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长链非编码RNA-MIAT在转化生长因子β2诱导的晶状体上皮－间质转化中的作用
被引量：
4
1
作者
岳秀娟
苏胜
+3 位作者
王丽媛
吕嘉
王林
刘平
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期508-513,共6页
目的探讨长链非编码RNA（LncRNA）－心肌梗死相关转录物（MIAT）在转化生长因子β2（TGF-β2）诱导的晶状体上皮细胞（LECs）纤维化过程中的作用及其对后发性白内障形成的影响。 方法对LECs永生系SRA01/04细胞进行培养，将培养的细胞...
目的探讨长链非编码RNA（LncRNA）－心肌梗死相关转录物（MIAT）在转化生长因子β2（TGF-β2）诱导的晶状体上皮细胞（LECs）纤维化过程中的作用及其对后发性白内障形成的影响。 方法对LECs永生系SRA01/04细胞进行培养，将培养的细胞分为正常对照组和TGF-β2组，分别用DMEM培养液和含10 ng/ml TGF-β2DMEM培养液培养48 h，光学显微镜下观察TGF-β2诱导的各组细胞形态学变化，采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测细胞中MIAT及上皮－间质转化（EMT）相关标志物E－钙黏素（E-cad）、α－平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和胶原蛋白Ⅰ（CollⅠ）蛋白及其mRNA相对表达量变化；分别用siRNA空载体和siRNA-MIAT转染DMEM培养的（siNRA空载体组、siRNA-MIAT转染组）或用含10 ng/ml TGF-β2 DMEM培养的（siNRA＋TGF-β2组、siRNA-MIAT＋TGF-β2组）SRA01/04细胞48 h，光学显微镜下观察各组细胞形态学变化，采用实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测细胞中MIAT、E-cad、α-SMA、CollⅠ蛋白及其mRNA的表达变化。结果正常对照组培养细胞呈圆形和多角形，TGF-β2诱导组细胞呈长梭形。与正常对照组比较，TGF-β2诱导组细胞中MIAT mRNA、α-SMA mRNA和CollⅠmRNA相对表达量明显升高（2.497±0.644 vs.0.827±0.062；2.951±0.146 vs.1.085±0.517；2.115±0.090 vs.1.002±0.088），而E-Cad mRNA相对表达量明显下降（0.102±0.027 vs.1.020±0.262），差异均有统计学意义（P＝0.045、0.004、0.000、0.025），上述因子的蛋白水平表达趋势与mRNA相同。与siRNA空载体组比较，siRNA-MIAT转染组均能明显下降细胞内MIAT含量，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。与siRNA＋TGF-β2组比较，siRNA-MIAT＋TGF-β2组细胞中α-SMA、CollⅠ蛋白及其mRNA相对表达量均明显下降，差异均有统计学意义（均P〈0.01），E-cad蛋白及其mRNA相对表达量明显增加，差异有统计学意义（P＝0.008、0.000）。结论MIAT参与TGF-β2诱导的SRA01/04细胞EMT过程，下调MIAT可抑制晶状体上皮－间质转化的发生。
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关键词
心肌梗死相关转录物
长链非编码RNA
晶状体上皮细胞
上皮-间质转分化
后发性白内障
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职称材料
题名
长链非编码RNA-MIAT在转化生长因子β2诱导的晶状体上皮－间质转化中的作用
被引量：
4
1
作者
岳秀娟
苏胜
王丽媛
吕嘉
王林
刘平
机构
哈尔滨医科大学附属第一医院眼科医院
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期508-513,共6页
基金
国家自然科学基金项目（81470618）
黑龙江省自然科学基金项目（H2016038）
黑龙江省博士后科研启动金项目（LBH-Q15102）
文摘
目的探讨长链非编码RNA（LncRNA）－心肌梗死相关转录物（MIAT）在转化生长因子β2（TGF-β2）诱导的晶状体上皮细胞（LECs）纤维化过程中的作用及其对后发性白内障形成的影响。 方法对LECs永生系SRA01/04细胞进行培养，将培养的细胞分为正常对照组和TGF-β2组，分别用DMEM培养液和含10 ng/ml TGF-β2DMEM培养液培养48 h，光学显微镜下观察TGF-β2诱导的各组细胞形态学变化，采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测细胞中MIAT及上皮－间质转化（EMT）相关标志物E－钙黏素（E-cad）、α－平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和胶原蛋白Ⅰ（CollⅠ）蛋白及其mRNA相对表达量变化；分别用siRNA空载体和siRNA-MIAT转染DMEM培养的（siNRA空载体组、siRNA-MIAT转染组）或用含10 ng/ml TGF-β2 DMEM培养的（siNRA＋TGF-β2组、siRNA-MIAT＋TGF-β2组）SRA01/04细胞48 h，光学显微镜下观察各组细胞形态学变化，采用实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测细胞中MIAT、E-cad、α-SMA、CollⅠ蛋白及其mRNA的表达变化。结果正常对照组培养细胞呈圆形和多角形，TGF-β2诱导组细胞呈长梭形。与正常对照组比较，TGF-β2诱导组细胞中MIAT mRNA、α-SMA mRNA和CollⅠmRNA相对表达量明显升高（2.497±0.644 vs.0.827±0.062；2.951±0.146 vs.1.085±0.517；2.115±0.090 vs.1.002±0.088），而E-Cad mRNA相对表达量明显下降（0.102±0.027 vs.1.020±0.262），差异均有统计学意义（P＝0.045、0.004、0.000、0.025），上述因子的蛋白水平表达趋势与mRNA相同。与siRNA空载体组比较，siRNA-MIAT转染组均能明显下降细胞内MIAT含量，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。与siRNA＋TGF-β2组比较，siRNA-MIAT＋TGF-β2组细胞中α-SMA、CollⅠ蛋白及其mRNA相对表达量均明显下降，差异均有统计学意义（均P〈0.01），E-cad蛋白及其mRNA相对表达量明显增加，差异有统计学意义（P＝0.008、0.000）。结论MIAT参与TGF-β2诱导的SRA01/04细胞EMT过程，下调MIAT可抑制晶状体上皮－间质转化的发生。
关键词
心肌梗死相关转录物
长链非编码RNA
晶状体上皮细胞
上皮-间质转分化
后发性白内障
Keywords
Myocardial infarction-associated transcript
Long non-coding RNA
Lens epithelial cells
Epithelial to mesenchymal transition
Posterior capsule opacification
分类号
R776.1 [医药卫生—眼科]
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被引量
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1
长链非编码RNA-MIAT在转化生长因子β2诱导的晶状体上皮－间质转化中的作用
岳秀娟
苏胜
王丽媛
吕嘉
王林
刘平
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
4
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