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神经生长因子对H9c2心肌细胞缺氧/复氧后凋亡的保护作用及其机制
被引量：
15
1
作者
谢飞
魏珂
+2 位作者
闵苏
郝学超
朱贤林
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期506-510,共5页
目的探讨神经生长因子(NGF)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后凋亡的保护作用及其机制。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、NGF组(N组)、NGF+PI3k受体特异性阻断剂LY294002组(N+L组)和LY294002...
目的探讨神经生长因子(NGF)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后凋亡的保护作用及其机制。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、NGF组(N组)、NGF+PI3k受体特异性阻断剂LY294002组(N+L组)和LY294002组(L组)。C组用正常培养液在通有95%空气+5%CO2的37℃培养箱内正常培养8 h;H/R组用预先经95%N2+5%CO2的混合气饱和1 h的模拟缺氧液置换正常培养液后,放入通有95%N2+5%CO2的37℃培养箱缺氧培养4 h,然后将模拟缺氧液换用预先经95%空气+5%CO2饱和的正常培养液,在正常条件下复氧4 h;N组、N+L组和L组先缺氧培养4 h(缺氧条件同H/R组),再分别用预先经95%空气+5%CO2饱和的含NGF、NGF+LY294002和LY294002的正常培养液置换模拟缺氧液,在正常条件下复氧4 h。NGF和LY294002的终浓度分别为0.05 mg·L-1和3 mg·L-1。CCK-8比色法测定各组细胞的存活率;应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测胞内Akt磷酸化水平及内质网应激蛋白Caspase-12蛋白的表达。结果 N组与N+L组或H/R组或L组相比能明显提高H9c2心肌细胞经H/R损伤后的存活率,减少细胞凋亡率,上调Akt磷酸化水平,降低内质网应激蛋白Caspase-12表达;LY294002明显抑制了NGF对Akt磷酸化水平的上调作用。结论 NGF对经H/R损伤的H9c2心肌细胞有抗凋亡作用,其机制可能与PI3k-Akt通路有关。
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关键词
H9C2
心肌细胞
缺氧
复氧损伤
神经生长因子
PI3k-Akt通路
心肌细胞
存活
率
心肌细胞凋亡率
内质网应激蛋白
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题名
神经生长因子对H9c2心肌细胞缺氧/复氧后凋亡的保护作用及其机制
被引量：
15
1
作者
谢飞
魏珂
闵苏
郝学超
朱贤林
机构
重庆医科大学附属第一医院麻醉科
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期506-510,共5页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(No 81000066)
卫生部国家临床重点专科[No财社〔2011〕170号]
重庆市医学重点学科建设项目[No渝卫科教〔2007〕2号]
文摘
目的探讨神经生长因子(NGF)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后凋亡的保护作用及其机制。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、NGF组(N组)、NGF+PI3k受体特异性阻断剂LY294002组(N+L组)和LY294002组(L组)。C组用正常培养液在通有95%空气+5%CO2的37℃培养箱内正常培养8 h;H/R组用预先经95%N2+5%CO2的混合气饱和1 h的模拟缺氧液置换正常培养液后,放入通有95%N2+5%CO2的37℃培养箱缺氧培养4 h,然后将模拟缺氧液换用预先经95%空气+5%CO2饱和的正常培养液,在正常条件下复氧4 h;N组、N+L组和L组先缺氧培养4 h(缺氧条件同H/R组),再分别用预先经95%空气+5%CO2饱和的含NGF、NGF+LY294002和LY294002的正常培养液置换模拟缺氧液,在正常条件下复氧4 h。NGF和LY294002的终浓度分别为0.05 mg·L-1和3 mg·L-1。CCK-8比色法测定各组细胞的存活率;应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测胞内Akt磷酸化水平及内质网应激蛋白Caspase-12蛋白的表达。结果 N组与N+L组或H/R组或L组相比能明显提高H9c2心肌细胞经H/R损伤后的存活率,减少细胞凋亡率,上调Akt磷酸化水平,降低内质网应激蛋白Caspase-12表达;LY294002明显抑制了NGF对Akt磷酸化水平的上调作用。结论 NGF对经H/R损伤的H9c2心肌细胞有抗凋亡作用,其机制可能与PI3k-Akt通路有关。
关键词
H9C2
心肌细胞
缺氧
复氧损伤
神经生长因子
PI3k-Akt通路
心肌细胞
存活
率
心肌细胞凋亡率
内质网应激蛋白
Keywords
H9c2 cardiac myocytes
hypoxia/reoxy-genation injury
nerve growth factor
PI3k-Akt signalpathway
survival rate of cardiac myocytes
apoptoticpercentage
endoplasmic reticulum stress protein
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
R322.11 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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神经生长因子对H9c2心肌细胞缺氧/复氧后凋亡的保护作用及其机制
谢飞
魏珂
闵苏
郝学超
朱贤林
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
15
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