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靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
被引量：
3
1
作者
刘传苗
刘明珠
+3 位作者
黄艳平
储菲
李永海
李正红
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期401-407,共7页
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯...
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响。结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关。结论制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞。
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关键词
c-Met
单链抗体(scFv)
A549
细胞
靶向性
补体
依赖
的
细胞
毒性
(CDC)
抗体
依赖性
细胞
介导的
细胞
毒作用(ADCC)
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职称材料
人类白细胞抗原(HLA)与骨髓移植
2
作者
叶根耀
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1994年第1期9-16,共8页
各种造血干细胞缺损或调控失常的疾病如急、慢性白血病,重症再生障碍性贫血等以及8Gy以上全身照射引起的极重度骨髓型和轻度肠型急性放射病,一般临床治疗效果不佳,特别是后者,常规综合对症治疗结合辐射防治药物的应用难以奏效。自Jacobs...
各种造血干细胞缺损或调控失常的疾病如急、慢性白血病,重症再生障碍性贫血等以及8Gy以上全身照射引起的极重度骨髓型和轻度肠型急性放射病,一般临床治疗效果不佳,特别是后者,常规综合对症治疗结合辐射防治药物的应用难以奏效。自Jacobson (1950)和Lorenz(1951)以致死剂量照射小白鼠后,可因输入骨髓或脾细胞获得保护以来,骨髓移植(BMT)的实验研究十分活跃,日益深入。Thomas于1957年和Mathe最先应用于临床。
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关键词
人类白
细胞
抗原
骨髓移植
无关供者
多态性
HLA相合
再生障碍性贫血
造血干
细胞
缺损
细胞
学
HLA分型
补体
依赖性
微量
淋巴
细胞
毒试验
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职称材料
肾移植PRA检测及其临床意义
3
作者
陈连周
王长希
+2 位作者
傅茜
徐鸿绪
曾文涛
《实用医学杂志》
CAS
2001年第11期1038-1039,共2页
目的 :探讨酶联免疫法 (ELISA)和微量补体依赖性细胞毒法 (CDC)检测肾移植受者群体反应性抗体(PRA)的优缺点。方法 :将肾脏病患者首次移植术后 1个月血清 40份和首次移植肾失功恢复血透的患者血清 2 2份 ,分别以ELISA和CDC作PRA检测。结...
目的 :探讨酶联免疫法 (ELISA)和微量补体依赖性细胞毒法 (CDC)检测肾移植受者群体反应性抗体(PRA)的优缺点。方法 :将肾脏病患者首次移植术后 1个月血清 40份和首次移植肾失功恢复血透的患者血清 2 2份 ,分别以ELISA和CDC作PRA检测。结果 :ELISA检测耗时 15 0min ,检测出HLA Ⅰ类抗体阳性 2 9例 ,HLA Ⅱ类抗体阳性 2 0例 ;CDC检测耗时 130min ,检测出HLA Ⅰ类抗体阳性 2 8例 ,无法检测HLA Ⅱ类抗体。其中两种方法检测的 2 8例阳性一致。结论 :ELISA检测群体反应性抗体方法稳定、敏感度高、结果准确、操作简便 ,重复性好 ,值得临床推广应用。
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关键词
肾移植
HLA抗原
酶联免疫法
微量补体依赖性细胞毒性
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职称材料
题名
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
被引量：
3
1
作者
刘传苗
刘明珠
黄艳平
储菲
李永海
李正红
机构
蚌埠医学院第一附属医院感染科
蚌埠医学院科研中心生理学实验室
蚌埠医学院第一附属医院药剂科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期401-407,共7页
基金
国家自然科学基金(81472656)
安徽省教育厅自然科学基金重点项目(KJ2017A247)
蚌埠医学院研究生科研创新项目(Byycx1634)
文摘
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响。结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关。结论制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞。
关键词
c-Met
单链抗体(scFv)
A549
细胞
靶向性
补体
依赖
的
细胞
毒性
(CDC)
抗体
依赖性
细胞
介导的
细胞
毒作用(ADCC)
Keywords
c-Met
scFv
A549 cells
targeting
complement-dependent cytotoxicity（CDC）
antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity（ADCC）
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人类白细胞抗原(HLA)与骨髓移植
2
作者
叶根耀
机构
北京北太平路医院
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1994年第1期9-16,共8页
文摘
各种造血干细胞缺损或调控失常的疾病如急、慢性白血病,重症再生障碍性贫血等以及8Gy以上全身照射引起的极重度骨髓型和轻度肠型急性放射病,一般临床治疗效果不佳,特别是后者,常规综合对症治疗结合辐射防治药物的应用难以奏效。自Jacobson (1950)和Lorenz(1951)以致死剂量照射小白鼠后,可因输入骨髓或脾细胞获得保护以来,骨髓移植(BMT)的实验研究十分活跃,日益深入。Thomas于1957年和Mathe最先应用于临床。
关键词
人类白
细胞
抗原
骨髓移植
无关供者
多态性
HLA相合
再生障碍性贫血
造血干
细胞
缺损
细胞
学
HLA分型
补体
依赖性
微量
淋巴
细胞
毒试验
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
肾移植PRA检测及其临床意义
3
作者
陈连周
王长希
傅茜
徐鸿绪
曾文涛
机构
中山医科大学附属第一医院
出处
《实用医学杂志》
CAS
2001年第11期1038-1039,共2页
基金
广东省自然科学基金资助项目 (课题编号 :960 1 31 )
文摘
目的 :探讨酶联免疫法 (ELISA)和微量补体依赖性细胞毒法 (CDC)检测肾移植受者群体反应性抗体(PRA)的优缺点。方法 :将肾脏病患者首次移植术后 1个月血清 40份和首次移植肾失功恢复血透的患者血清 2 2份 ,分别以ELISA和CDC作PRA检测。结果 :ELISA检测耗时 15 0min ,检测出HLA Ⅰ类抗体阳性 2 9例 ,HLA Ⅱ类抗体阳性 2 0例 ;CDC检测耗时 130min ,检测出HLA Ⅰ类抗体阳性 2 8例 ,无法检测HLA Ⅱ类抗体。其中两种方法检测的 2 8例阳性一致。结论 :ELISA检测群体反应性抗体方法稳定、敏感度高、结果准确、操作简便 ,重复性好 ,值得临床推广应用。
关键词
肾移植
HLA抗原
酶联免疫法
微量补体依赖性细胞毒性
分类号
R446.6 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
刘传苗
刘明珠
黄艳平
储菲
李永海
李正红
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人类白细胞抗原(HLA)与骨髓移植
叶根耀
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1994
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
肾移植PRA检测及其临床意义
陈连周
王长希
傅茜
徐鸿绪
曾文涛
《实用医学杂志》
CAS
2001
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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