05)。结论在缺氧/复氧诱导的心肌细胞中,lncRNAFGD5-AS1通过靶向miR-421,减轻细胞氧化应激,并抑制其凋亡,从而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 缺氧/ 心肌细胞 长链非编码RNAFGD5-AS1 微小RNA-421 细胞凋亡 化应激
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参芪心复康抗培养心肌细胞缺氧再给氧损伤的观察 被引量:1
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作者 李绍芝 朱文锋 +1 位作者 谭晓红 黄献平 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 1999年第2期20-21,共2页
心肌缺氧再给氧损伤一旦发生,常可危及患者的生命,至今其发病机理未能完全阐明,国内外亦无理想的西药进行防治。笔者采用临床治疗冠心病心绞痛的有效中药复方参芪心复康对抗培养心肌细胞缺氧再给氧损伤获得了较好的效果,现报道如下。1 ... 心肌缺氧再给氧损伤一旦发生,常可危及患者的生命,至今其发病机理未能完全阐明,国内外亦无理想的西药进行防治。笔者采用临床治疗冠心病心绞痛的有效中药复方参芪心复康对抗培养心肌细胞缺氧再给氧损伤获得了较好的效果,现报道如下。1 材料与方法1.1 心肌细胞培养 选用2~4天的NIH小白鼠,用75%乙醇消毒,虹膜剪剪开胸腔,用组织镊夹取乳鼠心脏,置于Hank’s液中洗涤后,剪开心房,再用Hank’s液反复冲洗,洗净残留积血,将乳鼠心室置于离心管的侧壁上。 展开更多
关键词 心肌缺氧 再给损伤 参芪心 中医药疗法
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丹参水提物对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用 被引量:3
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作者 张东涛 黄伟哲 陈喜珊 《中国实用医药》 2015年第7期284-285,共2页
本文研究丹参水提物对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用。以乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺氧-复氧损伤模型,检测不同浓度丹参水提物预处理后细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转移酶(AST)的泄漏量及Akt... 本文研究丹参水提物对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用。以乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺氧-复氧损伤模型,检测不同浓度丹参水提物预处理后细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转移酶(AST)的泄漏量及Akt的磷酸化水平。丹参水提物对缺氧-复氧损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,这可能与它激活PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 缺氧- 心肌细胞 丹参水提物
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